儿童大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体感染的影响因素分析

目的 探讨儿童大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体(MRMP)感染的相关临床指标,并分析MRMP与相关指标间的相关性。方法 选取南京医科大学附属苏州医院医院2020年1月至2023年12月收治的45例MRMP感染患儿作为病例组,另选取同期住院治疗的45例大环内酯类抗生素敏感肺炎支原体(MSMP)感染患儿作为对照组。比较两组患儿的相关临床资料,并分析影响MRMP的危险因素。结果 病例组患儿在发病季节、规律应用抗生素、伴有反复呼吸道感染史、既往新型冠状病毒感染史、长期门诊大环内酯类药物应用史以及特异性体质等方面,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,发病季节(夏秋季)、反复呼吸道感染、新型冠状病毒感染史、门诊大环内酯类药物应用史和特异性体质,属于影响患儿MRMP发生的危险因素(P<0.05)。结论 发病季节、反复呼吸道感染、新型冠状病毒感染史、门诊大环内酯类药物应用史和特异性体质属于影响患儿MRMP发生的独立危险因素,临床应针对上述因素及时调整抗生素使用方案以缩短MRMP的病程。

肺炎支原体肺炎患儿肺炎支原体基因分型及对大环内酯类抗生素耐药基因突变的分析

目的分析社区获得性肺炎(CAP)患儿肺炎支原体(MP)感染发生与基因分型以及大环内酯类耐药基因突变分型的流行病学特征,为儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的防治提供依据。方法检测佛山市三水区妇幼保健院2018年1月至2021年12月住院的620例CAP患儿MP感染情况,对MP阳性者行P1限制性片段长度多态性分析(P1-RFLP),分析阳性者及P1Ⅰ型、P1Ⅱ型在不同年份、性别、年龄、季节中分布的差异。检测MP对大环内酯类药物耐药基因突变情况,分析23SrRNA结构域A2063G、A2064G突变在不同年份、性别、年龄、季节中分布的差异。结果620例CAP患儿中,198例MP阳性,感染率为31.94%。2018至2021年各年MP阳性率差异不大。女性感染率高于男性。MP感染率随年龄增长逐渐升高,以学龄前期、学龄期感染率最高。夏秋季感染率明显高于春冬季。198例患儿中,P1-RFLP分型P1-Ⅰ型157例(79.29%),P1-Ⅱ型41例(20.71%)。Ⅰ型、Ⅱ型在不同年份、性别、年龄、季节中分布差异不大。对其中143例患儿行大环内酯类药物耐药检测,其中125例出现耐药,总体耐药率为87.41%。125例耐药基因突变患儿中,A2063G突变66例(52.80%),A2064G突变53例(42.40%)。耐药基因突变率及两型突变位点在不同年份、性别、年龄、季节之间分布差异不大。结论本院儿童CAP中MP感染率为31.94%,以女性较为常见,以学龄前期、学龄期感染率最高,夏秋季为高发季节。P1-RFLP分型不受年度、性别、年龄、季节的影响。儿童MP耐药基因突变率居高不降,耐药基因突变分型不受年度、性别、年龄、季节的影响。

牛、羊源大肠杆菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性及其耐药基因检测

为研究陕西榆林地区牛、羊源大肠杆菌的流行特点及其对氨基糖苷类抗生素的耐药情况,采集746份牛、羊粪便样本进行细菌分离纯化和大肠杆菌特异性引物phoA PCR鉴定,并对鉴定得到的大肠杆菌进行氨基糖苷类抗生素耐药性试验,对5种钝化酶基因AadA1、AbdB、Aph(3′)-Ⅰ、Aac(6′)-Ⅰb、Aac(3′)-Ⅱ进行PCR检测和同源性序列分析。结果显示,榆林地区大肠杆菌总检出率为42.49%;牛、羊源大肠杆菌对6种氨基糖苷类药物的耐药率从高到低依次为链霉素(70.7%)、卡那霉素(64.3%)、阿米卡星(47.9%)、庆大霉素(45.1%)、新霉素(39.4%)和妥布霉素(30.3%);多重耐药率(耐3种及3种以上药物)为67.0%;耐药基因AadA1和Aph(3′)-Ⅰ的检出率分别为79.5%和83.0%。综上表明,榆林地区检出的牛、羊大肠杆菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性比较强,耐药基因以AadA1、Aph(3′)-Ⅰ为主。

肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药机制的研究进展

大环内酯类抗生素是治疗儿童肺炎支原体(MP)感染的一线药物,但随着此类药物在临床中的广泛使用,对大环内酯类抗生素耐药的MP菌株检出率迅速增高。耐药机制相关研究中,对药物作用靶点的研究最多见,其中23S rRNA基因突变相关研究尤为广泛和深入。耐药性会影响药物治疗效果,探讨菌株对药物的耐药机制并合理调整药物治疗方案,可获得更好的治疗效果,现将大环内酯类抗生素的作用机制和MP对大环内酯类抗生素的耐药机制综述如下。

