磷酸盐和pH值协同调控大肠杆菌发酵合成5-羟基色氨酸

为了提高大肠杆菌合成5-羟基色氨酸能力,该研究设计构建了pSTV28-TPH150过表达质粒,增强了羟化酶基因TPH150的表达,以HTP10为出发菌株(代谢工程实验室保藏,专利号:CN202110714155.1),电转化pSTV28-TPH150质粒得到菌株HTP10-1,发酵结果显示,存在副产物L-色氨酸积累过多,质粒不稳定等问题,因此在初始发酵工艺的基础上,通过设计4个pH梯度进行发酵对比试验和4种不同磷酸二氢钾流加策略来探究最适发酵工艺。实验结果表明,在菌株HTP10-1发酵pH值为6.7,并于发酵培养基中添加1 g/L磷酸二氢钾,葡萄糖补料瓶中添加3 g/L磷酸二氢钾时,菌体比生长速率达到最优,发酵结束后5-羟基色氨酸积累量最高达到5.46 g/L,副产物L-色氨酸积累量减少到1.37 g/L,质粒丢失率较对照组减少32%,极大地提高了菌株HTP10-1的质粒稳定性,验证了磷酸盐与发酵pH调控菌体生长的可行性,对质粒工程菌的发酵控制具有重要参考意义。

pH值对大肠杆菌发酵异亮氨酸的影响

以L-异亮氨酸生产菌E.coli TRFP为出发菌株,考察不同pH值对发酵过程中重组酶酶活、菌体生物量、L-异亮氨酸产量和葡萄糖消耗速率以及副产物积累等方面的影响。研究表明:与恒定pH 7.2控制策略相比,采用分段控制pH值的工艺可使最大生物量和异亮氨酸产量分别提高了6.1%和9.2%,乙酸及NH4+浓度分别减少7.8%和11.6%;同时,采用NaOH和氨水混合碱调节pH值能够有效降低NH4+对菌体的抑制作用,减缓菌体衰退。

小麦日粮中添加木聚糖酶对肉鸡肠道大肠杆菌数量、pH值及食糜黏度的影响

试验旨在研究在小麦日粮中添加包被及不同水平木聚糖酶对肉鸡肠道大肠杆菌数量、pH值及食糜黏度的影响。选用14日龄AA+肉仔鸡750只,随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复30只。各处理木聚糖酶的添加量分别为0(对照组)、包被型10 000 IU/g(试验组A)和未包被型10 000 IU/g(试验组B)、20 000 IU/g(试验组C)、30 000 IU/g(试验组D),试验期28 d。结果表明:试验组与对照组相比,试验组A、D的直肠大肠杆菌数量比对照组分别降低了11.46%(P<0.05)、21.36%(P<0.05);试验组A、C、D的盲肠微生物数量比对照组分别降低了8.98%(P<0.05)、10.80%(P<0.05)、12.06%(P<0.05);与对照组相比,试验组A的空肠食糜pH值降低了6.92%(P<0.05);试验组A、C、D的回肠食糜黏度分别比对照组降低了7.65%(P<0.05)、10.00%(P<0.05)、10.00%(P<0.05)。由此可见,小麦日粮中添加木聚糖酶可降低肠道大肠杆菌数量、降低食糜黏度及pH值,其中包被酶组效果好于等量未包被酶组,利用包被酶替代高水平酶制剂应用在肉鸡中成为可能。

优化致仔猪水肿病大肠杆菌培养物方法的研究

为摸索提高致仔猪水肿病大肠杆菌培养菌数的简单易行的方法 ,以普通肉汤和马丁汤为基础培养液 ,分别调整培养成分、通气培养和人工调节培养液的pH值 ,结果表明 :通气培养和维持适宜的pH值能大幅度提高菌数 ,且马丁汤培养液明显优于普通肉汤培养液。

pH值反馈补糖策略在生物合成丁二酸过程中的应用

该研究通过确定大肠杆菌在产酸阶段葡萄糖的消耗与酸中和剂碳酸钠间的定量关系,建立了pH值反馈控制的补糖策略,能够维持发酵液中葡萄糖浓度在稳定水平。与分批发酵相比,采用pH值反馈补糖且维持葡萄糖浓度在较低的水平对丁二酸的积累是有利的。当采用pH值反馈补糖并控制葡萄糖浓度在10g/L时,丁二酸最终浓度达到57.6g/L,生产效率达到1.15g(/L.h)。

产苯丙氨酸解氨酶重组大肠杆菌的培养

L-苯丙氨酸是人体8种必需氨基酸之一。酶法转化是目前生产L-苯丙氨酸的主要方法。为了提高苯丙氨酸解氨酶的产量,对可高效表达苯丙氨酸解氨酶基因的重组大肠杆菌JM105进行培养,对发酵过程中pH值对工程菌生长的影响进行了研究。结果表明,摇瓶培养条件下,控制发酵过程中发酵液的pH值可显著提高菌体产量,当控制pH值为7.0左右时,菌体量比对照高87%。在初始pH值为7.5的情况下,培养10h后将培养液pH值分别调整为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5和8.0,则以pH值为7.5时的菌体量最高。10L发酵罐中控制发酵液pH值为7.5,菌体密度可达A600=20mol/L(DCW=11g/L),比不控制pH值高出33%。试验结果为进一步开展该工程菌的高密度培养提供了一定的参考。

