基于多酶恒温快速扩增-侧向流层析联用技术的肉制品真实性研究

目的:基于多酶恒温快速扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)与封闭式侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)联用技术,建立肉制品真实性快速检测方法,解决实验室方法不适于基层与现场快检需求的问题。方法:通过GenBank筛选猪、牛、羊、鸡、鸭线粒体基因的特异序列,使用DNAStar Megalign软件比对种内保守、种间特异的靶片段,依据MIRA引物探针设计原则设计靶基因引物探针组,通过阳性对照、阴性对照、空白对照等方式系统筛选引物探针,确定猪、牛、羊、鸡、鸭的专属性引物探针,并采用反应体系、反应温度、反应时间筛选,优化完善特异性检测方法。对方法进行系统的方法学考察,包括DNA提取、灵敏度、检出限、假阳性与假阴性考察等,验证方法的有效性。结果:使用建立的方法与实时荧光聚合酶链式反应检测进行比对分析,方法的平均假阳性率为3.49%、假阴性率为3.54%,符合现场快检方法的要求。结论:本研究建立了牛、羊、猪、鸡、鸭5种常见肉类的MIRA-LFD技术,并证实了其有效性和可行性,实现了肉制品真实性的现场快检。

多酶洗液在消毒供应中心医疗器械清洗中的应用效果

目的:分析多酶洗液在消毒供应中心医疗器械清洗中的应用效果。方法:选取2021年3月1日—2022年12月31日六盘水市水城区疾病预防控制中心消毒供应中心的300件各类待清洁的医疗器械,按随机数字表法分为研究组(n=150)与对照组(n=150)。对照组器械选用常规清洗剂清洗,研究组器械选用多酶洗液清洗,分别对两组医疗器械清洁质量、清洗满意度、清洗合格率进行比较,同时分别对两组器械进行隐血实验及ATP生物荧光检测,统计隐血阳性率及ATP结果。结果:研究组服务态度、回收及时程度、供给及时程度、包装质量、护理质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组器械清洗满意度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组器械表面、管腔、关节轴等肉眼裸视检查合格率及生物学采样菌落计数合格率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组医疗器械总清洗合格率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组隐血阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多酶洗液在清洗医疗器械上具有显著优势,能有效提升医疗器械的清洗效果,确保消毒灭菌质量,对提高医疗安全,延长医疗器械使用寿命有显著成效,是一种安全、有效医疗器械清洗液。

超声震荡联合多酶液在口腔专科医院器械集中清洗中的应用效果

目的:探讨超声震荡联合多酶液在口腔专科医院器械集中清洗中的应用效果。方法:收集2022年3月至5月温州医科大学附属口腔医院常规使用的各类器械428件,按随机数字表法将其分为对照组和试验组,每组214件,对照组采用多酶液预清洗,试验组采用超声震荡联合多酶液预清洗。比较2组清洗质量及清洗后细菌学检测合格情况。结果:试验组器械清洗后放大镜检测合格率、三磷酸腺苷荧光检测合格率及肉眼检测合格率均高于对照组(98.13%vs.93.93%,94.39%vs.87.38%,99.53%vs.96.73%),差异均有统计学意义(P<0.05);试验组器械清洗后即刻、30 min、2 h细菌学检测合格率均高于对照组(99.07%vs.95.79%,97.20%vs.92.06%,92.99%vs.86.92%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:将超声震荡联合多酶液应用于口腔专科医院器械集中清洗,可有效清除残留物质,保障灭菌效果,提高清洗合格率。

多酶预处理溶液联合超声清洗对人流吸管清洗效果评价

目的评价多酶预处理溶液联合超声清洗对人流吸管的清洗效果。方法本研究为实验性研究。选取2022年1月至6月深圳市南山区妇幼保健院消毒供应中心收取的1200支人流吸管作为研究对象,随机分为两组,分别用多酶预处理溶液联合人工清洗(对照组)和多酶预处理溶液联合超声清洗(实验组)处理,采用目测观察法及三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测法比较两组人流吸管清洗合格率。采用χ^(2)检验。结果通过目测观察法发现,实验组人流吸管的清洗合格率为93.67%(562/600),对照组人流吸管的清洗合格率为73.33%(440/600),差异有统计学意义(χ^(2)=90.026,P<0.001)。通过ATP生物荧光检测法发现,实验组人流吸管的清洗合格率为87.16%(523/600),对照组人流吸管的清洗合格率为68.67%(412/600),差异有统计学意义(χ^(2)=59.672,P<0.001)。结论多酶预处理溶液联合超声清洗相较于多酶预处理溶液联合人工清洗对于人流吸管清洗效果更佳。

