女贞叶中一条糖基转移酶的基因克隆、生物信息学分析及原核表达

女贞叶化学成分复杂,糖苷类物质是其发挥药理活性的关键成分,糖苷的形成离不开糖基转移酶。利用cDNA末端快速扩增技术,对女贞叶中一条糖基转移酶编码基因LlUGT3进行了克隆;根据基因和蛋白质序列进行了生物信息学分析;通过基因工程技术使LlUGT3基因在大肠杆菌体内进行了异源表达。结果表明,LlUGT3基因cDNA全长1684 bp,由85 bp 5′-UTR、159 bp 3′-UTR、1440 bp ORF组成,其中ORF编码一条含479个氨基酸残基的酶蛋白,其相对分子质量、理论等电点和亲水性平均系数分别为54.8 kDa、5.86和-0.381;在LlUGT3酶蛋白一级结构中含有一段糖基转移酶高度保守的PSPG盒,但不含信号肽且无跨膜片段,在二级结构中含有α螺旋(42.59%)、β折叠(12.73%)和无规卷曲(44.68%),在三级结构中由肽链折叠形成α/β/α类Rossmann折叠区域,并且两者之间夹着一个底物结合腔;同源建模结果显示,LlUGT3酶蛋白与模板分子PaGT3序列相似度很高,而且系统发育树分析也表明两者亲缘关系最近;分子对接分析表明,LlUGT3酶蛋白的His17-Asp116对发挥催化功能,PSPG盒主要涉及结合UDPG,而LIUGT酶与辣椒素的结合方式与PaGT3相似;通过基因工程技术,实现了LlUGT3基因在大肠杆菌体内的异源表达。该研究为进一步深入研究LlUGT3酶蛋白的结构与功能奠定了基础。

金叶女贞龟蜡蚧的防治技术

金叶女贞是木樨科女贞属半常绿灌木,其初生叶金黄色,老叶绿色、有光泽,可与绿色、红色等植物搭配构造色块等,近年来已成为城市园林绿化中广泛应用的彩叶植物。随着金叶女贞在园林绿化中应用面积的增大和种植时间的延长,虫害发生日趋严重,其中龟蜡蚧是金叶女贞植物保护工作重点防治对象。下面介绍金叶女贞龟蜡蚧的防治技术,供园林绿化管理者参考。

安庆大叶女贞育苗技术及管理要点

大叶女贞是一种优良的绿化树种,用途广,既可作为行道树或庭院树,也可作为绿篱树,经济价值很高。从选地整地、采种、播种、扦插、苗期管理、病虫害防治等环节入手,分析大叶女贞育苗及管理技术要点,以期为安庆地区林业生产提供参考。

紫色土上大叶女贞苗接种丛枝菌根真菌后对干旱胁迫的响应

为探讨紫色土上大叶女贞苗接种不同丛枝菌根真菌(AMF)后对干旱环境的响应,采集紫色土区的大叶女贞种子,以紫色土为基质,先采用盆栽方式育苗,再对幼苗分别接种摩西斗管囊霉(FM)和幼套近明球囊霉(CE)两种AMF,进行干旱胁迫试验,研究两种AMF对紫色土上大叶女贞叶片生长与生理特性的影响。结果表明:干旱胁迫使紫色土上大叶女贞的叶片数显著减少,使叶面积、叶长、平均叶宽等均显著减小,使叶片相对含水量显著降低,但叶干物质含量受干旱胁迫后反而提高了。干旱胁迫使大叶女贞叶片的净光合速率受到抑制,接种AMF后抑制程度减轻;干旱胁迫还显著降低了大叶女贞叶片的气孔导度、胞间CO_(2)浓度、蒸腾速率、光化学猝灭系数(qP),但提高了大叶女贞叶片的非光化学猝灭系数(NPQ)和SPAD值。接种AMF使大叶女贞叶片数增多、叶面积增大,使叶片相对含水量、水分利用效率、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)和SPAD值提高,特别是在干旱胁迫的环境下,促进作用更明显。接种FM对紫色土上大叶女贞的叶片数增多和叶面积、叶长、叶宽增大以及水分利用效率提高等的促进效果都优于接种CE的。

大叶女贞叶功能性状随不同树龄的变化规律研究

为研究不同树龄大叶女贞叶片功能性状随树龄的变化规律,通过测定大叶女贞的功能性状,分析大叶女贞树的胸径、树的高度、冠幅与比叶面积和叶干物质含量之间的关系。结果表明:在不同的生长期,大叶女贞的比叶面积、叶干物质含量会发生显著变化;随着胸径、树的高度、冠幅的不断增加,大叶女贞的比叶面积会明显下降;随着胸径、树的高度、冠幅的不断增加,大叶女贞的叶干物质含量也会明显下降,这为大叶女贞在园林中的应用与管理提供生态学理论依据。