超早期断奶应激对仔猪胃肠内容物pH值和微生物区系的影响

为研究超早期断奶应激对仔猪胃肠道内环境ｐＨ值和微生物区系的影响，试验选用２窝１４日龄杜×（大×长）三元杂交商品猪，每窝１０头。每窝仔猪按体重平均分为两组，一组为断奶组，另一组为哺乳组，每组设２个重复（栏），每栏５头猪。分别于断奶后第０（１４日龄）、２、４、６、９天从每栏内随机抽取一头猪，集中屠宰后取胃和空肠内容物样品测定ｐＨ值，以无菌方法取直肠粪便１克，进行大肠杆菌和乳酸杆菌计数。试验结果表明，断奶应激使仔猪胃和空肠内容物ｐＨ值升高，直肠粪便中大肠杆菌数量增加，乳酸杆菌数量减少。

基于pH值调控的高山被孢霉发酵生产花生四烯酸的补料工艺

为了提高高山被孢霉（Mortierella alpina）发酵生产花生四烯酸（arachidonic acid,ARA）的产量,研究pH值控制及不同底物流加方式对M.alpina产ARA的影响。在0-90 h菌体生长阶段pH值维持在6.0,90 h以后上调至6.5,并在此基础上考察了3种补料方式（一次性补料、恒定葡萄糖速率补料和pH值反馈补料）对菌体生物量、油脂产量及ARA产量的影响。结果表明：发酵过程中pH 6.0时可以促进菌体的生长,而p H 6.5时有利于油脂的合成。与其他补料方式相比,pH值反馈补料不仅使发酵周期缩短至160 h,而且在该条件下得到ARA最大生产强度及产量,分别为1.32 g/（L·d）和8.82 g/L。

pH对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制

pH对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的产生有很大的影响。通过对不同缓冲体系试验和对摇瓶发酵过程pH变化的分析,了解摇瓶发酵过程中pH对L-天冬酰胺酶合成的影响。采用流加磷酸自控L-天冬酰胺酶发酵过程的pH,可延长发酵周期,有效地防止菌体的过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶 83%,达到 110u/mL。发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为 0. 15~0. 30h-1,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使比产酶速率的最大值Qpmax达到 3 922u/(g·h)。

油田污水处理前馈—反馈控制系统

针对油田工业污水处理工艺流程特点,提出基于混合罐产出水pH值控制的前馈—反馈控制方法。介绍了前馈-反馈控制系统的优点,此控制方法在实际应用中比单一的闭环PID控制系统有更好的控制效果,对来水流量的波动,前馈—反馈控制系统有很好的抗干扰能力。

不对称系统输入反馈预测控制及可控性分析

研究了生产过程中一类特殊的非线性系统,不对称系统的预测控制方法。在正反方向的控制作用下,这类系统表现出不对称动态特性。此类系统的理论研究特别是控制方法研究十分有限。针对基于正反方向上的线性模型设计的正反模型预测控制方法与传统预测控制方法在结构上的差异进行了分析,说明了由于这种结构上的差异可能导致的模型失配及控制效果不佳,然后采用输入反馈方法对不对称系统正反模型预测控制方法进行了修正,将实际施加给对象的控制作用通过反馈形式纳入到下一步正反方向控制律的求解中。并且在无约束的条件下分析了正反模型预测控制方法的可控性。最后通过pH值控制的仿真实验验证了此两种不对称系统正反模型预测控制方法的控制效果。

前馈反馈控制系统在油田污水处理中的应用

文章以中原油田某污水处理工程为例,对混合罐产出水pH值控制环节做了细致分析。通过对pH值控制环节的系统图分析,对系统传递函数的推导,提出了采用前馈反馈控制系统对pH值进行控制的方法。此控制方法在实际应用中已收到了比较满意的效果。

两种试验方法对3种含氯消毒剂部分消毒性能的评价

目的:了解试验方法对不同含氯消毒剂消毒性能评价的影响。方法:按照1999年版规定的载体浸泡定量杀菌试验和2002年版规定的悬液定量杀菌试验方法,对三种含氯消毒剂杀菌效果进行了比较。用1999年版载体法测定3种含氯消毒剂达到消毒合格所需的剂量均较低,有效氯50mg/L^200mg/L作用2·5min^10min,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率≥99·90%;有效氯1000mg/L^2000mg/L作用15min^20min,对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率≥99·90%。结果:按照2002年版规范,悬液法达到消毒合格的剂量均有不同程度的提高,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯200mg/L作用10min,健来牌含氯消毒剂有效氯600mg/L^700mg/L作用5min^10min,众智牌84消毒液有效氯500mg/L作用10min^15min。对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯2000mg/L作用40min,健来牌含氯消毒液有效氯6000mg/L作用60min,众智牌84消毒液有效氯5000mg/L作用30min。结论:用不同方法得到的3种消毒剂有效浓度有差异,杀菌效果有差异,用2002年版悬液定量杀菌试验方法得到的消毒效果较差。