环境因素对医用多酶清洗剂酶活性的影响

目的对常用的医用多酶清洗剂,按一定时间间隔,测定不同温度使用条件下工作液中各酶的活性,从而明确多酶清洗剂的最佳使用条件。方法选取4种不同厂家的医用多酶清洗剂,A为快速高效多酶清洗液;B为全能强效多酶清洗液;C为特效型碱性含酶清洗剂;D为全效医用多酶清洗剂。室温下分别取等量A、B、C、D四种不同多酶清洗剂,用纯水稀释200倍配成工作液,测定工作液的pH值;将A、B、C、D四种不同多酶清洗剂工作液分别置于15℃、20℃、25℃、30℃中水浴恒温放置,存放1 h、3 h、6 h、8 h不同间隔时间,取样测定工作液中的多酶活性,制作酶活力稳定性曲线。结果医用多酶清洗剂工作液普遍在15℃~20℃的条件下,可控制在8 h内仅损耗10%左右的酶活力,在同等损耗的情况下,多酶清洗剂工作液25℃时仅能保持6 h,30℃时可保持3 h的酶活性。结论建议在医用多酶清洗剂稀释为工作液后,常温下在3 h内使用;或者冷藏的条件下,8 h内使用;全效医用多酶清洗剂酶活性稳定性较高。

多酶清洗液超声清洗联合低温等离子灭菌法对医疗器械清洗合格率、灭菌效果的影响

目的:探讨多酶清洗液超声清洗联合低温等离子灭菌法对消毒供应中心医疗器械清洗合格率、灭菌效果的影响。方法:选取我院消毒供应中心的500件医疗器械,依照信封法随机分为观察组和对照组,每组250件。对照组采用戊二醛雾化熏蒸法对医疗器械进行处理,观察组采用多酶清洗液清洗联合低温等离子灭菌法对医疗器械进行处理。比较两组医疗器械清洗合格率、灭菌合格率、工作人员满意度。结果:观察组医疗器械目测法合格率为98.40%,ATP检测法合格率为97.20%,灭菌合格率为100.00%,工作人员满意度为100.00%,均高于对照组(目测法合格率为84.40%,ATP检测法合格率为80.80%,灭菌合格率为95.60%,工作人员满意度为93.20%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:采用多酶清洗液超声清洗联合低温等离子灭菌法对消毒供应中心医疗器械进行处理,可有效提高清洗合格率、灭菌效果。

以级联反应为基础的多酶共固定载体研究进展

多酶共固定体系以级联反应体系为基础,将两种或两种以上的酶固定在同一载体上,具有较高的原子经济性和可持续利用性,已成为材料科学、生命科学、生物医药等多种领域的研究热点。选择适宜的载体材料是提高多酶共固定体系催化效率最基本也是最重要的途径。本文以葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶构建的级联反应作为研究对象,分别从随机固定、分区域固定以及定向固定这三种不同的载体和酶之间的作用形式入手,概述了目前用于多酶共固定体系的载体研究进展。最后分析了多酶共固定领域目前存在的局限和挑战,以期为更多多酶共固定体系提供研究思路。

多酶一步纯化共固定系统的构建及催化不对称还原合成手性醇的研究

开发了一步纯化共固定老黄酶(OYE1)、醇脱氢酶(ADH-A)和葡萄糖脱氢酶(GDH)系统并一锅级联催化烯酮转化为手性醇类化合物,同时实现辅酶的原位再生。以镍离子金属螯合亲和层析介质(Ni-NTA)修饰的SiO_(2)纳米花为载体,对带有His-tag的目的蛋白ADH-A、OYE1和GDH粗酶液进行一步分离纯化及固定化,并在优化的反应条件下进行反应,对手性醇产物的产率最高可达92.37%。固定化酶相比于游离酶的稳定性更加出色。在连续5次循环使用后,固定化酶在使用时仍有较高的转化率。同时,固定化酶OYE1&ADH-A&GDH@Ni-NTA@SiO_(2)对环状、链状及芳香族烯酮类化合物均具有良好的催化性能。

多酶清洗剂对手术器械去污效果的试验分析

目的探讨不同类别器械多酶清洗剂的浸泡去污清洗效果。方法2022年3月,我院将市场上正常销售使用的5种多酶清洗剂作为试验样本,分成1-5号多酶清洗剂,再分别按厂商提供的说明书配制成(40±2)℃的多酶清洗液;每次试验时将3件采用无菌羊血污染并干涸的血管钳在多酶清洗液中浸泡10 min,然后经流动纯水漂洗和烘干,最后通过目测和ATP荧光监测方法评价各种多酶清洗剂对器械的浸泡去污效果。结果1~5号多酶清洗剂各4次浸泡处理的血管钳(各12件次),经目测检查合格件次分别为12件(100%)、4件(33.33%)、1件(8.33%)、12件(100%)和12件(100%);1号、4号和5号多酶清洗剂浸泡去污处理的血管钳(各12件次)经ATP监测均为ATP值<45 RUL,去污合格率为100%,其中ATP值<15 RUL的血管钳41.67%(15件次);2号和3号多酶清洗剂浸泡去污处理的血管钳(各12件次),ATP值<45 RUL的共3件次(12.50),ATP值≥45 RUL的分别为9件次(75.00%)和12件次(100%)。结论1号和4号多酶清洗剂对器械的浸泡去污能力均可靠,5号多酶清洗剂(某进口知名品牌)对器械的浸泡去污能力最优,而2号和3号多酶清洗剂对器械的浸泡去污能力较差,应视为不合格产品。

