继代培养球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫毒力和产孢量的影响及菌株复壮研究

【目的】明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)在连续继代培养过程中对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)二龄幼虫毒力、产孢量的影响,并进行菌种复壮研究,为进一步利用球孢白僵菌对斜纹夜蛾的生物防治提供参考。【方法】将球孢白僵菌SCAUJH19继代培养10代,得到F_(1)~F_(10)代菌株并测定产孢量。采用浸虫法分别用F_(1)~F_(10)代菌株处理斜纹夜蛾二龄幼虫,测定其对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力;建立模型分析球孢白僵菌继代培养代数、毒力与产孢量的关系及毒力退化规律。采用活虫复壮法对F_(4)、F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株进行复壮,比较复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力效果,并测定产孢量。【结果】球孢白僵菌F_(1)~F_(5)代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫毒力无显著差异,处理7 d时校正死亡率为42.44%~45.22%,而F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率分别降至37.00%、22.94%、12.17%。F_(1)~F_(5)代菌株产孢量为9.65~10.43×10^(8)CFU/mL,F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株产孢量分别降至7.62×10^(8)、5.14×10^(8)、4.69×10^(8)CFU/mL。建立模型发现,菌株继代培养到F_(5)代后,产孢量随培养代数呈现指数下降,且产孢量与毒力存在一定的正相关关系,继代培养代数较少的菌株产孢量较高,对斜纹夜蛾二龄幼虫的致病力较强。通过活虫复壮法对F_(4)、F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株进行复壮后,菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率均>50%,且均高于原始菌株的最高致死率,复壮后菌株的产孢量均高于复壮前的产孢量。【结论】球孢白僵菌在继代培养4~5代后,产孢量逐代下降,对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力也逐代降低,需进行菌种复壮;采用活虫复壮法可将继代后的球孢白僵菌恢复或提高至原有特性;同一菌株的产孢量可作为评价其毒力的参考指标。

益蝽不同龄期若虫对草地贪夜蛾幼虫的捕食能力

为了评估益蝽若虫对草地贪夜蛾不同龄期幼虫的捕食潜力,本试验在室内条件下开展了益蝽若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫的捕食能力试验。结果表明:益蝽3、4、5龄若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫的捕食功能反应均符合HollingⅡ圆盘方程,3龄若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫的日最大捕食量分别为55.556、8.019、5.666头;瞬时攻击率分别为0.819、1.826、1.503;处理时间分别为0.018、0.125、0.177 d。4龄若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫的日最大捕食量分别为60.753、19.924、10.325头;瞬时攻击率分别为0.993、1.664、0.968;处理时间分别为0.017、0.050、0.097d。5龄若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫的日最大捕食量分别为65.789、23.635、12.331头;瞬时攻击率分别为1.021、1.307、0.863;处理时间分别为0.015、0.042、0.081d。益蝽若虫对草地贪夜蛾3、4、5龄幼虫都能捕食,对3龄幼虫捕食量最大,最喜欢捕食4~5龄幼虫,对4龄幼虫的瞬时攻击率最高。益蝽若虫对草地贪夜蛾具有较好的捕食能力,本文为草地贪夜蛾的可持续防控提供了新的方法和依据。

斜纹夜蛾核多角体病毒与增效剂混配对斜纹夜蛾幼虫的防治效果

研究斜纹夜蛾核多角体病毒与增效剂混配对斜纹夜蛾幼虫的防治效果。结果表明 ,增效剂可以提高病毒剂的杀虫效果 ,每 1 0 0 ml病毒剂 (1× 1 0 7PIB/ml)加入增效剂 0 .0 4g的防治效果最好。利用稀释 1 0 0 0倍的病毒可湿性粉剂防治银纹夜蛾、小菜粉蝶、小菜蛾幼虫 ,防效分别为 46 .7%、6 0 .0 %、47.2 %。

甜菜夜蛾幼虫饲养技术的改进

利用一次性塑料杯饲养甜菜夜蛾SpodopteraexiguaH櫣bner,一次性接入初孵幼虫,直至化蛹不再转移,也不再更换饲料。与已报道的方法相比,该方法操作简单,省工省时,可以提高工作效率。在各项饲养指标中,除平均蛹重略微偏低之外,其余指标均与已报道的数据基本一致。试验证明,采用该方法可以满足室内甜菜夜蛾的继代繁殖和批量饲养。

