兰州大尾羊遗传资源保护利用现状与建议

兰州大尾羊是经兰州人民长期选育和自然选择形成的与当地生态环境相适应的优良地方肉脂毛兼用品种,科学保护并合理利用兰州大尾羊具有重大的生物学意义、历史文化价值和社会经济效益。该文从兰州大尾羊的种群数量、研究现状出发,深入分析了该品种保护利用的优势和群体数量变化的主要原因,提出了保护利用的主要方向,为该品种的保护和利用提供理论参考。

国家级畜禽遗传资源兰州大尾羊保护现状与对策

兰州大尾羊主要生长于兰州市城郊,是我国优良的肉脂兼用型地方绵羊品种之一,具有耐粗饲、生长发育快、肉用性能好、脂尾肥大等优点,也是我国优良的地方畜禽遗传资源。但受诸多因素的影响,兰州大尾羊一度濒临灭绝。随着种质资源国家战略的提出和深入实施,我国加大了对地方优良畜禽遗传资源的保护力度,开展兰州大尾羊遗传资源的保护和创新利用,具有极大的经济价值和社会价值。本文就兰州大尾羊保种现状及存在的问题进行分析和探讨,并提出合理的保护对策,以期为兰州大尾羊保护工作的高质量发展提供理论依据和参考。

广灵大尾羊HSD17B12基因克隆、生物信息学分析及表达规律的研究

本研究旨在克隆广灵大尾羊HSD17B12基因CDS,预测HSD17B12蛋白及其基因启动子区的结构和功能特性,探究HSD17B12基因在前体脂肪细胞分化过程中的表达。采用PCR法克隆HSD17B12基因CDS全长序列;生物信息学软件分析HSD17B12蛋白的理化性质、结构、功能位点和结构域,并进行亚细胞定位、序列相似性分析及其基因核心启动子区和转录因子潜在结合位点的预测;采用实时荧光定量PCR检测HSD17B12基因以及部分转录因子在前体脂肪细胞分化过程中的相对表达量。结果显示,广灵大尾羊HSD17B12基因CDS全长939bp,编码312个氨基酸;HSD17B12蛋白主要定位于内质网,有3个跨膜结构域和33个磷酸位点,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,其氨基酸序列与山羊相似性最高;HSD17B12基因有5个潜在的核心启动子区,存在SP1、ATF2和CREB1等10个转录因子的结合位点;在前体脂肪细胞分化过程中,SP1、ATF2和HSD17B12基因的mRNA表达均呈上升趋势,说明ATF2和SP1可能正向调控HSD17B12基因的表达,促进脂质沉积。本研究为进一步揭示HSD17B12基因在绵羊成脂分化过程中的调控机制奠定了基础。

分子标记技术在兰州大尾羊育种中的应用及相关生长性状候选基因的研究进展

兰州大尾羊是我国特有的肉脂兼用型地方绵羊品种,也是珍贵的地方畜禽遗传资源,受诸多因素的影响,曾一度濒临灭绝。生长性状是绵羊重要的经济性状,通过分子标记辅助保种和选育是兰州大尾羊遗传资源保护和利用的有效技术手段。本文对兰州大尾羊分子标记辅助育种的研究进展以及与生长性状相关的候选基因MYLK4、MSTN、MTPN进行综述,以期为兰州大尾羊种质资源的保护和生长性能的提升提供参考。

冻融对兰州大尾羊肉品质、营养成分及超微结构的影响

为了探讨反复冻融对绵羊肉品质、营养成分及超微结构的影响,本研究采取1.0~1.5岁兰州大尾羊背最长肌进行不同次数的冷冻-解冻,分别检测样品肉的解冻损失、煮制损失、失水率、熟肉剪切力、pH、干物质含量、灰分含量、粗蛋白含量、粗脂肪含量及其超微结构的变化。结果显示,随着冻融次数的增加,样品肉解冻损失、煮制损失、干物质含量和灰分含量显著增加(P【0.05),剪切力和粗蛋白含量显著降低(P【0.05),冻融2次羊肉的失水率和冻融3次羊肉的粗脂肪含量显著高于其他各组(P【0.05),冻融对pH没有显著影响(P】0.05);冻融后线粒体肿胀并空泡样化;肌节缩短、排列紊乱;肌原纤维变形、断裂、间隙增大;Z线错位,甚至溶解、消失。表明,多次冻融可严重破坏绵羊肉的肌原纤维结构,改变营养成分,降低肉的品质。

