4种大型红藻类菌胞素氨基酸的提取工艺优化与分离鉴定

类菌胞素氨基酸(Mycosporine-like amino acids,MAAs)广泛存在于大型红藻中,是一类具有良好应用前景的活性物质。本文采用单因素和正交试验,分析了提取温度、时间、次数和料液比对红毛苔、石花菜、菊花江蓠和江蓠中MAAs提取物得率的影响,优化提取MAAs工艺,并对提取物进行了分离鉴定。结果表明,毛苔、石花菜、菊花江蓠和江蓠中MAAs优化提取工艺分别为:45℃、3 h、4次、1:25 g/mL;45℃、1 h、4次、1:20 g/mL;45℃、2 h、3次、1:15 g/mL;40℃、1 h、3次、1:20 g/mL。应用上述提取工艺,制备得到4种大型红藻MAAs提取物,提取物得率依次为249.3、197.9、146.4和449.5 mg/g,其在紫外光谱和薄层层析板呈现MAAs紫外吸收特性和颜色反应。同时,采用硅胶柱层析,对红毛苔和江蓠MAAs提取物进行分离,共得到3个组分H1、J1和J2。通过紫外光谱扫描、高效液相色谱和质谱分析,并与已有文献比较,确定了其MAAs组成。H1包括shinorine、palythine和porphyra-334(3种MAA含量为组分H1含量的95.4%)、palythenic acid(4.6%);J1包括shinorine、palythine和porphyra-334(3种MAA为组分J1含量的96.3%)、palythenic acid(3.7%);J2为palythine单体。

4种大型红藻类菌胞素氨基酸提取物的吸湿保湿活性

类菌胞素氨基酸广泛存在于大型红藻中,是一类具有良好应用前景的活性物质。以红毛苔、石花菜、菊花江蓠和江蓠为原料,在相对湿度(RH)为43%、81%和干燥环境条件下,测定它们MAAs提取物的吸湿率与保湿率。在RH43%下,4种大型红藻MAAs提取物的吸湿率均高于丙三醇和透明质酸的吸湿率。在RH81%下,4种红藻MAAs提取物吸湿率略有下降,但仍然高于透明质酸的吸湿率;与丙三醇比较,保湿率顺序为石花菜和菊花江蓠MAAs提取物>丙三醇≈红毛苔,江蓠MAAs提取物保湿率在3~48h内小于丙三醇的保湿率,66h后保湿率大于丙三醇的保湿率。4种大型红藻MAAs提取物的吸湿能力高于已报道的海带多糖等海藻多糖及其寡糖。同时,4种红藻MAAs提取物具有一定的保湿能力,保湿率顺序依次为江蓠MAAs提取物≈丙三醇>石花菜和红毛苔MAAs提取物≥透明质酸>菊花江蓠MAAs提取物。

DNA条形码技术在大型红藻分子鉴定中的应用

本研究对浙江省枸杞岛贻贝养殖区大型海藻资源进行了调查，在形态学观察的基础上，选取93株红藻样品运用DNA分子条形码技术进行分子鉴定分析。采用的3个分子标记分别为rbcL（叶绿体基因组中1，5-二磷酸核酮糖羧化／加氧酶大亚基基因），COI（细胞色C氧化酶亚基I）和UPA（23 SrRNA基因片段，通用质体扩增区1基因片段。通过实验，我们共扩增出rbcL基因片段79条，扩增成功率为84．95％；共扩增出COI基因片段63条，扩增成功率为67．74％；共扩增出UPA基因片段76条，扩增成功率为81．72％。3个分子标记的测序成功率分别为：rbcL基因78．49％，COI基因29．03％，UPA基因72．04％。COI基因的扩增效率和测序成功率均低于rbcL和UPA基因。基于3个基因构建（Neighbor-joining，N—J）系统进化树表明，rbcL基因可以将红藻样品归类为5目，6科，7属，12种；COI基因可以将样品归类为4目，5科，5属，5种；UPA基因可以将样品归类为6目，7科，8属，11种。rbcL、COI和UPA3个基因结合可以将样品归类为7目8科11属21种。研究表明rbcL基因以及UPA基因较适合做为鉴定大型红藻的分子标记，C01基因做为红藻分子标记的潜力有待进一步开发和研究。