多药耐药相关蛋白2:在肠道药物处置中的重要作用

多药耐药相关蛋白2(MRP2)是ATP结合盒转运蛋白超家族成员之一,是一种ATP依赖性有机阴离子转运蛋白。鉴于其广泛的底物专属性,MRP2在肠道药物处置中发挥着重要作用,包括肠吸收、肠分泌以及与肠道药物Ⅱ相代谢酶如谷胱甘肽-S-转移酶、UDP-葡萄糖醛酸转移酶及硫酸转移酶等的协同作用。此外,MRP2还影响着中药成分的肠吸收过程。

白血病多药耐药相关蛋白质类研究进展

多药耐药（multidrug resistance,MDR）最常见的机制是凋亡耐受和过表达某些能将抗癌药物从细胞内泵出的膜蛋白。过表达ABC转运子（ΑTP-binding cassette transports）转运子等膜蛋白则导致泵耐药（pump resistance）,

泉州地区儿童呼吸道感染肺炎链球菌对大环内酯类药物耐药相关基因分析

肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,SP）是引起儿童呼吸道感染特别是社区获得性呼吸道感染的重要致病菌。近年来SP对抗生素的耐药情况已日趋严重,其中大环内酯类抗生素耐药较为普遍。为了解泉州地区引起儿童呼吸道感染SP对常用抗生素的耐药情况及可能的耐药原因,

脑胶质瘤体外化疗药物敏感性试验与耐药基因蛋白表达的相关性研究

目的研究脑胶质瘤耐药相关基因蛋白的表达情况,分析其与化疗药物体外敏感性之间的相关性。方法采用组织培养药敏检测法测定50例脑胶质瘤标本对五种不同类型化疗药物:顺铂(cisplatin,DDP)、长春新碱(vincristine,VCR)、替尼泊甙(teniposide,VM26)、尼莫司汀(nimustine,ACNU)和替莫唑胺(temozolomide,TMZ)的体外敏感性(通过计算体外抑制率);同时在组织芯片平台上,运用免疫组织化学法检测耐药相关蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、P-170、TopoⅡ、谷胱苷肽-S-转移酶π(GST-π)的表达,并用免疫组织化学法和原位杂交法检测P53蛋白及p53基因的表达。结果①ACNU体外抑制率与GST-π表达水平之间呈显著性负相关(r=-0.318,P<0.05)。②耐药相关蛋白GST-π与P-170、TopoⅡ表达水平之间呈显著性相关(r分别为0.317和-0.298,P<0.05)。③突变型P53蛋白与野生型p53mRNA之间呈显著性负相关(r=-0.806,P<0.001)。④突变型P53蛋白与TopoⅡ表达水平之间呈显著性相关(r=0.401,P<0.01)。结论肿瘤体外药敏试验结合耐药相关基因蛋白的检测,对于胶质瘤个体化化疗方案的制定及临床化疗疗效的预测等具有重要意义。

碳青霉烯类耐药G^(-)杆菌的检出率与抗菌药物使用强度的相关性

目的分析碳青霉烯类耐药G^(-)杆菌(CRO)的检出率以及与常用抗菌药物使用强度的相关性,为降低其耐药性和促进临床合理使用抗菌药物提供参考。方法监测2013~2018年医院住院部4种主要CRO的检出率,统计相应年度住院部常用抗菌药物的使用强度,采用Pearson相关法分析4种耐药菌株的检出率与抗菌药物使用强度的相关性。结果2013~2018年4种主要CRO的各年度检出率均无明显变化趋势。碳青霉烯类耐药大肠埃希菌(CRECO)的检出率与氨基糖苷类的使用强度呈显著正相关(r=0.854,P<0.05)。碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKPN)和碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌(CRPAE)的检出率分别与青霉素类的使用强度呈显著负相关(r=-0.826,P<0.05;r=-0.861,P<0.05)。但包括碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)在内的4种耐药菌检出率与碳青霉烯类的使用强度无明显相关性。结论部分CRO的检出率可能与抗菌药物的使用强度密切相关,临床需要加强对抗菌药物临床合理应用的管控,以减少耐药菌株的产生。