兰州大尾羊血液蛋白多态性研究

为了探明兰州大尾羊的种质和遗传特性,采用聚丙烯酰胺凝胶水平板电泳,检测了131只兰州大尾羊血红蛋白、白蛋白、后白蛋白、转铁蛋白、慢-a2-球蛋白、血清淀粉酶、酯酶、苹果酸脱氢酶的多态性.结果发现,除白蛋白和慢-a2-球蛋白未表现出多态外,其他各蛋白质和酶均不同程度地呈现出多态,其中血红蛋白、后白蛋白、血清淀粉酶、酯酶、苹果酸脱氢酶各有2个等位基因,3种基因型;兰州大尾羊的平均基因杂合度为0.480 2,等位基因有效数为1.924,多态座位百分比为0.75.对Nei氏标准遗传距离进行聚类,发现兰州大尾羊与滩羊最近,其次为大尾寒羊和小尾寒羊.青海细毛羊、滩羊、兰州大尾羊、青海藏羊、考湖羊、河北杂种细毛羊、新疆细毛羊、罗姆尼半细毛羊、大尾寒羊、小尾寒羊、兰州大尾羊等11个绵羊品种的基因分化系数为0.079 36,这表明中国的绵羊品种的遗传变异性的92.064%是由遗传多态现象引起的,而7.936%来自品种间差异,即中国绵羊在血液蛋白质水平上的遗传分化程度不高.

脂尾去除对‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’屠宰性能及肉品质的影响

【目的】为研究脂尾去除对‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’屠宰性能及肉品质的影响.【方法】选取年龄和体质量均相近的‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’去势公羔各18只,随机分别对‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’各9只去除脂尾,15月龄屠宰,测定屠宰性状、肉品质和内脏器官指标并进行分析.【结果】脂尾去除对‘蒙古羊’的屠宰性能、肉品质和内脏器官指标的影响不显著(P>0.05),‘兰州大尾羊’的背膘厚、GR值分别增加1.41、1.67mm(P<0.10),失水率降低0.77%(P<0.10)、剪切力减小0.59kg/f(P<0.10)、pH1升高0.10(P<0.10),均有差异显著的趋势.2个品种间,屠宰性能和肉品质指标除色度、pH24、大理石纹、脾质量和小肠质量无显著性差异外,其他指标均差异显著(P<0.05).【结论】脂尾去除可以提高‘兰州大尾羊’的屠宰性能和改善肉品质,‘兰州大尾羊’的屠宰性能和肉品质优于‘蒙古羊’.

兰州大尾羊遗传资源保护与开发利用

作者对兰州大尾羊遗传资源现状及自然生态环境进行了系统的分析,提出了建立和完善兰州大尾羊遗传资源保护体系和可持续发展利用模式,认为兰州大尾羊遗传资源保护应在进一步调查现有遗传资源并进行系统研究的基础上,从原种数量、种群遗传结构、种群纯洁性和种质资源的合理利用与产业化开发等方面综合考虑并制定相关法律法规,建立遗传资源保护体系。

不同月龄‘兰州大尾羊’肉营养成分分析

测定了不同月龄‘兰州大尾羊’背最长肌的水分、灰分、蛋白质、粗脂肪、氨基酸及肉样中Fe、Mn、Zn、Cu、Mg和Ca的含量.结果表明:‘兰州大尾羊’肉中水分含量随着月龄的增加而降低,脂肪含量随着月龄的增加先升高后降低,其中1月龄‘兰州大尾羊’肉的水分和灰分含量最丰富,7月龄脂肪含量最高;‘兰州大尾羊’肉中氨基酸含量丰富且种类齐全,11月龄时成人必需氨基酸和婴儿必需氨基酸含量最丰富,9月龄时氨基酸总量最高;1月龄和3月龄‘兰州大尾羊’肉中的矿物质含量最丰富.

