降解菌djl-6多菌灵水解酶的提取及性质

以往对多菌灵降解菌Rhodococcus qingshengii sp.nov.djl-6的降解途径研究显示,该菌株首先通过多菌灵水解酶将多菌灵水解成二氨基苯并咪唑,从而对多菌灵进行脱毒.为开发酶制剂并有效应用于环境中残留污染物多菌灵的降解,比较了不同提取方法（高压细胞破碎、超声波破碎和添加溶菌酶破碎）对多菌灵水解酶提取效率的影响,并对其酶学特性进行了初步研究.结果表明,djl-6菌株在LB培养基中培养72~84 h,生长量和产酶量均达到最大值.采用超声波破碎提取酶的效率较高（蛋白浓度为7.92 mg/mL）,但酶活损失较大（比酶活只有1.2 U/μg protein）.多菌灵水解酶属于一种胞内组成型酶.该酶水解多菌灵的最适pH值为7.0,最适温度为30℃,Zn2＋和K＋对酶活有一定的抑制作用.

利用大肠埃希氏菌光控基因表达系统降解多菌灵农残

利用一种新型的重组大肠埃希氏菌光控基因诱导表达系统来生产多菌灵水解酶,用于环境中多菌灵农药残留的降解。该光控系统基于光敏融合蛋白LEV1在光照条件下发生同源二聚化并抑制下游基因转录的原理。SDS-PAGE和酶联免疫实验结果表明,异源多菌灵水解酶基因可通过光控机制被超表达,生产的多菌灵水解酶在溶液和土壤样品中具有降解多菌灵农药残留的活性。本技术利用光作为诱导剂,具备廉价易得、无毒害、可随时添加或去除等优势,是一种有前景并可大规模生产生物酶产品的工具。