姜黄素对人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR蛋白质双向电泳图谱的影响

目的探讨姜黄素处理对人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR蛋白质表达谱的影响。方法实验分两组,姜黄素处理组用25μmol/L的姜黄素作用于人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR 24h,对照组加入相应体积的生理盐水。应用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离姜黄素处理组与对照组人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR的总蛋白,凝胶银染显色,采集凝胶图像,用PDQuest 8.0软件分析并比较两者之间差异表达的蛋白质。结果获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT-8/VCR细胞系2-DE图谱,姜黄素处理组和对照组图像的平均蛋白质点数分别为1030±69和1070±96,两者的差异点共33个,姜黄素处理组有8个蛋白点表达上调,18个表达下调,2个在姜黄素处理组特异表达,5个在对照组特异表达。结论建立了经或不经姜黄素处理的人结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR的双向凝胶电泳图谱,识别了33个差异表达的蛋白质点,对这些差异蛋白点的进一步分析有助于研究姜黄素逆转结肠癌多药耐药的分子机制。

姜黄素乳剂对联合化疗诱导的小鼠S_(180)肿瘤细胞多药耐药相关耐药蛋白表达的影响

目的:探讨姜黄素对化疗诱导的肿瘤多药耐药干预的分子生物学基础。方法:对S180荷瘤小鼠以亚于治疗剂量的联合化疗,同时给予姜黄素乳剂4周,流式细胞仪荧光检测肿瘤细胞耐药蛋白P170、LRP和TOPOII。结果:姜黄素乳剂明显降低化疗诱导后耐药细胞P170、LRP的表达率和TOPOII活性。结论:姜黄素是通过对于相关耐药蛋白的调节,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。

4种常见碳青霉烯类耐药革兰氏阴性杆菌检出率与抗菌药物使用强度的相关性研究

目的探讨本院4种常见碳青霉烯类耐药革兰氏阴性杆菌(CRO)检出率与抗菌药物使用强度(AUD)的相关性,为降低其耐药性和促进临床合理使用抗菌药物提供参考。方法收集和统计2012—2019年度广西某综合性三级甲等医院住院病区抗菌药物的使用情况,监测4种常见革兰氏阴性杆菌对碳青霉烯耐药率的变迁情况,采用Pearson相关方法分析4种常见CRO检出率与抗菌药物使用强度的相关性。结果2012—2019年4种常见CRO的各年度检出率均无明显变化趋势。其中耐碳青霉烯大肠埃希菌(CRECO)的检出率与莫西沙星、多西环素的使用强度成正相关(P均<0.05);耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKPN)的检出率与环丙沙星的使用强度成负相关(P均<0.05);耐碳青霉烯铜绿假单胞菌(CRPAE)的检出率与亚胺培南和头孢哌酮舒巴坦的使用强度成正相关(P均<0.05),而与环丙沙星的使用强度成负相关(P均<0.05);耐碳青霉鲍曼不动杆菌(CRAB)的检出率与亚胺培南、头孢哌酮舒巴坦和多西环素的使用强度成正相关(P<均0.05)。结论CRO的检出率与抗菌药物使用强度息息相关,临床诊治中需要加强抗菌药物合理使用的管控,减少细菌耐药性的产生,改善不断恶化的临床多重耐药菌或广泛耐药菌感染形势。

碳青霉烯类抗菌药物使用量与鲍曼不动杆菌耐药率相关性分析

目的分析碳青霉烯类抗菌药物使用量与鲍曼不动杆菌耐药率的相关性。方法查阅医院2011年至2018年检出的鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率及碳青霉烯类抗菌药物使用量[以用药频度(DDDs)计],分析两者的相关性。结果碳青霉烯类抗菌药物的DDDs从2011年的622.75增长至2018年的6710.25;鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率分别从2011年的4.40%和4.09%增至2018年的77.86%和89.58%;亚胺培南的使用量与美罗培南、亚胺培南的耐药率呈正相关(r1=0.798,P1=0.018;r2=0.829,P2=0.011),碳青霉烯类抗菌药物的使用量与美罗培南的耐药率呈正相关(r=0.720,P=0.044)。结论鲍曼不动杆菌的耐药率与碳青霉烯类抗菌药物的使用量相关。