艾蒿粗提物和几种淋洗物对甜菜夜蛾幼虫的作用

测定了艾蒿粗提物对甜菜夜蛾的胃毒作用、与其它药剂及几种增效剂的联合作用 ,发现粗提物单用时毒力很低 ,但与其它几种药剂和部分增效剂有很好的增效作用。以幼虫取食量和体重变化为标准 ,分析了艾蒿粗提物和 4种有机溶剂淋洗物对甜菜夜蛾幼虫的拒食作用 ,发现丙酮淋洗物具有很好的拒食作用 ,其次为乙酸乙酯淋洗物 ,而粗提物和其它 2种淋洗物的拒食作用较小。

管侧沟茧蜂的寄生对甜菜夜蛾幼虫取食和发育的影响

为了明确和评价管侧沟茧蜂的利用价值,采用寄生与未寄生对比的方法,研究了管侧沟茧蜂的寄生对甜菜夜蛾幼虫取食量和发育的影响。结果表明,被寄生的甜菜夜蛾1,2,3龄幼虫与未被寄生的同龄期幼虫取食量差异达极显著水平;被寄生的1,2,3龄幼虫分别比未被寄生的同龄期幼虫取食量减少75 01%,65 64%和57.45%。被寄生的1,2,3龄幼虫取食量间的差异达显著水平,被寄生的2,3龄幼虫与被寄生的1龄幼虫的取食量差异达极显著水平,即1龄<2龄<3龄。被寄生的3龄幼虫与未被寄生的发育历期差异达极显著水平。被寄生的2,3龄幼虫与被寄生的1龄发育历期差异达显著水平。被寄生的幼虫随发育历期的延长,其取食量和幼虫体重缓慢上升,被寄生的从第6d或第7d后取食量和幼虫体重缓慢下降。所有被寄生的幼虫均不能化蛹。该寄生蜂不仅能够有效地控制甜菜夜蛾当代危害,而且在很大程度上能够抑制甜菜夜蛾的种群数量。

斜纹夜蛾幼虫肠道不同部位对Zn^(2+)积累作用的比较研究

在人工饲料中添加不同浓度的Zn2+连续胁迫3个世代的斜纹夜蛾Spodoptera litura Fabricius幼虫,采用等离子体原子发射光谱仪检测分析了连续3个世代6龄幼虫肠道不同部位对食物中Zn2+的积累作用。结果表明,Zn2+可在六龄幼虫前、中和后肠中积累,积累量受到食物中Zn2+的浓度和胁迫世代数的双重影响。每个世代6龄幼虫前肠、中肠和后肠中的Zn2+含量均随着饲料中Zn2+浓度增加而增加。六龄幼虫肠道3个不同部位对Zn2+的积累作用依次为前肠<中肠<后肠。而随着胁迫世代数的增加,不同世代6龄幼虫前肠、中肠和后肠中的Zn2+含量表现出显著减少的趋势。因此,植食性昆虫消化道不同部位对食物中Zn2+的积累作用有所不同,并随着胁迫世代数的增加而显著减少。

苦楝果乙醇粗提物对斜纹夜蛾幼虫取食行为的影响

探讨了苦楝Meliaazadarach果的乙醇粗提物对斜纹夜蛾Spodopteralitura5龄幼虫取食行为的影响。结果表明,经苦楝果乙醇粗提物处理后的斜纹夜蛾5龄幼虫,其10h内发生的取食活动和取食间间隔的次数减少,平均每次取食活动和取食时间间隔持续的时间延长;在每次取食活动中,用于取食的时间明显减少,这反映苦楝果乙醇粗提物能显著影响斜纹夜蛾的取食行为。

15%茚虫威悬浮剂防治甜菜夜蛾幼虫

应用15％茚虫威悬浮剂防治甜菜夜蛾幼虫试验表明,15％茚虫威悬浮剂用药量20、15、10mL/667m2,药后2 d校正防效为85.48％、82.63％、69.28％;药后5 d校正防效为88.45％、83.50％、68.67％;药后11 d校正防效为85.25％、78.27％、62.76％。防治效果均显著高于48％辛硫磷乳油50 mL/667 m2和20％米螨胶悬剂50mL/667 m2。15％茚虫威悬浮剂以胃毒作用为主,在试验作物上未见有药害现象。