不同生根促进剂对大叶女贞扦插生根的影响

以大叶女贞为试验材料,研究了不同生根促进剂在不同浓度、不同作用时间下对扦插生根的影响。结果表明:不同生根促进剂、浓度、处理时间对大叶女贞扦插生根的影响各不相同,其中采用200mg/L吲哚丁酸处理30min时,大叶女贞扦插生根效果最佳。

粗壮女贞提取物成分的抗氧化能力分析

采用不同溶剂萃取粗壮女贞(Ligustrum robustum,LR)提取物,测定粗壮女贞不同提取物多酚、总黄酮、粗多糖、总生物碱的含量,通过清除DPPH自由基、氧自由基吸收能力、清除ABTS自由基、清除羟自由基(·OH)、清除超氧阴离子自由基(O_(2)^(-·))、铜离子还原法(CUPRAC)、铁离子还原能力(FRAP)、亚铁离子螯合法(FIC)8个测定试验考察不同溶剂提取物的抗氧化活性,并通过相关性分析探讨成分含量和抗氧化活性的关系。结果表明,正丁醇层的总黄酮、多酚含量较高;剩余水层中粗多糖含量较高。正丁醇提取层在7个抗氧化指标试验(羟自由基试验除外)中抗氧化能力最强,剩余水层清除羟自由基能力最强。8个测定试验中粗壮女贞粗提物的金属离子还原/螯合能力高于各萃取层。相关性分析表明,多酚含量与7个抗氧化试验结果呈显著或极显著正相关关系。

大叶女贞抗寒性及冬季叶片丙二醛和可溶性糖含量的变化

为了探索冬季大叶女贞叶片丙二醛、可溶性糖含量的变化规律及其与植株抗寒性的关系,以不同树龄、不同抗寒性植株叶片为材料,于2011年11月上旬—2012年3月中旬的每1个节气内分别采样,测定叶片丙二醛及可溶性糖的含量,并在2012年4月初对每个采样树冬季受冻情况进行调查。结果表明:不同树龄及不同抗寒性的植株冬季叶片丙二醛及可溶性糖具有不同的变化曲线,低温胁迫下叶片丙二醛及可溶性糖含量出现上升趋势越早、上升幅度越大的植株,其抗寒性越差。丙二醛、可溶性糖反映出的抗寒性与植株实际的受冻情况基本一致,两者可作为植物抗寒性测定的生理指标。优树的抗寒性与普通树或受冻树的差异,是由于其在低温胁迫下的生理调节能力不同所致,这种生理调节能力和植株的遗传性有关,且随着树龄的增加有增强的趋势。

抗寒型大叶女贞的筛选及其抗寒性与相对电导率的关系

采用5株优势木法对郑州市区的大叶女贞进行了抗寒型筛选,共筛选出20株抗寒优树;在筛选优树的基础上,对其抗寒性与相对电导率的关系进行了分析。结果表明:大叶女贞的抗寒能力与其叶片相对电导率关系密切,抗寒能力越强,持续低温处理时叶片相对电导率回归系数越小;8月份-15℃、-20℃处理和12月份-20℃处理时的叶片相对电导率可以直接用来鉴定无性系间抗寒性强弱。比较结果显示:抗寒优树中65号抗寒性较强,66、4号次之,49号最弱。

生长季大叶女贞树干液流的径向分布特征

采用根据热平衡原理设计的热扩散探针(TDP),于2010年5-10月在河南省济源市的黄河小浪底森林生态系统定位研究站对大叶女贞径向10mm、20mm、30mm深度处的树干液流进行连续监测,并分析大叶女贞径向不同深度液流的变化规律及其与各气象因子的关系。结果表明:(1)大叶女贞在整个生长季南北方位径向液流速率平均值沿边材从外到内均呈现"低-高-低"的分布特点,即Fs_20>Fs_30>Fs_10。(2)不同月份,南北方位不同深度液流速率月平均值在整个生长季变化趋势基本一致,南面为6月>7月>8月>9月>10月>5月,北面为7月>6月>8月>9月>10月>5月。(3)在整个生长季,三种典型天气春季液流速率都是Fs_10>Fs_20>Fs_30,夏秋季都是Fs_20>Fs_30>Fs_10。径向上液流启动时间都是Fs_10>Fs_20>Fs_30,停滞时间绝大多数为Fs_30>Fs_20>Fs_10,即越靠近形成层其启动时间越早,停滞时间越晚。(4)在日变化和季节变化上,三个深度的变化趋势基本一致。晴天,春季液流速率日变化均呈现尖峰形曲线,夏季呈现宽峰形,秋季呈现双峰形;多云天气,春夏秋液流速率日变化均呈现多峰形曲线。夏季树干液流启动时间早于春秋,停滞时间晚于春秋,因此,夏季液流高峰持续时间均长于春秋季,即夏季液流速率的曲线峰形明显宽于春秋季。