铂类抗癌药物作用靶点及耐药机制的研究进展

铂类抗癌药物属于细胞周期非特异性药物,常用的药物包括顺铂、卡铂、奥沙利铂等,目前在妇科肿瘤、消化系统肿瘤等疾病中获得了广泛运用。此类药物进入细胞核,作用于DNA分子后可形成Pt-DNA化合物,能使DNA结构变形,使其复制转录出现障碍,进而导致细胞死亡。因为激活细胞中的部分信号通路,导致铂类抗癌药物存在耐药及毒性。本文就国内外近几年有关铂类抗癌药物作用靶点、耐药机制以及毒性的研究进展作如下综述,以提高其临床利用率,促进相关疾病临床疗效的不断提升。

替加环素与临床常用抗菌药物对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的协同作用探讨

碳青霉烯类抗菌药物,属于临床各类疾病用于抗感染的第三线药物[1]。然而,诸多研究均已证实,由于碳青霉稀类抗菌药物长期以来的过量使用,再加上此类抗菌药物本身特性等原因,临床治疗使用中已经出现了耐药菌株[2],并且耐药菌株的分布范围、比例等均逐年增加。近几年我国国内研究发现,碳青霉烯类抗菌使用下的耐药菌株,主要包括三大类:肠杆菌科细菌;鲍曼不动杆菌;铜绿假单胞菌。

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的:探讨胃癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrugresis-tance-associatedprotein,MRP)的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法:应用免疫组化法检测P-gp及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果:在48例胃癌中,P-gp及MRP阳性率分别为41.7%、29.2%,共同表达率为25.0%。癌旁组织与癌组织的P-gp、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、鬼臼乙叉甙(VP-16)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基喜树碱(HCPT)、甲氨蝶呤(MTX)中,ADM、VP-16、HCPT耐药组P-gp、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论:胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gp、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素。

84株广泛耐药结核分枝杆菌对新型氟喹诺酮类药物的耐药情况分析

目的研究广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株对新型氟喹诺酮类药物的耐药特征以及氟喹诺酮类药物耐药相关基因突变的特点。方法选取2012年4月至2014年4月在北京胸科医院住院治疗的84例广泛耐药结核病患者的临床分离菌株，应用微孔板阿尔玛蓝显色法（micro—plate alamar blue assay，MABA）检测菌株对左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），所有菌株都进行了gyrA基因和gyrB基因的耐药决定区（QRDR）的序列测定。结果84株广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株经MABA检测，分别以1μg／ml、2μg／ml、1μg／ml作为耐药判读标准，左氧氟沙星、莫西沙星、加替沙星3种氟喹诺酮类药物的耐药率分别是88．1％（74／84）、44．0％（37／84）、61．9％（52／84）。89．3％（75／84）的临床分离株发生了gyrA基因耐药决定区突变，其中以第94位点突变最为常见，Asp94Gly突变菌株的MIC值较高，而所有菌株的gryB基因均为野生型。结论广泛耐药结核分枝杆菌对新型氟喹诺酮类药物耐药形势严峻，耐药基因突变形式以gyrA基因突变为主，第94位点的Asp94Gly突变可能和高水平耐药有关。

喹诺酮类药物的抗菌活性与细菌耐药性研究进展

喹诺酮类药物(quinolones,QLs)是一类化学合成的抗菌药物,曾在世界范围内广泛应用于临床细菌病的治疗。其作用靶点为细菌DNA螺旋酶和拓扑异构酶,形成药—酶-DNA三元复合体,阻止蛋白质合成,从而达到抑菌效果。目前,通过对许多三元复合体的晶体结构解析,以及非催化镁离子模型的建立,进一步合理地解释了喹诺酮类药物活性受到影响的现象。临床常见致病菌对喹诺酮类药物产生耐药现象的机理研究较多,主要是基因突变、膜对药物的通透性改变及质粒介导的喹诺酮耐药性(PMQR)3个方面。文章主要对喹诺酮类药物的作用机制和细菌耐药机理进行综述,以期为后期喹诺酮类药物结构优化提供更多的信息支持。