不同性别及部位的兰州大尾羊肉食用品质

对不同性别和部位的兰州大尾羊肉食用品质进行了分析测定,以相同条件的小尾寒羊肉进行对照。结果表明,兰州大尾羊羯羊和母羊、背最长肌和腿肌间的L*值、a*值、b*值、失水率、熟肉率、剪切力、大理石纹有显著性差异(p<0.05),同时兰州大尾羊肉的失水率和剪切力显著低于小尾寒羊肉(p<0.05)。在质构特性方面,兰州大尾羊肉的硬度、弹性、内聚性、粘附性和咀嚼性值在不同性别和部位间存在显著性差异(p<0.05);兰州大尾羊肉硬度和粘附性值显著低于小尾寒羊肉,内聚性值显著高于小尾寒羊肉(p<0.05)。因此,兰州大尾羊肉具有肉色好、肉质细嫩、加工特性优良等特点。

阿勒泰大尾羊与小尾寒羊不同组织FTO基因的检测

为了研究阿勒泰大尾羊和小尾寒羊不同脂肪组织及其他组织之间基因表达的差异,探讨脂肪与肥胖相关基因(fat mass and obesity associated gene,FTO)与绵羊体脂沉积的相关性。随机各选择6只6月龄雄性阿勒泰大尾羊和小尾寒羊,禁食24h后屠宰,分别采集下丘脑、海马、背最长肌、心肌和脂肪组织样本,应用冰冻组织切片技术,测定脂肪细胞的面积,用real-time PCR检测FTO基因在各组织中的表达水平。结果显示,阿勒泰大尾羊尾脂脂肪细胞面积极显著高于肾周脂脂肪细胞面积(P<0.01)。阿勒泰大尾羊与小尾寒羊下丘脑和海马FTO基因表达水平无显著差异,背最长肌、心肌FTO基因表达水平阿勒泰大尾羊的极显著高于小尾寒羊的(P<0.01),肾周脂中FTO基因表达水平阿勒泰大尾羊的显著高于小尾寒羊的(P<0.05)。阿勒泰大尾羊肾周脂、心周脂和尾脂中FTO基因表达水平在肾周脂、心周脂、尾脂之间无显著差异。结果表明,FTO基因表达水平在阿勒泰大尾羊和小尾寒羊之间存在品种间的差异。

兰州大尾羊染色体组型分析

应用血淋巴细胞微量血培养法对兰州大尾羊的核型进行研究,结果表明兰州大尾羊二倍体染色体数2n=54,由26对常染色体和1对性染色体组成(XX/XY型)。26对常染色体中有3对最大的亚中部着丝点染色体和23对端部着丝点染色体;X染色体为最大的端部着丝点染色体,Y染色体为最小的亚中部着丝点染色体。

兰州大尾羊肉挥发性风味组分研究

以小尾寒羊肉为对照,利用相对气味活度值(ROAV)对不同性别的兰州大尾羊肉的主体风味成分进行了分析。结果表明,兰州大尾羊羯羊和母羊肉分别检出了80和85种挥发性风味物质,其中醛类物质是主体风味成分,相对含量分别为31.110%和22.305%。兰州大尾羊肉的主体风味物质有癸醛、辛醛、壬醛、2-壬烯醛、2,4-壬二烯醛、反-2-癸烯醛、2,4-癸二烯醛等,其气味特征主要表现为蜡香味,脂香味,蘑菇味和黄瓜味等,羯羊肉主体风味物质比母羊肉多2种。与小尾寒羊相比,兰州大尾羊肉主体风味物质的种类和ROAV值高于小尾寒羊肉。

兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因克隆及其同源性比较

【目的】克隆兰州大尾羊心脏型肪酸结合蛋白(H-FABP)基因全长cDNA序列,为研究绵羊H-FABP生物学作用和生产应用提供理论依据。【方法】根据已知哺乳动物H-FABP基因cDNA序列,设计5'和3'特异引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列。【结果】扩增获得兰州大尾羊5'端425 bp、3'端231 bp片段和177 bp中间片段,拼接获得748 bp兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列(GenBank登录号:JQ780322)。兰州大尾羊H-FABP基因ORF长402 bp,编码133个氨基酸。核苷酸序列分析显示兰州大尾羊H-FABP基因序列与大多数哺乳动物相似,但其第66位发生的碱基转换(T←→G)引起所编码的第22位天门冬氨酸(N)不同于其它所有物种的赖氨酸(K)。构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与山羊亲缘关系最近。预测兰州大尾羊H-FABP蛋白质的空间结构与山羊和牛H-FABP类似,由2个α螺旋和10个反向平行的β折叠组成,10个折叠片围成一个桶状结构,疏水性残基位于桶内,用于结合脂肪酸。【结论】克隆了兰州大尾羊H-FABP基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

不同日龄阿勒泰大尾羊脂肪组织形态学及血脂指标的比较

为了研究阿勒泰大尾羊不同部位脂肪组织沉积的变化规律,本试验选取90和270日龄健康、雄性阿勒泰大尾羊各6只,分别采集了90和270日龄时肾周脂、尾脂、腹部皮下脂肪组织样和血清,采用冰冻脂肪组织切片油红O滴染技术和Motic显微数字图像处理系统,测定脂肪细胞面积,并采用放射性免疫技术和酶联免疫法测定了血脂指标。结果显示,90日龄时,阿勒泰大尾羊尾脂脂肪细胞面积极显著高于肾周脂脂肪细胞面积(P<0.01),270日龄时,尾脂和腹部皮下脂肪脂肪细胞面积均极显著高于肾周脂脂肪细胞面积(P<0.01),但脂肪细胞的面积在尾脂和皮下脂肪之间无显著差异(P>0.05);与90日龄相比,270日龄阿勒泰大尾羊肾周脂脂肪细胞面积显著增高(P<0.05),而尾脂脂肪细胞面积极显著降低(P<0.01);90日龄阿勒泰大尾羊血清中leptin和HSL含量极显著高于270日龄(P<0.01),而血清中AST和ALT含量极显著低于270日龄(P<0.01)。结果表明,阿勒泰大尾羊从90日龄生长至270日龄时,肾周脂脂肪细胞面积呈增加的趋势,而尾脂脂肪细胞的面积呈减少的趋势,这种变化可能与血清瘦素、激素敏感脂肪酶、天门冬氨酸氨基转氨酶和丙氨酸氨基转移酶含量有关。

蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊随机扩增多态DNA分析

从 2 4个随机引物中筛选出 5个引物 ,对蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊 3个绵羊品种共计 89个个体进行了随机扩增多态 DNA分析 ,根据扩增片段计算了蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊扩增 DNA指纹条带的平均带纹数分别为 5 .32 ,5 .2 8和 5 .78;平均带纹相似率分别为 0 .5 9,0 .6 0和 0 .6 2 ;平均杂合度分别为 0 .75 ,0 .78和 0 .77。用 Nei氏片段共享度公式计算了 3个群体的遗传距离 ,构建了其关系图 ,聚类分析结果表明 ,蒙古羊与兰州大尾羊的遗传距离最小 (0 .0 34) ,彼此亲缘关系较近。相对而言 ,兰州大尾羊与哈萨克羊的遗传距离最大(0 .10 4 ) ,彼此亲缘关系较远。

不同诱食剂对阿勒泰大尾羊麦草采食量的影响

分别选择果绿、草味剂、甜蜜素、柠檬酸和苹果酸调质的果味剂作为试验诱味剂。试验结果表明在第1期试验中甜味剂处理组、绿色剂处理组和对照组20 d每只羊平均采食麦草量分别为,653.96±35.60、587.21±26.57和600±21.31 g/d。甜味剂组分别比绿色剂处理组和对照组分别提高66.75和53.96 g,差异显著(P<0.05)。在第2期试验中草香剂处理组、果味剂处理组和对照组20 d每只羊平均麦草采食量为612.20±35.23、593.08±29.78和602.64±24.90 g/d,差异不显著(P>0.05)。在第3期试验中甜味剂和绿色剂组合诱食剂的麦草采食量为664.98±14.85 g/d,对照组的麦草采食量为631.66±14.29 g/d,差异显著(P<0.05)。说明以甜蜜素作为甜味剂诱食剂可以增加阿勒泰大尾羊的麦草采食量。

