大肠杆菌O11 O-抗原基因簇序列的破译及特异分子标识的鉴定

大肠杆菌O11是一种可在人畜间交叉传染的强致病菌,具有潜在流行性爆发的危险。现完成了O11 O-抗原基因簇的破译,筛选和鉴定了多种特异分子标识,并实现了对大肠杆菌O11的快速、灵敏和准确的分子分型检测。利用鸟枪法测定大肠杆菌O11 O-抗原基因簇的序列全长为14180bp,生物信息学方法分析序列结构,共发现12个基因:GDP-L型岩藻糖合成途径基因(gmd,fcl,gmm,manC,manB)、UDP-N乙酰葡萄糖C4异构酶基因(gne)、O-抗原转运酶基因(wzx)、O-抗原聚合酶基因(wzy)和4个糖基转移酶基因;用PCR方法筛选出2个针对大肠杆菌O11的特异基因和4对特异引物,并进行环境样品检测实验鉴定了该PCR检测方法的灵敏度;设计并筛选出8条针对大肠杆菌O11的特异探针。

肠出血性大肠杆菌O26∶H11鞭毛抗原的诱导及鉴定研究

目的对肠出血性大肠杆菌(EHEC)O26∶H11鞭毛抗原诱导及鉴定进行研究,为日常检测提供可借鉴的方法。方法对疑似EHEC O26∶H11菌株进行生化鉴定和血清分型,比较37℃及28℃2种温度Swarm琼脂诱导鞭毛抗原的效果,并采用荧光定量PCR检测8种致泻性大肠杆菌毒力基因eae、stx1、stx2、lt、st、bfp A、aggR和ipa H。结果 28℃诱导鞭毛抗原H11血清凝集为阳性,37℃诱导鞭毛抗原血清凝集为阴性;毒力基因检测结果显示stx1和eae基因阳性,其余均为阴性;菌株鉴定为EHEC O26∶H11。结论 28℃Swarm琼脂可诱导鞭毛H11,肠出血性大肠杆菌O26∶H11鉴定时应检测相关毒力基因。