金叶女贞中熊果酸的提取工艺研究

[目的]筛选金叶女贞中熊果酸的最佳提取工艺。[方法]采用纤维素酶解法提取金叶女贞中熊果酸,以5%香草醛及高氯酸作为显色剂,通过正交试验确定显色的最佳条件,在波长550 nm处用分光光度法测定熊果酸的含量。[结果]最佳显色条件为:0.3 ml浓度5%香草醛、1.0 ml高氯酸、温度60℃,此条件下女贞花中熊果酸提取率达2.037%。[结论]正交试验表明,在最佳提取工艺条件下,熊果酸的提取率比较理想;提取试验表明,在金叶女贞不同器官中,果实中熊果酸含量最高。

不同基质与容器对大叶女贞容器苗生理特性的影响

为筛选适合大叶女贞容器苗生长的基质与容器,研究了7种基质配方与2种育苗容器对大叶女贞容器苗叶片生理特性的影响。结果表明:基质配方P2(泥炭∶蛭石=1∶1)与P5(泥炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1)处理大叶女贞叶片叶绿素含量、相对电导率、净光合速率、过氧化物酶(POD)活性及过氧化氢酶(CAT)活性均优于其他基质配方,可作为大叶女贞容器育苗的优良基质配方;对2种育苗容器而言,无纺布容器苗在叶绿素含量和净光合速率2个方面明显高于塑料袋容器,其他指标差异不明显,基于无纺布容器苗根系发达、移栽成活率高且无纺布可自动降解等优点,确定无纺布容器是适合大叶女贞容器育苗的理想容器类型。

大叶女贞籽脂肪酸组成分析

利用气相色谱测定大叶女贞籽油中的脂肪酸组成进行分析,研究结果表明大叶女贞籽中脂肪酸主要有C16:0,C18:0,C18:1,C18:2,C18:3五种脂肪酸,其含量分别为11.22%,4.40%,28.02%,50.06%,3.04%。这五种脂肪酸分别为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸以及亚麻酸。大叶女贞籽油中不饱和酸占总脂肪数的80%以上,属于不饱和型油脂,具有一定开发利用潜力的油料资源。

冠层部位对金叶女贞叶片结构的影响

金叶女贞是一种在园林绿化上广泛应用的彩叶植物,上层叶金黄色,下层叶深绿色。本文利用常规植物制片技术,研究了叶绿素缺少的金叶女贞上层金叶和下层绿叶的解剖结构。结果表明:(1)金叶女贞上层金叶和下层绿叶的上表皮无显著差异,但是下层绿叶的下表皮细胞较小,气孔密度较低;(2)下层绿叶的叶肉组织较薄,细胞较大,排列疏松;(3)在下层绿叶中叶绿体类囊体片层排列密集,叶肉组织内单位体积叶绿体数量较少;(4)冠层部位对光合色素的积累有明显影响。叶绿素缺少的金叶女贞叶片结构显著受到冠层部位的影响,光合色素的变化幅度较一般植物更大,不同冠层部位叶片叶色有明显差异,可以作为研究植物冠层部位对叶形态、结构和生理生化影响的好材料。

女贞叶中叶绿素锌钠制备及其稳定性的研究

采用95％乙醇做溶剂对女贞叶中的叶绿素进行浸提,并经皂化、酸化、锌代及成盐反应制备叶绿素锌钠。叶绿素锌钠的水溶性好,难溶于丙酮和乙醇。以女贞叶制得的叶绿素锌钠在411nm处有最大吸收峰。研究表明在80℃以下,叶绿素锌钠对热较为稳定,在80℃条件下保温0．5 h,叶绿素锌钠的吸光值没有大的变化, 但是加热时间大于1 h对产品色泽影响较大,叶绿素锌钠的吸光值降低很多。叶绿素锌钠对光较敏感,在制备过程中应尽量避免强光,叶绿素锌钠对VC、蔗糖、食盐、苯甲酸钠、山梨酸钾食品添加剂均有好的耐受性。在弱酸、中性及碱性条件下较为稳定。作为一种天然色素,叶绿素锌钠具有很好的开发前景。