儿童大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体感染相关临床指标的多因素分析

目的探讨儿童大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体感染与其相关临床指标之间的相关性。方法选取2019年9月至2023年1月在安徽医科大学合肥第三临床学院(合肥市第三人民医院)儿科住院的肺炎支原体肺炎患儿210例作为研究对象。根据是否发生大环内酯类抗生素耐药分为大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体(macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae,MRMP)组45例和大环内酯类抗生素敏感肺炎支原体(macrolide-susceptible Mycoplasma pneumoniae,MSMP)组165例。分析两组患儿的年龄、性别、大环内酯类抗生素使用前的发热天数、总发热天数、白细胞计数、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、血红蛋白、血小板计数、C反应蛋白、影像学表现、大环内酯反应不良等临床指标。采用多因素logistic回归分析影响MRMP发生的因素。结果单因素分析显示,总发热天数(P=0.000)、血红蛋白(P=0.036)、中性粒细胞百分比(P=0.011)及大环内酯反应不良(P=0.000)与MRMP感染有关,而年龄、性别、大环内酯类抗生素使用前的发热天数、白细胞计数、淋巴细胞百分比、血小板计数、C反应蛋白及影像学表现等指标两组之间比较差异无显著性(P>0.05)。多因素logistic回归分析显示,总发热天数(OR=0.115,95%CI0.043~0.313,P=0.000)及大环内酯反应不良(OR=0.176,95%CI0.075~0.412,P=0.000)是儿童MRMP肺炎的独立危险因素。结论总发热天数和大环内酯反应不良与儿童MRMP肺炎的发生独立相关,是临床上鉴别MRMP肺炎的重要指标。

雏鸭腹泻大肠埃希菌耐药性和氨基糖苷类抗生素耐药基因检测与分析

目的 研究雏鸭腹泻大肠埃希菌的耐药性和氨基糖苷类抗生素耐药基因的存在情况。方法 采取山东济宁某养鸭场腹泻雏鸭粪便病料,通过实验室分离培养,对雏鸭腹泻大肠埃希菌进行药敏试验,比较雏鸭腹泻大肠埃希菌分离株对抗菌药物的敏感性,并采用PCR法对氨基糖苷类抗生素耐药菌株进行氨基糖苷类抗生素耐药基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、aac(6’)-Ⅱ、ant(3”)-Ⅰ和aph(3’)-Ⅱ的检测。结果 在24种药物敏感性试验中,雏鸭腹泻大肠埃希菌对头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟和阿米卡星4种药物敏感,对氧氟沙星、头孢曲松、头孢噻肟和大观霉素4种药物中度敏感;对青霉素、链霉素、庆大霉素和四环素等16种药物耐药。在20株菌株中,检测的氨基糖苷类抗生素耐药基因中5株细菌检测出aac(3)-Ⅰ,10株细菌检测出aac(3)-Ⅱ,5株细菌检测出aac(6’)-Ⅰb,6株细菌检测出aac(6’)-Ⅱ,8株细菌检测出ant(3”)-Ⅰ,17株细菌检测出aph(3’)-Ⅱ。结论此次试验分离培养出的雏鸭腹泻大肠埃希菌呈现普遍耐药性,普遍检测出氨基糖苷类抗生素耐药基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ⅰb、aac(6’)-Ⅱ、ant(3”)-Ⅰ和aph(3’)-Ⅱ,其中aph(3’)-Ⅱ检出率高达85%。

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况及耐药基因研究

目的调查上海地区肺炎链球菌对红霉素的敏感度,研究肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法对中山医院57株临床分离肺炎链球菌进行红霉素药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)技术对上海4所医院中分离的53株红霉素耐药肺炎链球菌检测耐药基因(ermB,mefA,mefE)。结果57株肺炎链球菌中12株(21.0%)敏感,3株(5.3%)中介,42株(73.7%)耐药。53株红霉素耐药肺炎链球菌中,ermB基因、mefE基因、mefA基因分别在51株(96.2%)、22株(41.5%)和1株(1.9%)中检测到。其中21株(39.6%)同时检测到ermB基因和mefE基因,1株(1.9%)同时检测到ermB基因和mefA基因,1株(1.9%)未检测到ermB基因、mefE基因或mefA基因。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药率较高。ErmB介导的靶位改变是最常见的耐药机制,mef(特别是mefE)介导外排机制引起者也较常见。

