RNAi阻断NPM-ALK基因表达及对大细胞间变性淋巴瘤细胞的影响(英文)

目的应用RNA干扰技术抑制大细胞间变性淋巴瘤细胞系(Karpas299)中NPMALK融合基因表达,观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法针对NPMALK融合位点设计两个siRNA序列siRNAI与siRNAII,经PCR反应构建含U6启动子siRNA正义和反义线性表达载体,通过脂质体转染Karpas299细胞,应用实时荧光定量RTPCR、Westernblot检测siRNA片段对NPMALKmRNA和蛋白表达的抑制作用,MTT、Hoechst荧光染色检测siRNA对肿瘤细胞生长的影响。结果siRNAI可导致NPMALKmRNA下降约75%(P<0.05),转染72h后可导致蛋白表达下降;转染siRNAII细胞NPMALKmRNA下降为35%(P<0.05),但蛋白水平无明显改变。转染siRNAI的细胞可抑制Karpas299细胞的增殖和诱导凋亡发生,siRNAII则无明显的抑制增殖和诱导凋亡作用。结论含有针对NPMALK融合位点特异siRNA序列的U6表达载体,可特异地抑制NPMALK基因mRNA和蛋白的表达,并能抑制大细胞间变性淋巴瘤肿瘤细胞株Karpas299细胞的增殖,导致肿瘤细胞凋亡增加,提示NPMALK融合基因的异常表达与大细胞间变性淋巴瘤形成密切相关,为研究NPMALK基因功能和大细胞间变性淋巴瘤基因靶向治疗提供了新策略。

大细胞间变性淋巴瘤中间变性淋巴瘤激酶基因异常研究进展

间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因异常存在于半数以上的大细胞间变性淋巴瘤(ALCL)患者中,其编码的融合蛋白具有酪氨酸激酶活性,ALK蛋白的异常激活被认为与ALCL的发生有关。对ALK基因及其信号转导通路的研究有利于阐明肿瘤的分子病理机制,并为ALCL的治疗提供新的靶点,成为目前研究的热点之一。

貌似结核性脑膜炎的系统型ALK阴性间变性大细胞淋巴瘤临床分析

目的报道1例首发症状表现为脑膜炎的系统型间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的诊治经过,以加深对该类疾病的认识。方法分析1例表现为发热、头痛、颅压升高,曾疑诊为结核性脑膜炎的系统型淋巴瘤激酶(ALK)阴性系统型ALCL患者的临床表现与诊治经过。结果本例患者38岁男性,以头痛、持续颅内压升高为突出表现,同时伴有发热、体质量下降、淋巴结增大等全身症状、脑脊液白细胞数量和蛋白含量增高、葡萄糖下降,给予抗病毒、抗结核治疗后病情仍反复,最终通过颈部淋巴结活检,诊断为系统型ALK阴性ALCL。结论系统型ALK阴性ALCL以脑部病变为首发症状者误诊率高,对于不符合常见神经系统疾病病程和转归特点,伴有发热、体质量下降、淋巴结肿大者,应考虑到淋巴瘤可能,积极行病理检查,争取早期诊断,改善患者预后。

夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas 299生物学特性的影响

目的:研究夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas 299的影响。方法:体外培养Karpas 299细胞,采用CCK8方法计算各治疗组对Karpas 299细胞增殖的作用,并在显微镜下观察细胞的形态学变化。通过流式细胞学技术,检测各治疗组对细胞凋亡的作用。采用蛋白质印迹法检测各治疗组作用细胞后凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl2关联X蛋白(Bcl2 associated X protein,Bax)的表达变化。结果:夏枯草提取物能够抑制Karpas 299细胞增殖,与药物浓度和作用时间呈正相关,作用48 h的半抑制浓度IC50最低,为(33.2±1.8)mg/L;夏枯草提取物和长春新碱作用Karpas 299细胞后,会促进细胞凋亡;凋亡蛋白Bcl-2表达有所降低、凋亡蛋白Bax表达有所升高。结论:夏枯草提取物可能通过促进细胞凋亡来抑制Karpas 299细胞的增殖,治疗间变性大细胞淋巴瘤。