呼伦贝尔大尾羊和短尾羊食用品质的对比

通过测定相同月龄呼伦贝尔大尾羊和短尾羊不同部位肌肉的熟肉率、嫩度、色泽和pH的变化,研究呼伦贝尔大尾羊和短尾羊食用品质的差异。结果表明:呼伦贝尔短尾羊臂三头肌熟肉率显著大于呼伦贝尔大尾羊臂三头肌的熟肉率(p<0.05),大尾羊股二头肌的红度显著大于短尾羊(p<0.05),短尾羊臂三头肌的剪切力值显著小于大尾羊臂三头肌的剪切力值(p<0.05),两个品系三个部位的pH0没有显著性变化(p>0.05),大尾羊三个部位的pH24均显著大于对应部位短尾羊的pH24(p<0.05),即短尾羊臂三头肌的保水性和嫩度优于大尾羊臂三头肌。

脂尾去除对‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’生长性能及脂肪沉积分布的影响

为了研究脂尾去除对‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’生长性状及脂肪沉积分布的影响,选取发育正常、年龄、体重基本一致的兰州大尾羊和蒙古羊各18只,各随机选取9只进行断尾,‘兰州大尾羊’采用外科手术法,‘蒙古羊’采用橡圈结扎法。断尾羊为试验组,未断尾羊为对照组。屠宰后的结果显示:‘兰州大尾羊’和‘蒙古羊’试验组的采食量均低于对照组,而日增重、宰前活重和热胴体重则均是试验组比对照组高,但差异均不显著(P>0.05)。‘兰州大尾羊’对照组的尾臀部脂肪重和总脂肪重明显高于试验组,尾臀部脂肪重差异极显著(P<0.01),总脂肪重差异显著(P<0.05)。‘兰州大尾羊’其余各部位脂肪重均是对照组低于试验组。其中,皮下脂肪重和肾周脂肪重差异不显著(P>0.05);睾丸脂肪重、肠胃脂肪重和内部脂肪重呈现显著性差异(P<0.05)。‘蒙古羊’对照组的尾臀部脂肪重高于试验组,且差异性极显著(P<0.01)。皮下脂肪重、睾丸脂肪重、肾周脂肪重、肠胃脂肪重、内部脂肪重和总脂肪重在‘蒙古羊’的试验组和对照组之间没有显著性差异(P>0.05)。由分析可知,脂尾去除有提高兰州大尾羊和蒙古羊日增重及降低二者采食量的趋势;脂尾去除对‘蒙古羊’脂肪沉积分布影响不大,而‘兰州大尾羊’则有更多的脂肪沉积到了皮下、睾丸、肾周和肠胃周围,且断尾的‘兰州大尾羊’总脂肪重显著降低。

兰州大尾羊H-FABP基因荧光定量PCR检测方法的研究

通过对兰州大尾羊尾部、大网膜、肝脏、肾周脂肪组织中的总RNA提取,反转录获得总cDNA样品,结合PCR技术,建立了SYBR荧光定量PCR法检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA在不同组织中相对表达量的试验方法,并进行批内、批间重复性检验。结果表明,H-FABP和18S基因标准曲线回归方程分别为CtH-FABP=-3.24375x+38.34230和Ct18S=-3.33137x+33.4573,相关系数(r2)分别为0.9964和0.9992,扩增效率分别为103%和99%;批内、批间重复性测定的变异系数分别为小于1.8%和10%;说明该方法灵敏度高、特异性强、准确可靠、重复性好,是实时荧光定量PCR检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白基因mRNA表达量的有效方法。