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利用同源重组的方法提高大肠杆菌W3110天冬氨酸的积累
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作者 马怀远 黄非 白林含 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期61-67,共7页
大肠杆菌中存在3种天冬氨酸激酶,分别为LysC,MetL,ThrA,使天冬氨酸磷酸化后分别进入Lys、Met、Thr的合成途径.因此大肠杆菌菌体中无法积累大量天冬氨酸.以大肠杆菌W3110为出发菌株,利用Red同源重组系统分别构建了LysC、ThrA和MetL单基... 大肠杆菌中存在3种天冬氨酸激酶,分别为LysC,MetL,ThrA,使天冬氨酸磷酸化后分别进入Lys、Met、Thr的合成途径.因此大肠杆菌菌体中无法积累大量天冬氨酸.以大肠杆菌W3110为出发菌株,利用Red同源重组系统分别构建了LysC、ThrA和MetL单基因缺陷株和LysC-ThrA和LysC-MetL双基因缺陷株.采用高效液相色谱法测定L-天冬氨酸积累量.发现除MetL单基因突变株外,其余突变株均积累了比野生型更多的L-天冬氨酸,这为代谢工程改造菌株并通过发酵法生产天冬氨酸奠定了基础. 展开更多
关键词 大肠杆菌w3110 RED同源重组 基因敲除 高效液相色谱 L-天冬氨酸
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