大白菜田斜纹夜蛾幼虫发生特点与防治技术

斜纹夜蛾是长江中下游地区秋季大白菜田重要害虫之一，危害损失大。1头幼虫蛀食叶球后往往将整个叶球完全食毁，常年叶球被蛀害率20％-40％，严重的达50％以上，损失5成以上。斜纹夜蛾的发生危害已成为严重制约我市秋季大白菜生产的重要因子之一。生产中，菜农盲目用药现象严重，有的甚至使用甲胺磷等高剧毒农药，对食用者的身体健康，乃至生命安全构成了极大威胁。为控制危害，2004年以来我们进行了斜纹夜蛾幼虫在大白菜田的发生危害规律调查，并进行了化学防治技术研究．取得了预期结果。

甜菜夜蛾幼虫脂肪体细胞建系方法的探讨

本研究以甜菜夜蛾幼虫脂肪体组织为材料,探讨最初该细胞通过原代培养从组织中游离出不断增殖,经过数次传代,最终建立细胞系的过程以及培养过程中污染控制、培养基结晶对原代培养的影响等。结果表明,贴壁处理对原代细胞的游离具有重要作用,经贴壁处理,有62%的培养出现游离细胞;游离出来的细胞持续增殖,能够布满培养表面并进行传代的比率为33%;最终有15%的原代培养建系成功。起始培养至首次传代成功的平均时间是85天。污染和培养基结晶是原代培养失败的重要原因之一。

蔬菜作物甜菜夜蛾幼虫发生与防治

调查结果表明,甜菜夜蛾幼虫在益阳市从5月下旬至11月底都有幼虫发生为害,只是量的多少不同而已,每月一个高峰期,一般都在中下旬,共7个高峰期,尤以8月发生量最大,5、6、11月发生量少,基本不构成为害。在白天一天中,晴天09:00前是为害高峰期,下午17:00后进入为害高峰期;阴天10:00前是为害高峰期,下午16:00后进入为害高峰期。为害的蔬菜作物主要是十字花科类、豆类、茄果类、葱蒜类、芦笋、菠菜、菜用红薯叶等。

益蝽对烟草斜纹夜蛾幼虫的捕食能力评价

为明确捕食性天敌昆虫益蝽捕食烟草斜纹夜蛾的能力,在温度(25±1)℃、相对湿度(65±5)%、光周期16L∶8D的室内条件下,开展了益蝽捕食烟草斜纹夜蛾幼虫的捕食功能反应试验。结果显示,益蝽对烟草斜纹夜蛾3、4、5龄幼虫的捕食功能反应均符合HollingⅡ方程;益蝽成虫对3、4、5龄斜纹夜蛾的日最大捕食量分别为59.20、27.36、9.68头;瞬时攻击率分别为1.077 3、1.070 5、1.529 6;处置时间分别为0.016 9、0.036 5、0.103 3 d;从反应捕食能力的a/Th值来看,益蝽捕食3、4、5龄幼虫的a/Th值分别为63.77、29.29、14.81,表明益蝽对3龄幼虫具有最强的捕食力。表明在利用益蝽进行生物防治时,当田间斜纹夜蛾幼虫达到3龄高峰时,释放益蝽可取得更好的防治效果。

20%甲维·虫酰肼SC防治甜菜夜蛾幼虫田间药效试验

20%甲维·虫酰肼SC是广东省浩德作物科技有限公司研制生产的杀菌剂,为确定其对甘蓝甜菜夜蛾幼虫的最佳使用量和防治效果,2009年9月我们在温州市龙湾区进行了田间药效试验,现将试验结果总结如下。

斜纹夜蛾幼虫血细胞的种类及其离体变化研究

本文详细描述了斜纹夜蛾幼虫各种血细胞的光学形态及超微结构。血细胞可分为原细胞、浆细胞、颗粒细胞、小球细胞、凝集细胞和类绛色细胞。原细胞分化为浆细胞进而发育为颗粒细胞的衍化关系明显;小球细胞、凝集细胞和类绛色细胞离体后可将内中物释放至血浆中。同时对小球细胞和类绛色细胞的功能作了讨论。

