大理百合的离体快繁研究

以大理百合的鳞片为外植体进行离体培养，获得再生植株，并初步建立起快速繁殖体系．结果表明：大理百合鳞片适宜诱导芽和愈伤组织的培养基MS＋0．5mg／LBA＋0．1～0．5mg／LNAA＋3％蔗糖；增殖培养基为MS＋0．5mg／LBA＋0．05～0．1mg／LNAA＋4．5％蔗糖；生根结鳞茎培养基为1／4MS＋0．01mg／LNAA＋6％蔗糖＋10mg／LCCC．

大理百合组织培养和快速繁殖

以大理百合的鳞片切块为外植体,置于不同激素配比的培养基中培养,结果表明,诱导不定芽的培养基为MS+BA1.0mg/L+GA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,不定芽增殖的最佳培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导不定芽结小鳞茎的培养基为MS+NAA1.0mg/L。

大理百合中多糖的提取与总糖含量的测定

目的提取大理百合中的多糖并对其总糖含量进行测定。方法水提醇沉法提取多糖,Sevag法(用氯仿和正丁醇按5∶1的比例进行萃取,以除去蛋白质)除蛋白质,硫酸-苯酚比色法测总糖含量。结果大理百合粗多糖含量为82.9%。结论实验表明百合多糖得率较高,本实验结果对开发利用大理地区百合资源具有一定意义。

大理百合多糖的醇沉分离工艺及脱蛋白方法

筛选出最佳的大理百合多糖的醇沉分离工艺及脱蛋白方法;比较在不同提取液浓缩比和乙醇加量条件下的多糖沉淀率,筛选出最佳的提取液浓缩比和乙醇加量。从蛋白质清除率和多糖损失率两方面对Sevag法和三氯醋酸法进行比较。对大理百合多糖,提取液∶浓缩液=3∶1(体积比),乙醇加量为4倍体积的浓缩液,Sevag法去除蛋白质为最佳醇沉工艺和脱蛋白方法。

正交试验优选大理百合多糖提取的工艺

对热水法提取大理百合多糖的工艺进行优化;采用了L(934)正交试验对提取温度、提取时间、固液比和提取次数等工艺参数进行优选;影响大理百合多糖热水提取的主要因素是提取温度,其次是料液比,再次是浸提次数和提取时间;热水法提取大理百合多糖的优化提取条件为:温度60℃,固液比1∶8(v/v),浸提时间7h,浸提次数2次。

大理百合的组织培养研究

采用离体组织培养的方法对大理百合的快速繁殖进行了研究,结果表明:以大理百合的鳞片为外植体进行离体培养,可获得再生植株,并初步建立了其快速繁殖体系。由试验结果可知,适宜大理百合鳞片诱导不定芽和愈伤组织的培养基为MS + 2.0 mg/L6-BA + 0.5 mg/L NAA + 3%蔗糖;而MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA + 3%蔗糖更有利于不定芽的诱导;不定芽增殖的培养基以MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA + 3%蔗糖效果较好;不定芽形成小鳞茎的培养基以MS + 1.0 mg/LNAA + 3%蔗糖效果较好;小鳞茎膨大的培养基以1/2MS + 0.3 mg/L NAA + 0.1 mg/L IBA + 12%蔗糖效果较好。

大理产百合多糖的含量测定

采用苯酚-硫酸比色法测定大理地区百合提取物中多糖的含量,测定结果,百合多糖的含量为14.47%。