多酶液预处理后全自动清洗机清洗医疗器械的效果观察

目的 探讨多酶液预处理后全自动清洗机清洗对医疗器械清洗效果的影响。方法 选取2020年2月至2021年2月丰城市人民医院消毒供应室采取全自动清洗机清洗的528件医疗器械作为对照组,另选取2021年3月至2022年3月采取多酶液预处理后全自动清洗机清洗的528件医疗器械作为观察组,比较两组的清洗时间、用水量、清洗效果(采用目测法、ATP荧光检测法、蛋白定量法及细菌培养法评价清洗合格率)及护理人员满意度。结果 观察组清洗时间短于对照组,用水量少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组采用目测法、ATP荧光检测法、蛋白定量法及细菌培养法的清洗合格率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组护理人员各维度满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 消毒供应室采取多酶液预处理后全自动清洗机清洗方式,能够节约清洗时间和水资源,有效提升医疗器械清洗效果,获得更高的护理人员满意度。

实时荧光多酶恒温扩增技术检测小鼠细小病毒核酸的方法建立

目的旨在建立基于实时荧光多酶恒温扩增(exo-MIRA)技术的小鼠细小病毒(MVM)核酸检测新方法。方法收集2021年1月至2022年1月南京大学医学院附属金陵医院实验动物室共75份小鼠肠道内容物标本。针对MVM VP2基因的保守区域设计4对引物,琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物以筛选最优引物对,并设计特异性荧光探针,构建exo-MIRA检测法。通过检测梯度稀释模拟样本,进行检出限评价。检测其他小鼠病毒,包括仙台病毒(SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠鼠痘病毒(Ect)、小鼠肺炎病毒(PVM)、呼肠孤病毒(Reo),分析exo-MIRA法的交叉反应性。采用qPCR法和exo-MIRA法同时检测收集的75份标本,统计分析两种方法的一致性。以qPCR法为参比方法,评估该法的敏感度和特异度,进行诊断效能评价。结果采用exo-MIRA技术建立MVM核酸检测方法,该方法检测MVM的检出限为10 copies/μL,且与其他五种小鼠病毒无交叉反应,可特异性检出MVM。75份标本检出结果显示,exo-MIRA法和qPCR法高度一致,Kappa值为0.921(P<0.05),exo-MIRA法的敏感度为100.0%,特异度为96.7%。结论建立了一种基于实时荧光MIRA恒温扩增技术的MVM核酸检测方法,具有简单快速、实验要求低、敏感特异等优点。该方法可应用于现场复杂环境的即时检测,在实验动物质量检测应用上有一定前景。

多酶清洗剂对手术器械清洗合格率的改善作用研究

目的 探讨多酶清洗剂对手术器材清洗合格率的改善效果。方法 随机选取120件同种污染的手术器材为研究对象,随机分为对照组和观察组。对照组采用常规清洗剂清洗护理,观察组采用多酶清洗剂清洗护理,比较两组手术器材清洗合格率及清洗满意度。结果 采用裸眼目测法评价清洗效果,观察组手术器材清洗合格率为100%(60/60),对照组手术器材清洗合格率为91.67%(55/60),两组清洗合格率比较,差异具有统计学意义(P<0.05),采用10倍光学放大镜法评价清洗效果,观察组手术器材清洗合格率为95.00%(57/60),对照组手术器材清洗合格率为83.33%(50/60),两组清洗合格率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);采用ATP生物荧光法评价清洗效果,观察组手术器材清洗合格率为90.00%(54/60),对照组手术器材清洗合格率为80.00%(48/60),两组清洗合格率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组手术器材清洗满意度为95.00%(57/60),对照组手术器材清洗满意度为81.67%(49/60),两组清洗满意度比较,差异显著(P<0.05)。结论 多酶清洗剂能够改善手术器材清洗合格率,提高清洗满意度。

