大孔吸附树脂纯化花生根中白藜芦醇工艺及其动力学研究

以花生根白藜芦醇提取液为原料,对选取的5种大孔树脂进行静态吸附试验,确定DA-201树脂为最优吸附树脂。通过DA-201树脂吸附白藜芦醇的动力学试验、DA-201树脂等温吸附试验、上样量试验与动态洗脱试验以及考察上样流速、洗脱流速和洗脱溶剂浓度的三元二次通用旋转组合设计柱层析试验等研究发现:DA-201树脂等温吸附白藜芦醇过程符合Langmuir和Freundilch方程。在上样质量浓度为0.7 mg/mL,上样液pH 3,上样体积为20 mL,洗脱体积为15 mL的条件下,进行DA-201大孔吸附树脂柱层析纯化试验,建立了大孔吸附树脂柱层析纯化白藜芦醇的数学模型。经回归与方差分析,对方程进行局部寻优得出:在上样流速1.00 mL/min,洗脱流速1.60 mL/min,乙醇体积分数75%,其纯化后白藜芦醇的得率为(80.13±0.01)%,经HPLC检测其纯度可以达到39.61%。

葡萄籽多酚提取条件优化及其脂肪酶抑制影响

【目的】研究葡萄籽中多酚的最优提取工艺条件并测定其对脂肪酶的抑制率.【方法】通过响应面法优化葡萄籽多酚的提取工艺,然后分析不同体积分数乙醇对AB-8大孔吸附树脂纯化的葡萄籽多酚的脂肪酶抑制率.【结果】葡萄籽多酚最佳提取条件为70%乙醇、纤维素酶添加量为0.5 mg/mL、料液比1∶10、提取温度54℃、提取时间39 min、提取次数4次;得到的葡萄籽提取物对胰脂肪酶活性抑制活力IC50值为2.46 mg/mL.【结论】经过条件优化,多酚的提取率提高,所提取的多酚具有胰脂肪酶活性抑制活力.AB-8大孔吸附树脂法中不同乙醇洗脱组分对脂肪酶活力的抑制作用有一定差异,其中40%乙醇洗脱的葡萄籽多酚溶液对脂肪酶抑制效果最好.

红树林放线菌产抗菌活性物质的分离纯化研究

对红树林放线菌产生的抑菌活性物质进行了分离提取 ,采用的方法为有机溶剂萃取法、酸提取法、离子交换柱层析、大孔吸附树脂柱层析等 ,获得了两个具有抑菌活性的组分 ,经HPLC分析两组分均为纯物质 。

新型抗真菌抗生素分离与纯化

对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex50×16层析条件优化如下:pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为:体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C18(5μm,Φ4.6mm×250mm)氰基柱,流动相为0.01mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1mL/min,检测波长为220nm.HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632U/mg.

白头翁皂苷的分离提纯

酒精溶剂浸提得到较粗的白头翁总皂苷,脱脂后,经大孔树脂层析得到高产、高纯的白头翁总皂苷,得率为9.4%。总皂苷经硅胶柱层析得到无色的、纯度较高的单体皂苷,得率为22.8%。通过薄层层析把纯化的单体皂苷与标准品白头翁皂苷Ⅲ进行对照,分离纯化的单体皂苷与标准品相同,是3 O [α L 鼠李糖基(1→2) α L 阿拉伯糖苷] 3β,23 羟基 Δ20(29) 羽扇豆烯 28 O [α L 鼠李糖基(1→4) β D 葡萄糖基(1→6)] β D 葡萄糖酯苷。

海洋小单孢菌FIM03-345产生的活性成分的初步研究

目的研究海洋小单孢菌FIM03-345所产生的抗菌活性物质。方法以14种菌为供试菌,纸片法测定发酵液的抗菌谱;以枯草芽孢杆菌为指示菌检测活性。发酵产物采用有机溶媒提取、硅胶柱层析及HP20大孔吸附树脂柱层析等方法分离活性物质。结果小单孢菌FIM03-345发酵上清液对枯草芽孢杆菌和变形杆菌有强的抑制作用;发酵上清液60℃水浴2h活性不变,温度升高到80℃时活性明显降低;发酵液在pH2～8时活性无明显变化,在pH10～12时活性略下降;薄板层析结果表明该抗菌物质至少含有2个组分。结论海洋小单孢菌FIM03-345发酵液具有抗G+细菌活性。该活性物在酸性和中性下较稳定,在pH10以上及温度80℃时活性下降。发酵液粗提物中A为主要活性组分。