原发性骨髓纤维化合并ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤1例及文献复习

原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis, PMF)其特征是造血干/祖细胞来源的克隆性骨髓增殖,是一种弥漫性骨髓纤维组织增生性疾病。临床症状多样化,常包括体质性症状(发热、乏力、骨痛及盗汗等)、贫血及脾大、髓外造血等。好发于中老年人,发病率约为0.3~0.6/10万[1]。

原发系统型间变性大细胞淋巴瘤中TOP2A基因及蛋白表达的研究

目的研究原发系统型间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)中TOP2A基因改变与TOP2A蛋白的表达,并阐述其临床病理学意义。方法收集58例ALCL患者蜡块,运用免疫组化技术及免疫荧光原位杂交(FISH)技术分别检测TOP2A蛋白表达及TOP2A基因拷贝数的变化,并做相关统计。结果TOP2A蛋白阳性表达者约70%(41/58例),TOP2A基因扩增者约50%(26/50例)。TOP2A蛋白表达及TOP2A基因扩增同临床分期Ⅲ~Ⅳ、IPI评分高危组及Ki-67增殖指数较高组成正相关(P<0.05)。结论TOP2A与ALCL的发生、发展及肿瘤的增殖密切相关,TOP2A蛋白阳性表达及TOP2A基因扩增的患者生存时间反而较长。

系统性ALK阴性间变性大细胞淋巴瘤的病理诊断

目的探讨系统性ALK阴性间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)的临床病理特点、分子特征、治疗和预后。方法回顾性分析18例系统性ALK^(-)ALCL的临床病理特征、免疫表型特点,行HE、免疫组化染色、FISH和NGS检测,并复习相关文献。结果系统性ALK^(-)ALCL好发于老年男性,常位于进展期,以淋巴结病变为主,结外原发部位包括原发胰腺、原发胸椎;形态学显示17例呈普通型,1例呈“霍奇金样”型。免疫表型:肿瘤细胞中CD30均弥漫强阳性(>75%),CD2(16/17)、CD3(13/18)、CD5(4/18)、CD7(8/18)、CD4(14/18)、TIA-1(16/18)、CD8(2/16)、GATA-3(10/12)、EMA(3/5)、MUM1(12/12)、CD43(6/6)和CD56(2/8)不同程度阳性,Ki67增殖指数30%~90%,PD-L1(22C3)(TPS=0~100%),ALK、CD15、CD79α和CD20均阴性;FISH检测:5例TP63缺失,2例DUSP22缺失。NGS检测:16例发生基因突变,基因突变频率0~11个,平均4.2个基因突变;伴TP63重排的ALK^(-)ALCL更易发生于女性,多发于淋巴结,临床分期晚,易伴p53基因异常。结论伴TP63重排的系统性ALK^(-)ALCL与诸多不良因素相关,临床过程多呈侵袭性,预后不佳。

间变性大细胞淋巴瘤患儿EEF1G/ALK 融合基因的鉴定与检测

目的明确1例伴少见ALK融合基因的间变性大细胞淋巴瘤患儿的分子诊断,建立该融合基因的实时荧光定量PCR检测方法。方法采用基于锚定多重PCR的二代测序技术,鉴定患儿腹股沟肿大淋巴结组织中ALK基因的伙伴基因。建立EEF1G/ALK融合基因实时荧光定量PCR方法,并对方法的重复性、灵敏度和特异性进行性能评价。在此基础上检测此患儿肿瘤组织、骨髓、外周血和脑脊液EEF1G/ALK融合基因的表达。结果经二代测序鉴定该患儿肿瘤细胞EEF1G/ALK融合基因阳性,Sanger测序验证为EEF1G Exon 6和ALK Exon 20的融合。建立的实时荧光定量PCR方法最低定量限为40拷贝/体系;弱阳性标本和强阳性标本的批内精密度CV分别为0.52%和0.17%;批间精密度CV分别为1.32%和1.14%,重复性好;检测其他ALK融合阳性标本结果为阴性,特异性好。复发时送检的淋巴结穿刺组织和外周血的融合基因定量检测结果为138.92%和0.0039%,其余检测为阴性。结论明确此例间变性大细胞淋巴瘤为少见EEF1G/ALK融合基因阳性。建立的EEF1G/ALK融合基因定量检测方法特异性、重复性好,灵敏度高,完全满足融合基因MRD监测的需要。

