HPLC测定蒙药哈布德仁-9中大戟二烯醇的含量

目的:建立蒙药哈布德仁-9中大戟二烯醇的含量测定方法。方法:采用HPLC测定制剂中大戟二烯醇的含量。色谱条件为:Acclaim^(TM)120 C_(8)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(93:7);流速为1.0 mL·min^(-1);柱温为22.6℃;检测波长为210 nm。结果:大戟二烯醇对照品在0.0875~3.50μg范围内时,进样量与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为98.19%,RSD为0.48%(n=6)。结论:建立的HPLC法操作简便、快速、灵敏度高、专属性好,为蒙药哈布德仁-9质量控制提供依据。

甘遂中大戟二烯醇HPLC定量方法的测量不确定度评定

目的:探讨甘遂中大戟二烯醇的HPLC定量分析方法的测量不确定度的评定方法。方法:通过分析测量过程,确定并简化不确定度来源;利用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的方法验证数据及样品代表性试验数据,通过统计学方法,量化不确定度分量;计算合成不确定度和扩展不确定度。结果与结论:用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的扩展不确定度为12%。本文采用的评定方法可为HPLC法含量测定结果的测量不确定度评估提供参考。

京大戟醋制前后大戟二烯醇和甘遂甾醇的变化

目的比较京大戟醋制前后大戟二烯醇和甘遂甾醇的含有量变化,为京大戟醋制减毒机理研究提供一定的参考。方法采用RP-HPLC法,以Agilent XDB C8(4.6 mm×150 mm,5μm)为固定相,流动相为乙腈-水(93∶7),体积流量为1.0 mL/min,检测波长210 nm,柱温30℃。结果大戟二烯醇和甘遂甾醇的线性范围分别为0.524 4～10.4880μg(r=0.9999)和0.2132～4.264μg(r=0.999 8),加样回收率分别为97.36%和98.72%,RSD分别为1.07%、0.77%(n=6)。大戟二烯醇和甘遂甾醇经醋制后在乙酸乙酯超声提取液中的含有量降低较多。结论京大戟经醋制后,大戟二烯醇和甘遂甾醇含有量降低,为进一步研究京大戟醋制减毒机理和质量控制提供了依据。

京大戟中大戟二烯醇的HPLC测定

目的改进京大戟饮片的质量控制标准。方法采用薄层鉴别对京大戟进行定性鉴别。建立京大戟饮片中大戟二烯醇的HPLC定量测定方法。同时对其杂质、水分、灰分、浸出物等进行测定。结果京大戟饮片薄层色谱斑点清晰,分离度好。大戟二烯醇在0.39~3.88μg范围内线性关系良好,相关系数为r2=1.000;平均回收率为99.96%,RSD为0.97%（n=6）。结论京大戟饮片建议标准为杂质不得过3.0%;水分不得过8.0%;总灰分不得过7.0%,酸不溶性灰分不得过1.5%;浸出物含量不得低于20.0%;按干燥品计算,含大戟二烯醇（C30H50O）不得少于0.60%。

HPLC法测定不同产地、生长年限、采收期的京大戟和甘遂中大戟二烯醇含量

通过对不同产地、生长年限、采收期京大戟和甘遂中大戟二烯醇的含量测定与分析,来确定京大戟和甘遂的最佳产地、生长年限及采收期。采用HPLC法测定市售京大戟和甘遂药材中大戟二烯醇的质量分数,评价市售甘遂和京大戟质量状况。试验所采集的不同产地的京大戟和甘遂共18个批次样品中有15个批次样品的大戟二烯醇含量达到了2015版《中国药典》规定的大戟二烯醇含量标准,总样品合格率为83.3%。其中江苏产的京大戟中大戟二烯醇含量最高(6.89%),广西产的大戟二烯醇含量最低(5.59%)且未达到药典规定含量;山西产的甘遂中大戟二烯醇含量最高(2.72%),陕西产的大戟二烯醇含量最低(2.11%)。2种药材中大戟二烯醇含量随着生长年限的变化而改变,其中,3年生京大戟及2年生甘遂中大戟二烯醇含量最高。京大戟在秋季采收、甘遂在春季采收时大戟二烯醇含量最高。本研究可为确定京大戟和甘遂最佳生长年限及采收期提供科学依据。

