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铁皮石斛灰霉病多菌灵高抗菌株的LAMP快速检测体系的建立
被引量:
5
1
作者
钱铸锴
张传清
+2 位作者
周根
戴德江
时浩杰
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016年第S1期438-442,共5页
为了建立一种新型的能够快速、准确、高效地检测铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵抗药性的检测技术,利用环介导的等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification)通过对临安3个铁皮石斛基地的灰霉病菌进行抗性分析发现,本地铁皮石斛灰...
为了建立一种新型的能够快速、准确、高效地检测铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵抗药性的检测技术,利用环介导的等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification)通过对临安3个铁皮石斛基地的灰霉病菌进行抗性分析发现,本地铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵表现出高水平抗药性的菌株编码β-微管蛋白的198位氨基酸由E(GAG)突变为V(GTG)。根据高抗菌株第198位密码子的突变位点设计了特异性检测引物,对高抗灰霉菌株E198V基因型进行分子检测。结果表明:使用钙黄绿素染料作为反应指示剂,在等温条件下(65℃)进行核酸扩增反应40 min后,以抗药性菌株DNA为模板的反应液呈阳性(变为亮绿色),而敏感菌株的为阴性(仍为橙色),灵敏度试验发现最低检测限为10 pg/μL,琼脂糖凝胶电泳结果与LAMP检测结果一致。该方法的建立为快速检测铁皮石斛灰霉病菌抗多菌灵菌株及科学合理的防治铁皮石斛灰霉病奠定了基础。
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关键词
环介导等温扩增技术
灰霉病菌
多菌灵抗药性检测
下载PDF
职称材料
题名
铁皮石斛灰霉病多菌灵高抗菌株的LAMP快速检测体系的建立
被引量:
5
1
作者
钱铸锴
张传清
周根
戴德江
时浩杰
机构
浙江农林大学农业与食品科学学院
浙江省农药检定管理所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016年第S1期438-442,共5页
基金
浙江省自然科学基金青年项目(LQ13C140003)
国家自然科学基金项目(31301619)
浙江省大学生科技创新活动计划项目(2015R412029)
文摘
为了建立一种新型的能够快速、准确、高效地检测铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵抗药性的检测技术,利用环介导的等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification)通过对临安3个铁皮石斛基地的灰霉病菌进行抗性分析发现,本地铁皮石斛灰霉病菌对多菌灵表现出高水平抗药性的菌株编码β-微管蛋白的198位氨基酸由E(GAG)突变为V(GTG)。根据高抗菌株第198位密码子的突变位点设计了特异性检测引物,对高抗灰霉菌株E198V基因型进行分子检测。结果表明:使用钙黄绿素染料作为反应指示剂,在等温条件下(65℃)进行核酸扩增反应40 min后,以抗药性菌株DNA为模板的反应液呈阳性(变为亮绿色),而敏感菌株的为阴性(仍为橙色),灵敏度试验发现最低检测限为10 pg/μL,琼脂糖凝胶电泳结果与LAMP检测结果一致。该方法的建立为快速检测铁皮石斛灰霉病菌抗多菌灵菌株及科学合理的防治铁皮石斛灰霉病奠定了基础。
关键词
环介导等温扩增技术
灰霉病菌
多菌灵抗药性检测
Keywords
Loop-mediated isothermal amplification(LAMP)
Botrytis cinerea
Carbendazim resistance detection
分类号
S435.672 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
铁皮石斛灰霉病多菌灵高抗菌株的LAMP快速检测体系的建立
钱铸锴
张传清
周根
戴德江
时浩杰
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016
5
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职称材料
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参考文献
引证文献
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