间变性淋巴瘤激酶阴性系统性间变性大细胞淋巴瘤穿刺活检病理诊断分析

目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阴性系统性间变性大细胞淋巴瘤(ALK阴性SALCL)穿刺针活检标本的病理诊断和鉴别诊断。方法收集南阳市中心医院2019年1月至2022年1月经穿刺活检标本确诊为ALK阴性SALCL4例,对其中临床病理资料完整的2例进行分析并行文献复习。结果病例1,女性,69岁,首发为左颈部淋巴结肿大;病例2,男性,72岁,双腹股沟淋巴结肿大。2例高倍镜下可见标志性肿瘤细胞,细胞质丰富淡染,核包括肾形、马蹄形等多种形态。病例1细胞具有显著多形性;病例2低倍镜下见单行性瘤细胞呈片巢状黏附性生长,形态似尿路上皮癌。免疫组化染色2例均LCA(阳性),CD30(阳性),ALK(阴性),CK(阴性),CD20(阴性),PAX5(阴性),CD45RO(阴性).经分子检测,2例TCR克隆性基因重排(阳性),病例1检测到TP63基因重排,病例2有DUSP22-IRF4基因重排。结论ALK阴性SALCL临床少见,穿刺活检易误诊为低分化癌等多种低分化恶性肿瘤,熟悉其临床病理特点并识别出标志性肿瘤细胞,合理选择免疫组化抗体是确诊该肿瘤的关键。

乳腺原发性ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤1例

患者女性,59岁。2020年6月体检发现乳腺肿物,超声示:右侧乳腺外上象限见一大小1.2 cm×0.9 cm×0.8 cm的极低回声结节,边界尚清,内见血流信号(BI-RADS 4A类),腋下未见肿大淋巴结。患者未重视,2021年4月自觉乳腺肿物增大,鸡蛋大小,且腋下见一鹌鹑蛋大小结节,并出现腋下疼痛、憋胀,放射至右上肢,遂行乳腺及腋下淋巴结穿刺活检。病理诊断:(右侧乳腺及腋下淋巴结穿刺组织)ALK阳性的间变性大细胞淋巴瘤。

淋巴瘤患者行干细胞移植联合CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗的护理

目的 总结6例复发/难治性CD30阳性淋巴瘤患者进行自体干细胞移植联合抗CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗的护理经验。方法 对6例复发/难治性CD30阳性淋巴瘤患者,完善治疗前的护理评估,重点落实预处理毒性、细胞因子释放综合征以及植入综合征的护理,并将心理支持及健康教育纳入整个治疗过程。结果 6例患者均成功植入造血干细胞,外周血中检测到持续性CAR30转基因,其中5例完全缓解,1例部分缓解。5例出现细胞因子释放综合征,均为Ⅰ级,未观察到神经毒性。随访20.4(12.1,34.4)个月,患者均存活并保持其反应性。结论 自体干细胞移植联合抗CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗具有良好的耐受性和高度活性,护理在治疗各阶段以及毒副反应管理中发挥重要作用。