不同剂量亚砷酸钠染毒大鼠多药耐药相关蛋白2表达水平的变化

目的观察不同剂量亚砷酸钠染毒大鼠肝细胞膜转运蛋白——多药耐药相关蛋白2(multidrugresistance-associatedprotein2,MRP2)表达水平的变化及与砷代谢的关系。方法24只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组:第1组为对照组,给予生理盐水;第2～4组为染砷组,分别给予4、10和20mg/kg体质量的亚砷酸钠溶液,隔天灌胃染毒1次,2周后将大鼠处死。原子吸收分光光度法测定胆汁、全血和肝组织中的总砷含量。蛋白印记法测定肝细胞膜上MRP2的改变。结果经方差分析检验,胆汁和肝脏中含砷量随着染砷剂量的增加而逐渐增加(P<0.05)。两两比较发现,3个染毒组的血砷与对照组之间差异有统计学意义,而3个染毒组间差异无统计学意义。随着染砷剂量增加,MRP2表达有增加的趋势,且MRP2表达量与胆汁含砷量呈正相关(r=0.986,P<0.05)。结论亚砷酸钠可以诱导MRP2的表达,随染砷剂量增加,MRP2表达量增加。MRP2在砷及其代谢产物的胆汁排泄过程中发挥了重要作用。

乳腺癌组织耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨乳腺癌组织耐药相关基因表达及其与临床病理学因素之间的关系。方法:应用流式细胞术检测多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gP)、谷胱苷肽-S-转移酶(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在64例乳腺癌组织中的表达情况,分析其与患者临床分期、年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、雌孕激素受体(ER、PR)表达状态等因素的关系及5种耐药基因间的相关性。结果:P-gp、GST-π、LRP、MGMT和MRP在原发性乳腺癌组织中均有一定水平表达,P-gp和GST-π的表达与腋窝淋巴结转移有关(P值分别为0.007和0.031),MG-MT的表达在年龄<50岁组明显升高,P=0.018。GST-π、MRP和MGMT的表达在肿瘤体积较大组中明显升高(P值分别为0.042、0.000和0.015),5种耐药基因的表达与ER、PR表达相关差异均无统计学意义,P>0.05。乳腺癌组织中各耐药基因之间存在共表达现象,P-gp和GST-π的表达及LRP与MRP的表达均存在正相关性(r=0.66,P=0.000;r=0.434,P=0.004)。结论:乳腺癌组织中耐药蛋白的表达与患者肿瘤体积、年龄、淋巴结转移状况有关,耐药蛋白高表达,均提示为乳腺癌的不良预后指标。乳腺癌组织中各耐药蛋白之间存在共表达现象。

骨软组织肉瘤中耐药相关蛋白表达及与化疗耐药的相关性

目的:探讨4种耐药相关蛋白-P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)和多药耐药相关蛋白(MRP)在骨肉瘤细胞株Saos2和U2OS以及34例骨软组织肉瘤的表达及与化疗耐药的关系。方法:应用流式细胞术(FCM)检测蛋白表达;MTT法评估化疗耐药。结果:Saos2细胞耐药相关蛋白的表达低于U2OS,阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、丝裂霉素(MMC)、氮烯咪胺(DTIC)和长春新碱(VCR)的敏感性高于U2OS。两细胞株经1/5半数抑制浓度(IC50)的ADM和DDP分别处理24 h后,GST-π增幅达33%-43%。34例患者对ADM、DDP、5-Fu、MMC、DTIC、VCR和MTX的不敏感率分别为41.18%、17.65%、47.06%、50.00%、76.47%、61.76%和52.94%。肿瘤组织P-gp、GST-π、LRP和MRP表达分别为1.54、2.58、1.91和1.86。相关分析显示,P-gp表达与ADM耐药呈正相关(r=0.485,P<0.01),GST-π表达与ADM、DDP、5-Fu、MMC耐药呈正相关(r分别为0.402、0.458、0.364和0.500,P值分别为<0.05、<0.01、<0.05和<0.01)。耐药相关蛋白在不同性别、不同年龄、不同病理类型、不同肿瘤大小患者间的表达差异均无显著(P>0.05)。经术前化疗的患者GST-π表达显著升高,且随访复发患者术前GST-π表达显著高于无复发患者(P<0.05)。结论:骨软组织肉瘤患者耐药相关蛋白表达及化疗敏感性存在显著个体差异。化疗可引起GST-π表达上调。原发GST-π高表达是骨软组织肉瘤耐药的主要机制并与预后有关。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在肝癌细胞7721中对多药耐药的调节作用