甘遂在不同配伍中大戟二烯醇的含量变化研究

目的：比较甘遂单煎、与甘草时煎及在甘遂半夏汤中群煎时大戟二烯醇的含量变化情况。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma DiamonsilC8（200mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（94：6），检测波长为210nm，室温.结果：大戟二烯醇在1．2-12μg范围内呈现良好的线性，回归方程为y=32180x＋2155．4，r=0．9991；单药、对药、群药的平均回收率分别为97．87％、97．57％、97．34％。大戟二烯醇提取量的变化规律是对药〉群药〉单药。结论：建立的方法可用于甘遂的配伍变化研究，甘遂中大戟二烯醇的提取量随着配伍发生明显变化。

大戟脂药材中四环三萜类成分大戟二烯醇、大戟醇的含量测定及提取工艺优化

目的:建立同时测定大戟脂药材中大戟二烯醇和大戟醇含量的方法,并优化其提取工艺。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8,流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以大戟二烯醇、大戟醇含量、出膏率为评价指标进行综合评分,以乙醇体积分数、提取时间、溶剂用量为考察因素,采用L9(34)正交试验优化其提取工艺并进行验证。结果:大戟二烯醇、大戟醇检测质量浓度的线性范围分别为0.0304~1.216mg/mL(r=0.9996)、0.01~0.4 mg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2%,平均加样回收率分别为100.46%(RSD=1.03%,n=6)、99.36%(RSD=0.91%,n=6)。最优提取工艺为40 mL的95%乙醇回流提取1 h。经3次试验验证结果显示,大戟二烯醇的平均含量为94.43 mg/g(RSD=0.92%,n=3),大戟醇的平均含量为25.42 mg/g(RSD=0.98%,n=3),平均出膏率为51.42%,(RSD=1.95%,n=3),平均综合评分为98.87(RSD=0.92%,n=3)。结论:所建含量测定方法简便、准确,重复性好,可用于大戟脂的质量控制;优化所得提取工艺稳定、可行。

大戟脂有效部位及大戟二烯醇抗炎镇痛作用研究

目的考察大戟脂有效部位和大戟二烯醇的抗炎镇痛作用。方法取昆明种小鼠80只,随机分为8组,分别为大戟脂有效部位大、中、小(60,30,15 mg·kg^(-1))剂量组,大戟二烯醇大、中、小(30,15,7.5 mg·kg^(-1))剂量组,0.5%CMC-Na组和吲哚美辛组(10 mg·kg^(-1)),每组10只。通过二甲苯致小鼠耳肿胀法、毛细血管通透性实验和棉球肉芽肿实验,综合观察大戟脂有效部位和大戟二烯醇的抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法和福尔马林法,评价其镇痛作用。结果大戟脂有效部位和大戟二烯醇在三种炎症模型上均显示了一定的抗炎作用,同时表现出良好的镇痛作用,其中以大戟二烯醇高剂量组效果最佳。结论大戟脂有效部位和大戟二烯醇具有显著的抗炎镇痛作用,其中大戟二烯醇发挥主要作用。

甘遂中大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量测定

目的:建立甘遂中大戟二烯醇及其同分异构体表大戟二烯醇的含量测定方法。方法:样品以乙酸乙酯为提取溶剂,超声处理后,蒸干,加甲醇溶解,以HPLC法分析。采用Agilent XDB C8(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,柱温30℃;以乙腈-水(95∶5)为流动相,流速1.0mL·min-1;检测波长210nm。结果:大戟二烯醇和表大戟二烯醇的线性范围分别为0.43～6.34μg(r=0.9999)和0.21～3.17μg(r=0.9999),平均加样回收率(n=9)分别为100.0%和102.2%。10批次甘遂中,大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量分别为0.18%～0.68%和0.12%～0.39%。结论:本方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于甘遂中大戟二烯醇及其同分异构体表大戟二烯醇的定量分析。

