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含多酶切位点融合黄色荧光蛋白的植物通用载体的构建与应用 被引量:1
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作者 匡琛 朱晓义 +2 位作者 张亮 范世航 华玮 《江苏农业科学》 2019年第16期56-62,共7页
以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了... 以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了验证载体的实用性,将构建完成的载体转化到感受态GV3101农杆菌上,进行菌落PCR鉴定,再分别瞬时转化烟草下表皮和稳定转化拟南芥。激光共聚焦显微镜观察结果显示,在阳性转基因植株上均观察到荧光,在阴性对照上没有观察到荧光,表明YFP标签蛋白在转基因受体细胞中能够正常表达。pCAMBIA3301::YFP载体的成功构建为植物蛋白亚细胞定位及过表达转基因植株等相关领域的研究提供了稳定可靠的通用型载体资源。 展开更多
关键词 多酶切位点 黄色荧光蛋白 通用载体 激光共聚焦 植物基因表征工具
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Application of restriction site amplified polymorphism (RSAP) to genetic diversity in Saccharina japonica 被引量:1
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作者 赵翠 刘翠 +3 位作者 李威 池姗 冯荣芳 刘涛 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2013年第4期830-834,共5页
Restriction site amplified polymorphism (RSAP) was used, for the first time, to analyze the genetic structure and diversity of four, mainly cultivated, varieties of the brown alga, Saccharina japonica. Eighty-eight sa... Restriction site amplified polymorphism (RSAP) was used, for the first time, to analyze the genetic structure and diversity of four, mainly cultivated, varieties of the brown alga, Saccharina japonica. Eighty-eight samples from varieties "Rongfu", "Fujian", "Ailunwan" and "Shengchanzhong" were used for the genetic analyses. One hundred and ninety-eight bands were obtained using eight combinations of primers. One hundred and ninety-one (96.46%) were polymorphic bands. Nei's genetic diversity was 0.360, and the coefficient of genetic differentiation was 0.357. No inbreeding-type recession was found in the four brown alga varieties and the results of the "Ailunwan" variety using samples from 2 years showed that the variety was becoming less diverse during the selection inherent in the breeding program. Genetic diversity and cluster analyses results were consistent with these genetic relationships. The results show the RSAP method is suitable for genetic analysis. Continuous inbreeding and selection could reduce the genetic diversity effectively; therefore periodical supervision is required. 展开更多
关键词 Saccharinajaponica restriction site amplified polymorphism genetic diversity
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UPLC-MS/MS鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列
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作者 刘冰 邹寒艳 +2 位作者 胡蓉 汤禾静 王梦莹 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期62-64,共3页
目的 应用串联质谱技术鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列。方法 将C端富含精氨酸和赖氨酸的重组人乳头瘤病毒L1蛋白酶解成合适长度的肽段混合物,运用液质联用技术进行鉴定。结果 分别对6、11、16、18亚型的重组人乳头瘤病毒L... 目的 应用串联质谱技术鉴定重组人乳头瘤病毒L1蛋白C端的氨基酸序列。方法 将C端富含精氨酸和赖氨酸的重组人乳头瘤病毒L1蛋白酶解成合适长度的肽段混合物,运用液质联用技术进行鉴定。结果 分别对6、11、16、18亚型的重组人乳头瘤病毒L1蛋白的C端氨基酸序列进行了分析确证,均与理论序列一致。结论 所用分析方法简单可行,为HPV疫苗的结构表征和质量控制提供了参考和依据。 展开更多
关键词 串联质谱 人乳头瘤病毒 类病毒颗粒 C端氨基酸序列 重组蛋白 结构表征 多酶切位点 质量控制
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