裸细胞型ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤1例并文献复习

回顾性分析陕西省人民医院收治的1例胸壁裸细胞型淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)阳性间变性大细胞淋巴瘤的临床病理特点并进行文献复习。该患者为51岁女性,因40 d前发现胸壁包块入院。超声示:左侧胸壁肌层内囊实性包块,大小约为8 cm×6 cm×3 cm;腹腔及后腹膜多发异常增大淋巴结,腹腔积液。行胸壁包块穿刺活体组织检查,小条穿刺组织镜下所见:纤维组织内有弥漫性小圆细胞浸润,细胞质嗜酸性,核呈圆形或卵圆形,部分核偏位,呈“马蹄形”。免疫组织化学染色示:细胞角蛋白、CD2、CD3、CD5、CD7、CD20、CD38、CD138、CD56及细胞周期蛋白D1均为阴性,ALK和CD30均为强阳性。T细胞抗原受体基因重排阳性。病理诊断为裸细胞型ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤。该肿瘤非常罕见,其诊断需结合临床表现、组织学形态、免疫表型及分子遗传学改变进行综合判断,避免误诊。

维布妥昔单抗(cd30)治疗难治性ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤移植后并发VOD 1例

1临床资料患者,男,29岁,汉族,因“发现双侧颈部包块,伴皮肤瘙痒、盗汗3^(+)月”于2021年10月20日入院。入院前就诊于外院甲乳外科,行左侧颈部包块活检,考虑结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型;免疫组化:CD5(-),CD20(散在、+),AE1/AE3(-),Ki67(+、80%),CD8(弥漫、+),TIA-1(-),CD4(-),CD7(+),CD79a(散在、+),Pax-5(散在、+),EBV(-),CD3(-),CD79a(散在、+)。

ALK阴性系统型间变性大细胞淋巴瘤1例

报道1例临床罕见的ALK阴性系统型间变性大细胞淋巴瘤。患者男,79岁,因“全身皮肤丘疹、结节1月”,于2023年2月就诊于我科。皮肤科情况:头顶部、胸腹部、背部、四肢可见大量红色丘疹、结节,大小不等,部分丘疹可相互融合,最大直径4 cm,质地坚实,表面光滑,境界清楚,个别结节顶部破溃、结痂,基底红润。组织病理:(腹部皮损)真皮内可见大量多形肿瘤细胞与淋巴细胞增生,肿瘤细胞体积大,核大深染,异型性明显,可见病理性核分裂像及吞噬现象,未见亲表皮现象。(左腹股沟淋巴结)原有淋巴结结构破坏,肿瘤细胞大片状浸润,肿瘤细胞较腹部皮损处更大,胞质丰富,核大偏位,可见肾形、马蹄形,病理性核分裂及吞噬现象更多及明显,肿瘤细胞间夹杂散在少量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞。免疫组化:CD30(>95%+),CD2、CD3、CD4阳性,CD5(部分+),CD8(少数+),ALK、CD20、EMA、TIA-1、Gr-B、CD56、CD7、TdT阴性,Ki67(约90%+)。原位杂交:EBER(-)。诊断:ALK阴性系统型间变性大细胞淋巴瘤Ⅳ期A组。治疗:予CHOP方案分段治疗。

原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤13例临床病理分析

目的探讨原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的临床病理形态特征、免疫组化及预后特点。方法对13例原发性皮肤ALCL进行形态学观察,免疫组化标记及随访,并结合相关文献进行讨论。结果 13例原发性皮肤ALCL中,男女之比为1.6∶1,平均年龄47岁。临床表现为皮肤斑块、结节、肿块;组织学形态多样;免疫组化示CD30均(+),大多数CD3和/或CD43(+),部分EMA、GranB和perforin(+),ALK、CKpan、CD20、CD79a、HMB45、CD68、CD15和CD117(-)。13例均经外科手术切除局部病变,再辅助以化疗和∕或放疗;9例随访时间5～55个月,1例死亡。结论原发性皮肤ALCL是低度恶性淋巴瘤,预后相对较好。诊断依赖于组织病理学及免疫组化标记。本病应与弥漫性大B细胞性淋巴瘤、黑色素瘤、低分化腺癌等鉴别。