京大戟和甘遂炮制前后大戟二烯醇的含量比较

目的:建立有毒中药京大戟与甘遂生品、醋制品中大戟二烯醇的含量测定方法,并比较两者炮制前后的含量变化。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(98∶2),柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为210nm。结果:大戟二烯醇进样量在0.42～6.23μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998);京大戟和甘遂生品的平均加样回收率分别为99.28%和99.80%,RSD分别为1.69%和1.83%(n=9)。京大戟中大戟二烯醇的含量明显高于甘遂,且醋制不会对大戟二烯醇的含量造成显著影响。结论:本方法能准确测定京大戟和甘遂中大戟二烯醇的含量。

HPLC法测定京大戟中大戟二烯醇的含量

目的建立京大戟中大戟二烯醇的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,使用汉邦Benetnach C8（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸（83∶17）,流速为1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长为203 nm。结果大戟二烯醇进样量在0.47~2.85μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均加样回收率为99.96%（n=6）,RSD为0.97%。结论该方法能够准确测定京大戟中大戟二烯醇的含量。

京大戟中大戟二烯醇对照品的制备研究

目的：研究制备京大戟中大戟二烯醇对照品的分离方法。方法：取京大戟药材醇提浸膏的石油醚萃取部分,用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯（95∶5～70∶30,V/V）梯度洗脱,收集大戟二烯醇富集流份,以甲醇反复重结晶,通过核磁共振、质谱等波谱方法鉴定化合物结构,采用薄层鉴别、紫外鉴别、高效液相色谱和液质联用等技术进行质量分数检测。结果：从京大戟中制备分离的大戟二烯醇对照品,质量分数〉99%。结论：该方法得到的大戟二烯醇对照品符合中药新药质量标准含量测定用对照品的相关技术要求,可作为京大戟药材和含京大戟的成方制剂的质量控制及药效物质基础研究中的对照品。

透皮促进剂对芪遂逐水凝胶膏中大戟二烯醇透皮吸收的影响

目的:研究透皮促进剂对芪遂逐水凝胶膏中大戟二烯醇透皮吸收的影响,筛选最佳透皮促进剂配方。方法:运用HPLC法对池中大戟二烯醇进行含量测定,采用改良的Franz扩散池装置,对氮酮、丙二醇、油酸单独及复合应用的促透效果进行考察。结果:不加透皮促进剂的芪遂逐水膏大戟二烯醇的透皮速率为0.2374μg/cm2·h;单独使用透皮促进剂时,不同浓度的氮酮促透能力排序为3%>5%>1%,不同浓度的丙二醇促透能力排序为7.5%>10%>5%,油酸总体的促透作用较弱,其排序为10%>7.5%>5%;将单独使用透皮能力最佳的3%氮酮与7.5%丙二醇按不同比例配制成复合透皮促进剂,其促透能力排序为1∶1>1∶2>1∶3,而上述最佳配方中加入不同比例的10%油酸不能提高促透效果。结论:芪遂逐水凝胶膏透皮促进剂的优选配方是3%氮酮与7.5%丙二醇按1∶1比例制备。

HPLC-ELSD测定甘遂及其制剂控涎丸中大戟二烯醇的含量

目的:建立甘遂及其制剂控涎丸中大戟二烯醇的含量测定方法。方法:色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(99∶1),流速1.0 mL.min-1,检测器蒸发光散射检测器,柱温35℃。结果:大戟二烯醇在进样量为1.04～20.80μg(r=0.999 6),进样量的常用对数值与峰面积的常用对数值呈良好的线性关系,平均回收率97.53%,RSD 2.56%,另外对10批甘遂饮片和5批控涎丸进行了测定。结论:所建立的方法简单、准确、重复性好,可用于测定甘遂及其制剂控涎丸中大戟二烯醇的含量。

RP-HPLC法测定京大戟中大戟二烯醇的含量

目的：对京大戟中大戟二烯醇进行含量测定。方法：采用反相高效液相色谱法,使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8（150mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水（92∶8）,流速1.0mL·min-1,检测波长210nm,柱温25℃。结果：大戟二烯醇进样量在1.388~10.41μg范围内有良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率（n=6）为97.1%（RSD=1.7%）。结论：本方法能够准确测定京大戟中大戟二烯醇的含量。