河南漯河田间草地贪夜蛾幼虫天敌资源调查

为明确河南省漯河地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)的自然天敌资源,在当地春玉米、夏玉米、冬小麦和自生玉米苗等植株上,调查采集草地贪夜蛾幼虫进行室内饲养观察。结果发现有寄生蜂、病原真菌和昆虫病原线虫等天敌类群,寄生率或感染率分别为0~43.75%、0~32.95%和0~23.08%。寄生蜂种类分别为棉铃虫齿唇姬蜂(Campoletis chlorideae Uchida)、台湾甲腹茧蜂(Chelonus formosanus Sonan)、马尼拉侧沟茧蜂(Microplitis manilae)、中红侧沟茧蜂(Microplitis mediator Haliday)和盘背菱室姬蜂[Mesochorus disceitergus(Say)],其中棉铃虫齿唇姬蜂为优势种,占寄生蜂总数量的87.50%;昆虫病原真菌有绿僵菌和白僵菌,以绿僵菌为主。本研究可为当地草地贪夜蛾的可持续绿色防控提供基础数据。

草地贪夜蛾幼虫肠道细菌的分离鉴定及纤维素降解细菌的筛选

【目的】本研究旨在明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫肠道可培养细菌组成,筛选纤维素降解细菌。【方法】采用传统细菌培养及16S rDNA分子标记相结合的方法分离鉴定草地贪夜蛾幼虫肠道可培养细菌;采用刚果红染色法筛选纤维素降解细菌,并通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定不同pH(5.0-9.0)条件下的纤维素酶活力。【结果】从草地贪夜蛾幼虫中筛选分离出14种肠道细菌菌株,分别隶属放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)等3门11属,即谷氨酸棒杆菌属(Glutamicibacter)、肠球菌属(Enterococcus)、芽胞杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、摩根菌属(Morganella)、肠杆菌属(Enterobacter)、志贺氏菌属(Shigella)、克洛诺杆菌属(Cronobacter)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、沙雷氏菌属(Serratia)、苍白杆菌属(Ochrobactrum)。2株产纤维素酶细菌隶属厚壁菌门芽胞杆菌属。酶活力测定结果显示:2株纤维素降解细菌的纤维素酶在pH 6.0-8.0均有相对较高的活性,在pH 8.0时,纤维素酶活最高。【结论】草地贪夜蛾幼虫肠道中细菌种类多样,其肠道内存在纤维素降解细菌。在偏碱性条件下,纤维素降解细菌的纤维素酶活力显著高于酸性条件。研究结果丰富了纤维素降解细菌资源,在饲料生产、食品加工、化学能源等方面具有应用前景。此外,草地贪夜蛾作为重大农业害虫,其肠道有益菌群,有望成为新的防治靶标。

金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾幼虫的生防效果、抗氧化酶活性和肠道细菌群落的影响

【目的】测定金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)2龄幼虫的毒力,研究金龟子绿僵菌侵染后寄主体内抗氧化酶活性和肠道内细菌群落的变化,探讨斜纹夜蛾对金龟子绿僵菌侵染的防御机制。【方法】采用浸渍法测定不同浓度金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾2龄幼虫的毒力;应用Illumina MiSeq高通量测序技术测定肠道细菌群落。【结果】不同浓度的孢悬液对斜纹夜蛾2龄幼虫均有一定的毒力,处理7 d时半致死浓度(LC_(50))为3.944×10^(7)个孢子/mL;浓度为1.0×10^(9)个孢子/mL时,半致死时间最短(LT_(50))为4.6 d,校正后的死亡率为81.03%。处理后未致死的斜纹夜蛾幼虫体内抗氧化酶活性显著高于对照组。处理后致死的斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落多样性显著高于对照组;且处理后致死的斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落组成与对照组差异显著。【结论】金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾幼虫的致死率和致死效率与金龟子绿僵菌的浓度呈正相关;斜纹夜蛾幼虫体内的抗氧化酶可能在抵抗金龟子绿僵菌侵染的过程中起重要作用。金龟子绿僵菌的侵染会导致斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落多样性升高和组成发生变化,Enterococcus、Escherichia和Pseudomonas等属可能是影响斜纹夜蛾幼虫抵抗金龟子绿僵菌侵染致死的重要因素。