微生物絮凝剂产生菌的培养条件研究

从活性污泥中分离筛选到1株高效絮凝剂产生菌E-9,初步鉴定其为大肠杆菌.首次发现大肠杆菌能产生微生物絮凝剂.该菌产生絮凝剂的适宜培养条件为:乙醇为碳源,大豆粉为氮源,初始pH值为6.5～7.2、温度为30℃.絮凝实验结果表明,该菌产絮凝剂对高岭土悬浊液的絮凝率可达97%～99.5%,而絮凝剂投加量仅为通用发酵培养基的1/15,絮凝效果优于聚丙烯酰胺等常用絮凝剂.

玉米浆调节乳酸发酵基质氧化还原电位参数的研究

乳酸厌氧发酵过程中缺乏有效的监控参数,难以了解菌体在发酵过程中生理状态的变化情况。氧化还原电位(oxidoreduction potential,ORP)对乳酸发酵有直接的影响,能灵敏地反映发酵体系状态的变化。以ORP的变化规律为依据,考察玉米浆的添加量和添加时间对乳酸发酵的影响。结果表明,最佳玉米浆添加量为体积分数0.5%,最适添加时间为30h,即ORP开始回升时。玉米浆的添加有效调节了发酵后期的碳氮比,并维持了有利于乳酸合成的还原性环境,乳酸产量提高了20%。结果显示,ORP可以作为乳酸代谢的调控参数,而玉米浆可以调节发酵醪的ORP。

微生态制剂应用的研究进展

微生态制剂是指利用正常微生物或者能促进微生物生长繁殖的物质制成的活的微生物制剂。微生态制剂里面含有大量的乳酸菌等有益菌种，能降低胃肠道pH值，有效地抑制大肠杆菌等致病菌的生长繁殖.

AOP-X臭氧消毒器对水中细菌杀灭效果的试验研究

目的:为了解AOP-X臭氧消毒器对水中细菌杀灭效果。方法:采用悬液定量杀菌试验进行研究。结果:将臭氧含量为5 .19mg/L的AOP-X臭氧消毒器发生液直接流入试验用流动水样中,发生液流速为7L/min、试验用流动水样流速为20L/min,流出水样中臭氧含量平均为1 .99mg/L,pH值平均为7. 38,作用10min时,水中大肠杆菌菌落数下降至0cfu/100ml;在水温分别为5℃、20℃、30℃,水的色度分别为0度、10度、15度以及水的pH值分别为6 5、7 0、8 5条件下,对水中大肠杆菌的杀灭效果均无明显影响;对自然污染的河水及医院污水进行试验,发生液流速为7L/min、试验用污水流速为20L/min,作用时间15min时,水中细菌菌落总数均下降至0cfu/100ml。结论:臭氧消毒器可用于饮用水及污水消毒,达到净化水的目的。

葡萄糖添加量对色拉米生产过程中主要栅栏因子的影响

为了提高发酵香肠生产的安全性,本实验针对不同的葡萄糖添加量对色拉米生产过程中pH值和水分活度两个重要栅栏因子以及乳酸菌数和大肠杆菌数的影响进行了研究。结果表明,随着葡萄糖添加量的增多,色拉米pH值下降越快,终点pH值越低;水分活度也随着葡萄糖添加量的增多下降越快;发酵期葡萄糖添加量越多,乳酸菌生长速度越快,进入干燥期后,葡萄糖添加量对色拉米中乳酸菌数的变化没有显著影响;葡萄糖添加量越高,未检出大肠杆菌时间越早。因此,在可接受的酸度和口感范围内,适当增加葡萄糖的添加量,可有效提高色拉米的食用安全性。

速解灵对马立克疫苗溶液pH值及马立克疫苗PFU的影响

近年来,随着集约化养鸡场的增多和规模不断扩大,环境污染愈加严重,细菌性疾病明显增多,如沙门氏菌病、霉形体病、大肠杆菌病、葡萄球菌病等,常造成严重的纤济损失,在生产实际中,某些养鸡场从雏鸡出壳后1日龄即开始使用抗生素治疗或预防。有些生产者更为方便起见,在对1日龄雏鸡进行马立克氏病(MD)疫苗免疫接种时,将抗生素添加到MD疫苗中同时使用,希望一举两得,但我们先前的研究表明,大多数搞生素对MD疫苗溶液的pH和空斑数(PFU)有较大影响。近来,据国外报道,一定量的头孢类抗生素(速解灵,ceftiofur)在加入MD疫苗中后对疫苗pH、PFU无影响。