某院儿童肺炎支原体感染情况及23S rRNA基因位点突变与抗生素耐药的相关关系

目的分析某院儿童肺炎支原体感染情况及23S rRNA基因位点突变与抗生素耐药的相关性。方法选取2021年2月至2023年1月在浙江省长兴县中医院就诊的100例疑似肺炎支原体感染患儿,对比不同性别、年龄儿童肺炎支原体的感染情况。根据基因检测结果,将患儿分为突变组和非突变组,并对比2组患儿的临床资料,采用多因素Logistic回归分析影响耐药突变的相关因素。结果100例疑似肺炎支原体感染患儿中,92例(92.0%)PCR检测结果为阳性;其中23S rRNA基因位点突变36例(39.1%),未突变56例(60.9%)。女性患儿的肺炎支原体阳性率(93.2%)稍高于男性(91.1%),且23S rRNA基因位点突变率(41.5%)稍高于男性(37.2%),但差异无统计学意义(P>0.05)。>3岁患儿的肺炎支原体阳性率(96.8%)高于1~3岁患儿(83.8%),且23S rRNA基因位点突变率(47.5%)高于1~3岁患儿(22.6%)(P<0.05)。突变组和未突变组患儿的白细胞计数、嗜中性粒细胞百分比、降钙素原、红细胞沉降率、发热持续时间、咳嗽持续时间、住院时间、本次病程大环内酯类药物应用时间、本次病程肺炎支原体-DNA载量等相比,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,本次病程肺炎支原体-DNA载量与耐药突变相关(P<0.05)。结论肺炎支原体23S rRNA基因位点突变风险随着肺炎支原体肺炎患儿年龄的增加而逐渐升高。此外,本次病程肺炎支原体-DNA载量与V区A2063G和A2064G耐药突变相关。

反向斑点杂交法检测肺炎支原体耐大环内酯类抗生素耐药基因

目的:建立反向斑点杂交法快速检测肺炎支原体(MP)耐大环内酯类抗生素耐药基因。方法:根据MP 23SrRNAⅤ区域常见的耐药突变位点设计检测探针,将其分别点样在尼龙膜上制备成反向斑点杂交平台。以该区域序列已知的菌株和标准均株来扩增靶基因,扩增过程中掺入地高辛标记的dNTPs。扩增产物与尼龙膜上点样阵列杂交后,用地高辛检测试剂盒来检测,根据显色结果来判定相应位点突变情况。结果:斑点杂交法检测了24株临床菌株,结果显示A2063G或A2064G突变,与序列测定结果完全相同,同时未检测到A2063C和C2617G突变。结论:应用本方法可以快速、准确地预测MP对常见大环内酯类抗生素的耐药情况。

肺炎链球菌对β-内酰胺类及大环内酯类抗生素耐药基因的研究进展

近年来，肺炎链球菌对β-内酰胺类及大环内酯类抗生素的耐药率在逐渐上升，目前关于其耐药基因的研究已引起广泛关注，现就肺炎链球菌对β-内酰胺类及大环内酯类抗生素耐药基因的研究进展作一综述。

突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性研究

目的应用突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性。方法采用微量稀释法检测5种常用大环内酯类抗生素对40株Mp临床分离株的药物敏感性;建立高保真聚合酶和3′硫化修饰引物的分子开关,用分子开关进行Mp临床分离株的PCR扩增,检测其是否存在Mp 23SrRNA 2063、2064和2617 3个热点突变,并通过基因测序进一步确定是否存在点突变,分析点突变与大环内酯类抗生素敏感性之间的关系。结果 5种大环内酯类抗生素中,Mp对14元环的红霉素和克拉霉素耐药程度最高,其MIC≥128mg/L;对15元环的大环内酯类抗生素阿奇霉素和交沙霉素相对敏感,其中交沙霉素抗Mp活性最高,其MIC≤4mg/L。用高保真聚合酶和3′硫化修饰引物的分子开关行PCR扩增,检测出35株发生了2063位点基因突变,3株发生2064位点基因突变,未检测出2617位点突变。用基因测序检测到35株Mp发生A2063G的突变,3株发生A2064G的突变,未检测到2617位点突变,与分子开关的检测结果一致,并且2063、2064位点突变Mp株均对大环内酯类药物高度耐药。结论分子开关可识别23SrRNA基因突变,可用于分析Mp对大环内酯类抗生素的敏感性。

猪链球菌对大环内酯类抗生素的耐药性及耐药表型

采用琼脂两倍稀释法和改良的双纸片法 ,测定了兽医临床分离的 4 0株猪链球菌对部分大环内酯类抗生素、克林霉素、林可霉素、青霉素的体外最小浓度及红霉素耐药菌的耐药表型。实验结果显示 ,猪链球菌对红霉素、罗红霉素、泰乐菌素及替米考星的耐药率分别达 72 5 % (2 9/ 4 0 )、 6 7 5 % (2 7/ 4 0 )、 72 5 % (2 9/ 4 0 )和 6 2 5 % (2 5 / 4 0 ) ,对林可霉素和克林霉素的耐药率高达 6 5 % (2 6 / 4 0 )和 6 2 5 % (2 5 / 4 0 ) ,对青霉素耐药率为 4 0 % (16 / 4 0 ) ;青霉素耐药菌株对其他药物的交叉耐药率显著地高于青霉素敏感株 (P <0 0 5 )。在红霉素耐药菌株中 ,以内在型耐药表型为主 ,占 5 8 6 % (17/2 9) ,诱导型及M型耐药表型各占 2 4 1% (7/ 2 9)和 17 2 % (5 / 2 9) ,而 4 0 % (2 / 5 )的M型耐药菌、 5 8 8% (10 / 17)的内在型耐药菌及 5 7 1% (4/ 7)的诱导型耐药菌同时对青霉素耐药。

肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性调查及对大环内酯类抗生素耐药机制研究

目的 :调查成都地区肺炎链球菌对抗菌药物的敏感性 ,研究成都地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法 :收集 2 0 0 1年 9月— 2 0 0 2年 9月成都地区临床分离的肺炎链球菌 ,测定其对 13种抗菌药物的耐药性及对大环内酯类抗生素的耐药表型 ;用聚合酶链反应 (PCR)扩增耐药基因ermB和mefA ,并对ermB和mefA进行基因序列分析。 结果 :82株肺炎链球菌中 13株对青霉素低度耐药 (占 15 .9% ) ,肺炎链球菌对大环内酯类抗生素和克林霉素表现出较高的耐药率 ,对红霉素和克林霉素耐药率分别为 80 .5 % (6 6 / 82 )和 6 8.3% (5 6 / 82 )。耐大环内酯类肺炎链球菌中 ,96 .4 %菌株表现为内在型耐药。标准菌株ATCC4 96 19及 16株红霉素敏感菌株均未检测到ermB基因及mefA基因 ;ermB基因和mefA基因分别在 6 2和 11株耐红霉素肺炎链球菌中检测到 ,其中 7株菌同时检测到ermB基因和mefA基因。所测ermB和mefA基因序列与基因库收录序列高度一致。结论 :成都地区临床分离的肺炎链球菌对青霉素耐药率较低 ,但对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药却非常普遍。ermB基因介导的靶位改变是成都地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的主要耐药机制。

纤维结合蛋白基因在儿科A族β溶血性链球菌的分布及与大环内酯类抗生素耐药的关系

目的研究纤维结合蛋白基因在我国儿科A族β溶血性链球菌(GAS)中的分布及与大环内酯类耐药之间的关系。方法收集3所儿童医院191株病原菌株,48株健康携带株,采用琼脂稀释法测定5种大环内酯类抗生素的MIC值,确定其药物敏感性;PCR扩增及测序对菌株进行emm分型;PCR检测纤维结合蛋白基因prtF1、prtF2和大环内酯类抗生素耐药基因ermB、ermTR和mefA。结果分离株的ermB阳性的有186株,ermTR阳性的有11株,prtF1、prtF2及两者同为阳性的菌株携带率分别为67.36%、66.11%和59.00%,prtF1在病原菌株和健康携带株中没有差别,prtF2在健康分离株携带率高于病原菌株,prtF1、prtF2两者集中在emm12,emm22型菌株中阳性率高,而在emm1、emm4型中很少存在。prtF1和prtF2同时阳性在ermB阳性大环内酯类抗生素耐药菌株中更为常见。结论在我国儿科GAS分离株中,以共同携带prtF1/prtF2基因的emm12型菌株为主,多存在于健康儿童中,这可能是造成我国的GAS感染耐药水平高,而侵袭性不高的原因之一。

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的研究进展

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况不断加重,所以对所有大环内酯类抗生素耐药及临床疗效的持续监测非常重要。不同国家地区对大环内酯类抗生素的耐药率和耐药机制上存在差异,提示我国在制定指南、选择抗生素和应用疫苗时不能照搬国外。目前为止,单一大环内酯类抗生素仍是治疗门诊患者和没有耐药危险因素的住院患者的替代药物。对菌血症和更严重的住院患者的感染,怀疑和证实有耐大环内酯类抗生素肺炎链球菌感染者需要小心,推荐β-内酰胺类与大环内酯类或喹诺酮类药物联合应用。此外,新型抗生素(如酮内酯类抗生素)的开发,以及根据当地血清型流行情况合理应用疫苗,也可以达到防治大环内酯类抗生素耐药肺炎链球菌(MRSP)感染的目的。

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的研究进展

肺炎链球菌是社区获得性肺炎(community Acquired pneumonia,CAP)的重要病原。由于大环内酯类抗生素对常见社区获得性呼吸道感染的病原体普遍有效,毒性低,过敏反应少,被广泛用于治疗CAP和其他呼吸道感染,随着肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况的不断加重,目前对所有大环内酯类抗生素耐药及临床疗效的持续监测非常重要。