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含多酶切位点融合黄色荧光蛋白的植物通用载体的构建与应用
被引量:
1
1
作者
匡琛
朱晓义
+2 位作者
张亮
范世航
华玮
《江苏农业科学》
2019年第16期56-62,共7页
以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了...
以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了验证载体的实用性,将构建完成的载体转化到感受态GV3101农杆菌上,进行菌落PCR鉴定,再分别瞬时转化烟草下表皮和稳定转化拟南芥。激光共聚焦显微镜观察结果显示,在阳性转基因植株上均观察到荧光,在阴性对照上没有观察到荧光,表明YFP标签蛋白在转基因受体细胞中能够正常表达。pCAMBIA3301::YFP载体的成功构建为植物蛋白亚细胞定位及过表达转基因植株等相关领域的研究提供了稳定可靠的通用型载体资源。
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关键词
多酶切位点
黄色荧光蛋白
通用载体
激光共聚焦
植物基因表征工具
下载PDF
职称材料
UPLC-MS/MS鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列
2
作者
刘冰
邹寒艳
+2 位作者
胡蓉
汤禾静
王梦莹
《华西药学杂志》
CAS
CSCD
2023年第1期62-64,共3页
目的 应用串联质谱技术鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列。方法 将C端富含精氨酸和赖氨酸的重组人乳头瘤病毒L1蛋白酶解成合适长度的肽段混合物,运用液质联用技术进行鉴定。结果 分别对6、11、16、18亚型的重组人乳头瘤病毒L...
目的 应用串联质谱技术鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列。方法 将C端富含精氨酸和赖氨酸的重组人乳头瘤病毒L1蛋白酶解成合适长度的肽段混合物,运用液质联用技术进行鉴定。结果 分别对6、11、16、18亚型的重组人乳头瘤病毒L1蛋白的C端氨基酸序列进行了分析确证,均与理论序列一致。结论 所用分析方法简单可行,为HPV疫苗的结构表征和质量控制提供了参考和依据。
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关键词
串联质谱
人乳头瘤病毒
类病毒颗粒
C端氨基酸序列
重组蛋白
结构表征
多酶切位点
质量控制
原文传递
题名
含多酶切位点融合黄色荧光蛋白的植物通用载体的构建与应用
被引量:
1
1
作者
匡琛
朱晓义
张亮
范世航
华玮
机构
中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室
中国农业科学院研究生院
出处
《江苏农业科学》
2019年第16期56-62,共7页
基金
湖北省自然科学基金(编号:2015CFB348)
国家“863”计划(编号:2013AA102602)
文摘
以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了验证载体的实用性,将构建完成的载体转化到感受态GV3101农杆菌上,进行菌落PCR鉴定,再分别瞬时转化烟草下表皮和稳定转化拟南芥。激光共聚焦显微镜观察结果显示,在阳性转基因植株上均观察到荧光,在阴性对照上没有观察到荧光,表明YFP标签蛋白在转基因受体细胞中能够正常表达。pCAMBIA3301::YFP载体的成功构建为植物蛋白亚细胞定位及过表达转基因植株等相关领域的研究提供了稳定可靠的通用型载体资源。
关键词
多酶切位点
黄色荧光蛋白
通用载体
激光共聚焦
植物基因表征工具
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
下载PDF
职称材料
题名
UPLC-MS/MS鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列
2
作者
刘冰
邹寒艳
胡蓉
汤禾静
王梦莹
机构
重庆市食品药品检验检测研究院
出处
《华西药学杂志》
CAS
CSCD
2023年第1期62-64,共3页
文摘
目的 应用串联质谱技术鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列。方法 将C端富含精氨酸和赖氨酸的重组人乳头瘤病毒L1蛋白酶解成合适长度的肽段混合物,运用液质联用技术进行鉴定。结果 分别对6、11、16、18亚型的重组人乳头瘤病毒L1蛋白的C端氨基酸序列进行了分析确证,均与理论序列一致。结论 所用分析方法简单可行,为HPV疫苗的结构表征和质量控制提供了参考和依据。
关键词
串联质谱
人乳头瘤病毒
类病毒颗粒
C端氨基酸序列
重组蛋白
结构表征
多酶切位点
质量控制
Keywords
LC-MS/MS
Human papillomavirus
Virus-like particle
C-Terminal Sequence
Recombinant protein
Structure characterization
Multiple reactive sites
Quality control
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
含多酶切位点融合黄色荧光蛋白的植物通用载体的构建与应用
匡琛
朱晓义
张亮
范世航
华玮
《江苏农业科学》
2019
1
下载PDF
职称材料
2
UPLC-MS/MS鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列
刘冰
邹寒艳
胡蓉
汤禾静
王梦莹
《华西药学杂志》
CAS
CSCD
2023
0
原文传递
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