南昆山毛叶茶三种多酚的分离纯化及抗氧化研究

本研究以南昆山毛叶绿茶为材料,通过30%乙醇、乙酸乙酯提取,进而采用羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱层析和制备型高效液相色谱分离纯化得到3种多酚单体物质;通过高效液相色谱-串联质谱、核磁共振和红外光谱鉴定单体结构;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2′-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)两种自由基的清除能力、铁离子还原能力(FRAP)和氧自由基的吸收能力(ORAC)为指标,运用L-O2肝细胞氧化应激模型,综合评价3种多酚单体物质的抗氧化活性。结果:从南昆山毛叶茶中分离得到3种多酚单体物质,分别为没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、1,2,4,6-四没食子酰葡萄糖(1,2,4,6-GA-glc)、儿茶素-3,5-二没食子酸酯(GC-3,5-diGA),其中后2种为茶叶中的特殊多酚物质;纯度分别为98%、96%、97%,得率分别为2.45%、0.55%、0.31%;DPPH、ABTS和FRAP三种化学抗氧化结果基本一致:GCG>GC-3,5-diGA>1,2,4,6-GA-glc,ORAC法的结果与此相反,1,2,4,6-GA-glc的作用强于GCG和GC-3,5-diGA;高剂量的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA预处理后,受氧化应激的L-O2细胞存活率分别提高了26.98%±1.96%、70.87%±3.61%和35.58%±5.37%。结论:通过Sephadex LH-20柱层析和制备型高效液相色谱技术,得到高纯度的GCG、1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA;抗氧化结果显示,GCG具有较强的化学抗氧化能力,1,2,4,6-GA-glc和GC-3,5-diGA具有强细胞抗氧化能力。