正交试验优选十枣汤的提取工艺

目的优选十枣汤的提取工艺。方法以十枣汤中大戟二烯醇的含量及干膏得率的综合评分为评价指标,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取时间和提取次数对十枣汤提取工艺的影响。结果最佳提取工艺为提取2次,提取时间为1.5 h,加入10倍量水。验证试验结果显示,5份样品中大戟二烯醇的平均含量为0.99 mg/g,RSD为1.24%(n=5);平均干膏得率为44.01%,RSD为1.64%(n=5)。结论优选的提取工艺合理、可行。

生甘遂及其炮制品中2种三萜成分的含量研究

目的应用反相高效液相色谱法比较生甘遂和醋甘遂中大戟二烯醇及表大戟二烯醇的含量差异。方法样品以乙酸乙酯为提取溶剂,超声处理后,蒸干,加甲醇溶解,以HPLC法分析。采用Agilent C8色谱柱分离,柱温:30℃;以乙腈-水(95∶5)为流动相,流速:1.0mL.min-1;检测波长:210nm。结果考察了44份甘遂及其炮制品中的大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量情况。结论生甘遂及其炮制品醋甘遂中的三萜成分以大戟二烯醇及表大戟二烯醇为主,甘遂及醋甘遂中大戟二烯醇(Ⅰ)和表大戟二烯醇(Ⅱ)的含量消长变化有一定规律,二者之比(Ⅰ/Ⅱ)约为3∶1,可以只测定大戟二烯醇的含量来控制甘遂及其炮制品的质量。

醋炙对甘遂3种三萜类成分的影响及肠上皮细胞的毒性

目的研究甘遂醋炙前后3种三萜类成分(大戟二烯醇、kansenone、11-oxo-kansenonol)含有量变化及其对肠上皮细胞的毒性。方法采用HPLC法分别在210、255、270 nm测定甘遂和醋甘遂饮片中该3种成分的量。采用MTT法检测3种成分对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6细胞增殖的影响。结果醋炙后大戟二烯醇、kansenone、11-oxokansenonol含有量均降低,降低率分别为13.43%、15.15%、14.79%。对IEC-6细胞的IC50分别为71.41、15.27和14.53μmol/L。结论甘遂醋炙后3种三萜类成分含有量的降低与醋炙减毒有一定的相关性。

十枣汤凝胶膏剂处方药味提取工艺优化研究

目的优化十枣汤凝胶膏剂处方药味芫花、大戟及甘遂的提取工艺。方法采用L9(34)正交试验法,以芫花中芫花素、甘遂和大戟中大戟二烯醇含量结合得膏率作为综合评价指标,考察乙醇浓度、料液比、提取次数、提取时间4个因素对提取工艺的影响,筛选十枣汤凝胶膏剂处方药味的最佳提取工艺。结果十枣汤凝胶膏剂处方药味最佳提取工艺是:芫花、大戟及甘遂饮片,用85%乙醇为提取溶剂,按料液比1∶6,浸泡0.5 h后,回流提取2次,每次1.0 h。经工艺验证,综合评分为95.89~99.10分。结论经优化的提取工艺稳定、可行,可用于十枣汤凝胶膏剂处方药味的提取,并为后续凝胶膏剂的制备奠定了基础。

十枣汤凝胶膏剂HPLC法含量测定研究

目的研究建立十枣汤凝胶膏剂含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,分别以色谱条件Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.8%冰醋酸(65∶35),检测波长338 nm;Neptune C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(86∶14);流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm,建立测定十枣汤凝胶膏剂主成分芫花素和大戟二烯醇含量的定量分析方法。结果芫花素在0.09~1.35μg范围呈良好的线性关系,回归方程为Y_(1)=6.221×106X_(1)+2.118×10^(4)(r=0.9998),平均回收率为96.28%(RSD=0.92%),三批凝胶膏剂平均含量分别为0.0692、0.0681、0.0708 mg/g;大戟二烯醇在0.20~4.00μg范围呈良好的线性关系,回归方程为Y_(2)=9.932×10^(5)X_(2)+6.760×10^(4)(r=0.9999),平均回收率为97.69%(RSD=2.37%),三批凝胶膏剂平均含量分别为0.1260、0.1246、0.1276 mg/g。结论建立的十枣汤凝胶膏剂HPLC含量测定法精密度及准确度良好,可用于质量控制。