多菌灵抗性基因在球毛壳中的转化

利用PEG方法将多菌灵抗性基因通过质粒 pRB12 9转化到球毛壳原生质体 ,并在含 0 .5 μg/ml多菌灵浓度下筛选转化子 ,转化率可达 6～ 7个转化子 / μgDNA。转化子可在 10 0 0 μg/ml多菌灵处理条件下正常生长。将转化子在非选择压力下连续培养 10代 。

葡萄白腐病菌对多菌灵不同抗性菌株生理生化特性研究

研究结果表明:多菌灵农药可促进葡萄白腐病菌苯丙氨酸解氨酶(PAL)的增加,抗药性菌株PAL活力始终大于敏感菌株,初步证明PAL活性与菌体抗药性有关;不同抗药性菌株之间的细胞膜透性之间存在差异,抗性菌株电导率均高于敏感菌株。初步明确了测定苯丙氨酸解氨酶和细胞膜透性可以作为鉴别不同抗药性菌株和检测病原菌抗药性的指标。

两株解淀粉芽孢杆菌的鉴定及对抗多菌灵可可球二孢菌的拮抗作用

海南地区芒果蒂腐病主要由可可球二孢菌(Botryodiplodia theobromae)引起,从海南芒果上分离获得2株拮抗细菌(HBW和HBR),采用形态学、生理生化特性和分子检测等方法对菌种进行鉴定,通过离体活性测定法评估其对10种植物病原真菌的拮抗活性,并进一步比较了细菌悬液和无菌培养滤液对具有不同多菌灵抗性的可可球二孢菌株的抑菌效果。结果表明,拮抗细菌HBW和HBR均属于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对10种植物病原真菌均具有较强的抑制作用。HBW和HBR的细菌悬液和无菌培养滤液对具有不同多菌灵抗性的可可球二孢菌均有较好的抑制效果,且培养滤液的抑菌效果优于悬浮液。其中,20%的稀释滤液最高抑制率可达100%。由此表明,解淀粉芽孢杆菌HBW和HBR菌株具有较高的开发应用潜力。

影响球毛壳菌原生质体转化的因素

采用PEG介导的原生质体转化法研究了含有多菌灵抗性基因的质粒pRB129转化球毛壳菌的影响因素。结果表明,最佳转化条件为:以1.0mol/L山梨醇作为渗透压稳定剂,20mol/L Ca^(2+)和终质量分数为50％的PEG4000作为转化介质,于25℃转化10min,采用缓慢逐步稀释的方法,转化后1.5d筛选转化子,此时,转化率最高,且有较高的重复性,DNA平均转化率为5.6个/μg。该结果对球毛壳菌其他性状的改进及其他丝状真菌的遗传转化具有重要参考价值。