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基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究
1
作者
宁亚蕾
周立雄
+4 位作者
毛旭虎
张卫军
程琰
余抒
邹全明
《生物技术通讯》
CAS
2008年第3期353-357,共5页
目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵...
目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将获得的RsaA系统元件编码序列和异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒,构建新的胞外分泌表达质粒pQABP2S;以大肠杆菌为宿主菌诱导表达EspA及EspA-IL-24融合蛋白,并通过Westernblot检测目标蛋白在培养上清中的表达。结果:获得了新的胞外分泌表达载体pQABP2S;与对照相比,该载体宿主系统培养上清中目标蛋白EspA及EspA-IL-24的表达量明显增加。结论:在大肠杆菌中通过RsaA分泌系统可实现分子大小不同的EspA及EspA-IL-24融合蛋白的特异性分泌表达,进一步证实该分泌表达策略的有效性和通用性;调整调控序列以优化分泌系统的尝试,为此类基因工程技术平台的开发提供了借鉴。
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关键词
新月柄
杆菌
RsaA
分泌
系统
大肠杆菌分泌蛋白a
白细胞介素-24
分泌
表达
表达载体
大肠杆菌
下载PDF
职称材料
题名
基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究
1
作者
宁亚蕾
周立雄
毛旭虎
张卫军
程琰
余抒
邹全明
机构
第三军医大学临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心
香港大学医学院
出处
《生物技术通讯》
CAS
2008年第3期353-357,共5页
基金
重庆自然科学基金重点项目(2006BA5024)
文摘
目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将获得的RsaA系统元件编码序列和异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒,构建新的胞外分泌表达质粒pQABP2S;以大肠杆菌为宿主菌诱导表达EspA及EspA-IL-24融合蛋白,并通过Westernblot检测目标蛋白在培养上清中的表达。结果:获得了新的胞外分泌表达载体pQABP2S;与对照相比,该载体宿主系统培养上清中目标蛋白EspA及EspA-IL-24的表达量明显增加。结论:在大肠杆菌中通过RsaA分泌系统可实现分子大小不同的EspA及EspA-IL-24融合蛋白的特异性分泌表达,进一步证实该分泌表达策略的有效性和通用性;调整调控序列以优化分泌系统的尝试,为此类基因工程技术平台的开发提供了借鉴。
关键词
新月柄
杆菌
RsaA
分泌
系统
大肠杆菌分泌蛋白a
白细胞介素-24
分泌
表达
表达载体
大肠杆菌
Keywords
Caulobacter crescentus
RsaA secretion system
E.coli secreted protein A
IL-24
extracellular expression
expression vector
E.coli
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究
宁亚蕾
周立雄
毛旭虎
张卫军
程琰
余抒
邹全明
《生物技术通讯》
CAS
2008
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