干旱胁迫对6个类型大叶女贞的生理影响及抗旱性评价

利用盆栽方式,测定干旱胁迫下6个类型(L1:窄冠型、L2:宽冠型、L3:黄皮型、L4黑皮型、L5:大叶型、L6:小叶型)大叶女贞2年生嫁接苗的丙二醛、细胞膜透性、脯氨酸等生理指标,研究其对干旱胁迫的生理响应,并用隶属函数法进行抗旱性综合评价。抗旱性综合评价表明:6个类型大叶女贞的抗旱性强弱为L6>L4>L3>L5>L2>L1。

HPLC法测定不同产地女贞叶中熊果酸的含量

[目的]用高效液相色谱法（HPLC）考察5个不同产地女贞叶中熊果酸的含量.[方法]用高效液相色谱法所用色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-甲醇-0.5％醋酸铵溶液（67∶12∶21）,检测波长为210 nm.[结果]方法学考察结果,回归方程为Y=4.715 5X＋ 17.918,R2 =0.999 4,熊果酸含量在5.21～125.12 μg/ml浓度范围内线性关系良好.用该方法测得5个不同产地女贞叶中熊果酸的含量存在差异,其中上海市产的含量最高,为2.157 4 mg/g,南阳唐河产的含量最低,为0.863 0mg/g.[结论]同一采集时间,不同产地的女贞叶因环境因素,所含熊果酸的含量差异较大.

女贞叶提取物及其成分熊果苷祛痰、镇咳作用的实验研究

目的:探讨女贞叶提取物及其成分熊果苷的祛痰、镇咳作用。方法:采用小鼠气管酚红法、大鼠毛细玻管法观察女贞叶提取物、熊果苷对气管分泌的影响,采用氨水、二氧化硫引咳,观察药物的镇咳作用。结果:女贞叶提取物和熊果苷均可增加动物气管分泌,延长氨水引咳潜伏期、减少3min内咳嗽次数,延长二氧化硫致咳潜伏期,并与已知中成药及西药作用相当。结论:女贞叶提取物具有祛痰、镇咳作用,熊果苷是女贞叶提取物祛痰、镇咳的主要成分。

大叶女贞抗寒基因AmEBP1高效转化体系的研究

本研究以大叶女贞为受体材料,利用农杆菌浸染方法对沙冬青抗寒基因AmEBP1进行转化试验,通过对不同的受体材料浸染部位、菌液浓度和浸染时间对转化材料的死亡率%、分化率%、分化芽数(个)、芽苗长度(cm)以及芽苗颜色影响进行了分析,结果表明:转化材料为茎段,菌液浓度稀释为50%,浸染时间15 min;其中浸染部位是影响基因高效转化的最主要因素,菌液浓度和浸染时间的作用次之;方差分析进一步发现,浸染部位的三个水平对于外源基因在植物体内的转化显著差异,因此选择合适的浸染部位、适宜的菌液浓度和浸染时间能提高基因转化效率;经在50 mg/L浓度的卡那霉素培养基筛选培养,获得一批抗性植株,经PCR检测获得5株转化株系。

不同剂量女贞、银杏叶提取物对苏北草鸡生产性能的影响

在基础日粮中添加不同比例(0.8%、1.0%、1.2%)女贞、银杏叶提取物,研究不同添加比例对苏北草鸡性能的影响。添加1%银杏叶提取物能显著提高鸡后期增重和饲料转化率,显著降低鸡腹脂率;屠宰率随着银杏叶提取物添加水平的增加有提高的趋势;添加1.2%银杏叶提取物能显著提高鸡全净膛率和血清球蛋白含量。添加1.0%、1.2%女贞提取物的试验组日增质量和料肉比显著好于对照组;所有组间屠宰率差异不显著,而试验组全净膛率、腹脂率与对照组差异显著(除添加0.8%女贞提取物试验组的全净膛率外)。添加不同浓度银杏叶提取物试验组的GOT、GPT含量在正常值范围内,说明银杏叶提取物的添加浓度与GOT、GPT不相关,GLB含量随银杏叶提取物添加浓度的增加而升高。添加1.0%、1.2%女贞提取物试验组的GLB、IgG与对照组差异显著,且添加1.0%女贞提取物试验组整体的血液生化指标较其他3个组好。说明本试验中添加1.0%女贞、1.2%银杏叶对苏北草鸡的生长与保健具有较好的养殖功效。