碱性和中性多酶清洗剂清洗复用骨穿针效果比较

目的:比较碱性和中性多酶清洗剂清洗复用骨穿针的效果。方法:将2014年1-2月本院消毒供应中心回收的污染复用骨穿针按清洗日期分为实验组和对照组,每组150件。实验组用1:270的碱性多酶清洗剂清洗,对照组用1:270中性多酶清洗剂清洗,比较两组器械的清洗效果。结果:实验组和对照组的器械表面清洗合格率分别为98.67%、97.33%,比较差异无统计学意义(P>0.05),而实验组针腔内壁清洗合格率为96.00%、杰力试纸检测合格率为95.33%,分别高于对照组的90.00%、88.67%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:碱性多酶清洗剂清洗复用骨穿针的效果优于中性多酶清洗剂,值得推广使用。

碱性和中性多酶清洗剂清洗金属颅脑吸引器头的效果比较

目的:探讨碱性和中性多酶清洗剂清洗金属颅脑吸引器头的效果。方法:将600件污染的金属颅脑吸引器头随机分为观察组和对照组。观察组使用1∶270的碱性多酶清洗剂清洗,对照组使用1∶270中性多酶清洗剂清洗,比较2组器械的清洗效果。结果:2组器械表面清洗合格率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组器械管腔内壁的目测合格率、杰力试纸检测合格率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:碱性多酶清洗剂清洗金属颅脑吸引器头的效果明显优于中性多酶清洗剂,适合推广使用。

多酶清洗剂在供应室的应用效果观察

目的探讨多酶清洗剂在供应室的应用效果。方法将本院供应室回收待处理的400件各类器械随机分为实验组及对照组,对照组使用传统清洗剂清洗,实验组使用鲁沃夫多酶清洗剂进行清洗。结果实验组清洗后目测合格率为98.5%,实验室检测合格率为98.0%,显著高于对照组的79.0%和74.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论鲁沃夫多酶清洗剂清洗医疗器械彻底、干净,省时省力、无毒、对器械无腐蚀性、方便经济、环保健康、节约水源,值得推广使用。

多酶清洗剂在供应室的应用分析

目的对多酶清洗剂在供应室的应用效果进行深入的探讨和仔细的分析。方法将供应室回收以及待处理的各类器械200件,随机的分为实验组以及对照组,采用传统的清洗剂为对照组进行清洗,对实验组通常会采用鲁沃夫多酶清洗剂对手术器械进行清洗。结果清洗后对实验组目测的结果,合格率达到98.5%,实验组经过科学检测的结果 ,其合格率高达98.0%。经过对比,能够看出效果会明显的高于对照组中的79.0%和74.5%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论鲁沃夫多酶清洗溶剂,能够使医疗器械在清洗时更加的彻底、干净,并且无毒害现象、省时省力、对手术中使用的器械能够起到无腐蚀性、环保健康、方便经济、能够从根本上节约水源,值得在临床上推广使用。

快速、准确配制多酶清洗液的简易方法

对可重复使用的手术器械,使用后有效的清洗、消毒和灭菌是预防和控制医院感染的关键环节。彻底清洗是确保器械灭菌效果的前提和基础,器械清洗流程中一个重要环节是酶洗。多酶清洗剂能有效去除器械和设备上的蛋白质、糖类、脂肪、有机物、污物,提高器械的清洗质量,缩短清洗时间,确保器械灭菌效果,满足外科手术的需求。临床工作中,按标准配制多酶清洗液程序复杂,依从性低,为了保证器械清洗质量,现介绍一种简易、快速配制多酶液的方法。

称重法在三种多酶清洗剂清洗效果对比中的应用

目的使用称重法对比三种多酶清洗剂在对器械表面血液污染物的去除效果。方法选用不带管腔的眼科器械,在污染前称重m0.污染新鲜血液并干燥24小时后,称重m1;将污染后的器械置于清洗机中使用多酶清洗剂进行清洗,干燥后并冷却后称重m2,计算血污的去除率;重复3次。在同一台全自动清洗消毒机中用A、B、C三种多酶清洗剂重复上述实验,对比A、B、C三种清洗剂对器械表面血污的去除率,采用方差分析统计数据。结果B组与C组的组间差异P值<0.05,B多酶与C多酶对血污的去除效果存在统计学差异。结论在使用称重法对比3种多酶对血污去除效果中,B多酶的效果最好,A多酶次之,C多酶最差。

安必洁快速多酶清洗剂临床使用观察

目的 为了解安必洁快速多酶清洗剂对不同医疗器械的清洗效果及临床应用的可行性。方法 采用人工常规清洗与人工加酶清洗对比观察法 ,观察临床应用效果。结果 人工清洗 ,使用安必洁快速多酶清洗剂清洗常用医疗器械 ,其效果优于人工不加多酶清洗剂的清洗 ,使用安必洁快速多酶清洗剂清洗纤维内镜 ,自然菌的除菌率比使用肥皂水清洗自然菌的除菌率高 ,经统计分析表明 ,差异有高度显著性。结论 安必洁快速多酶清洗剂是清洗医疗器械比较理想的清洁剂之一。