目的采用2种方法构建人肝癌多药耐药细胞模型,封闭其细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)(CD147)的表达,研究其生物学特性。探讨EMMPRIN在肝癌细胞中对多药耐药的作用。方法应用人肝癌细胞株7721,采用浓度梯度诱导法和高浓度阿霉素间接诱导法构建人肝癌多药耐药细胞模型(7721/Adm1和7721/Adm2细胞),应用RNAi技术封闭7721/Adm1和7721/Adm2细胞EMMPRIN的表达,构建封闭EMMPRIN的人肝癌多药耐药细胞7721/Adm1/RNAi和7721/Adm2/RNAi细胞。用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞技术检测EMMPRIN、细胞表面多药耐药基因(MDR-1)mRNA及其表达产物的表达水平。噻唑蓝(MTT)法检测上述各细胞的多药耐药性。结果 2种多药耐药模型可用于肝癌多药耐药研究。多药耐药细胞7721/Adm1和7721/Adm2中EMMPRIN,MDR-1的表达水平较7721细胞均升高,且增加了其对多种化疗药物的耐药性。而利用RNAi封闭EMMPRIN的7721/Adm1和7721/Adm2细胞可致MDR-1表达降低,增加了其对化疗药物的敏感性。结论 EMMPRIN是参与肝癌细胞7721多药耐药且为调节多药耐药的重要分子。

胃癌多药耐药相关蛋白表达的临床分析

背景:胃癌对化疗药物原发或继发不敏感可致肿瘤多药耐药。目的:探讨胃癌组织中多药耐药相关蛋白P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)-π、Bcl-xL的表达及其意义。方法:收集胃癌手术标本113例,每例标本选取肿瘤组织、距病灶5 cm以上的正常胃黏膜组织各1块。以免疫组化法检测多药耐药相关蛋白P-gp、GST-π、Bcl-xL的定位和表达,并与胃癌主要临床病理特征行相关性分析。结果:胃癌组织的P-gp、GST-π、Bcl-xL阳性表达率(48.7%对5.3%,P<0.05;62.8%对25.7%,P<0.05;83.2%对23.0%,P<0.05)和高表达率(18.6%对0%,P<0.05;23.9%对0%,P<0.05;71.7%对0%,P<0.05)均明显高于正常胃黏膜组织,胃癌组织P-gp、GST-π、Bcl-xL三者间表达呈正相关(P<0.05)。胃癌组织GST-π、Bcl-xL阳性表达与肿瘤组织分化程度呈正相关(P<0.05).胃癌组织P-gp、GST-π、Bcl-xL表达与患者的性别、年龄、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均不相关(P>0.05)。结论:胃癌组织多药耐药相关蛋白P-gp、GST-π、Bcl-xL表达与胃癌的发生相关,且肿瘤组织GST-π、Bcl-xL表达与分化程度呈正相关,可作为判断胃癌患者预后的指标。

结肠癌中多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白的表达

目的:探讨结肠癌中多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测51例结肠癌和32例癌旁相对正常结肠中MRP和LRP的表达情况。结果:51例结肠癌中MRP的阳性率为41.18％(21/51),32例癌旁相对正常结肠中MRP的阳性率为18.75％(6/32),两组比较差异有显著性(P<0.05)。LRP的表达与结肠腺癌的分化程度相关,高分化腺癌的阳性率为90.00％(9/10),中分化腺癌的阳性率为79.66％(23/29),高于低分化腺癌20.00％(1/5)的阳性率,差异有显著性(P<0.05)。结肠癌中MRP与LRP的表达存在相关性(P<0.05)。结论:结肠癌中MRP和LRP均为高表达,两者均可能是结肠癌原发性多药耐药的重要机制,且两者可能有协同作用。临床上检测这2种蛋白的表达,有助于对化疗药物的选择。