线栓法大脑中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注鼠模型的脑水肿和脑梗死比的变化

目的:探讨短暂性右侧大脑中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注模型的脑梗死比和脑水肿的变化。方法:线栓法制作大鼠脑缺血/再灌注不同时间点模型,行TTC染色测量脑梗死比及干湿称重法测量脑含水量。结果:脑缺血再灌注6h时大鼠脑组织即有含水量的增加,并随着时间的推移呈上升趋势,且未损伤侧中段脑组织含水量升高最为显著。TTC染色在缺血再灌注6h即可见白色梗死灶,梗死比在再灌注72h内逐渐增加。结论:局灶性脑缺血再灌注72h内脑梗死比和脑水肿均呈进行性加重。

电针督脉穴对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑基因表达谱的影响

目的:应用基因芯片技术研究电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织基因表达谱的影响。在分子水平探讨电针治疗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:大脑中动脉埋线法制备大鼠脑缺血再灌注模型,缺血2h再灌注24h后取受损脑组织提取总RNA。用大鼠全基因组寡核苷酸微阵列芯片检测电针"水沟"、"百会"穴对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑基因表达谱的影响。结果:局灶性脑缺血再灌注大鼠与假手术组大鼠脑组织基因表达谱相比,有175个差异表达基因,其中115个基因表达增高,60个基因表达下调;电针组与局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织基因表达谱相比,有74个差异表达基因,其中26个基因表达增高,48个基因表达下调。结论:本研究筛选出大量的差异表达基因,这些基因可能参与脑缺血再灌后脑损伤的发生发展过程,并参与了针灸抗损伤的机制。

大鼠短暂局灶性大脑中动脉缺血后calpain的表达

目的 :研究calpain在缺血性脑损伤中的作用 ,进一步探讨缺血性脑血管病的分子机制 ,为治疗研发提供理论依据。方法 :用Belayev改良的Langa线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉 (MCA)缺血 /再灌注模型 ,TTC染色观察梗死灶的形成 ,分别用原位杂交及免疫组化技术检测鼠脑中calpainmRNA与活性蛋白的表达。 结果 :缺血 2h再灌注 2 4h ,TTC染色见明显的梗死灶形成 ,正常脑组织、假手术组及MCAO缺血对侧脑中有少量的calpainmRNA表达 ,但活性蛋白几无表达 ;缺血脑组织calpainmRNA表达及蛋白质活化均显著增加 ,呈双峰式 ,MCA缺血 2h增加 ,再灌注 4h减少 ,至 2 4h更明显增高 ,而 4 8h又有所下降。结论 :Calpain参与了缺血性脑损伤过程 ,尤其在迟发性神经元死亡中起重要作用。

bFGF对大鼠局灶性缺血再灌注脑组织的保护作用

目的探讨bFGF对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡和脑组织中SOD、MDA含量变化的影响。方法应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h再灌注损伤24h,检测假手术组、缺血再灌注组和bFGF组的凋亡细胞数和脑组织中SOD、MDA的含量。结果假手术组偶见凋亡细胞,缺血再灌注组和bFGF组凋亡细胞数分别是26.35±5.67和18.65±5.91,与缺血再灌注组相比,bFGF组缺血区皮质凋亡神经元明显减少(P<0.05)。SOD,MDA测定结果显示三组间比较,具有显著性差异(P<0.01和P<0.05)。结论抗氧化作用可能是bFGF减少大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的分子机制之一。

丹龙醒脑片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响

目的:研究丹龙醒脑片对局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑梗死体积和神经功能的影响。方法:用大脑中动脉栓塞1h再灌注47h法建立模型,以图像分析法检测脑梗死体积。结果:局灶性脑缺血再灌注后,模型组脑梗死体积显著增大(P<0.01),神经功能症状计分显著升高(P<0.01);丹龙醒脑大、中剂量片组脑梗死体积较模型组显著缩小(P<0.05),同时,大鼠神经功能症状计分下降(P<0.05)。结论:局灶性脑缺血再灌注后,大鼠脑组织梗死体积增大,丹龙醒脑片能减少脑梗死体积、改善脑缺血后神经症状。

血红素加氧酶在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑组织表达测定

[目的]测定血红素加氧酶(HO)在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑组织表达。[方法]使用随机平行对照方法,将SPF级雄性大鼠20只随机分为两组,缺血组15只参照Zea-logue方法造大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注24h模型,假手术对照组5只采用同样方法暴露颈动脉后缝合切口。观察脑组织形态结构,测定HO-1表达。[结果]假手术组脑组织形态结构正常,模型组大鼠大脑缺血区组织明显水肿。HO-1表达相同部位缺血组明显高于假手术组(P<0.01)。[结论]局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑血HO升高,HO-1参与了局灶性脑缺血再灌注损伤。

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动态病变及其与MMP-2表达关系

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的病变规律及MMP-2在损伤机制中的作用。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别采用HE、TUNEL染色法观察缺血2 h再灌注3 h-7 d脑组织的动态病理变化及免疫组化法检测MMP-2的蛋白表达。结果假手术组大鼠脑组织形态结构正常;与之相比,缺血再灌注3 h-7 d组脑组织均有明显病变且差异有显著性(P<0.01);缺血中心区再灌注后3 h以变性损伤为主,24 h-7 d以坏死及继发炎症为主;边缘区一直以持续进行性凋亡为主;水肿贯穿病变全程,分别于再灌注后24 h、72 h两次出现高峰,其中24 h尚伴灶片状出血。缺血再灌注组大鼠大脑组织的MMP-2表达显著高于假手术对照组,P<0.05;MMP-2表达存在时空改变且与脑水肿、细胞凋亡有正相关性,P<0.01,相关度R值在0.5以上,其中24 h的首次脑水肿高峰与MMP-2表达峰值点重叠。结论再灌注后24 h、72 h的两次水肿高峰及迟发、持续性细胞凋亡是再灌注损伤两个最重要的方面,MMP -2表达参与了其机制。

JNK信号通路介导大鼠局灶性脑缺血再灌后海马神经元凋亡

[目的]研究局灶性脑缺血再灌(I/R)后c-Jun氨基端激酶(JNK)蛋白表达及其依赖的caspase途径激活情况,探讨此通路在海马神经元凋亡中可能的作用及机制。[方法]建立大鼠可逆性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用免疫印迹法检测不同实验组中海马区p-c-jun及凋亡Caspase-3表达,TUNEL法原位检测CA1区凋亡锥体细胞。[结果]与假手术组比较,模型组p-c-jun蛋白平均灰度值显著增强,以3h、6h、12h差异有统计学意义(P﹤0.05)。模型组Caspase-3于再灌注后6h开始表达(P﹤0.05),12h其条带密度达高峰(P﹤0.05)。I/R3h至24h海马区p-c-jun表达与caspase-3呈正相关(r=0.696,P﹤0.01);caspase-3与TUNEL呈正相关(r=0.310,P﹤0.01)。[结论]大鼠I/R后JNK部分激活了Caspase依赖的促凋亡通路。

GDNF对局灶性脑缺血大鼠SVZ和SGZ细胞增殖及学习记忆的影响

目的 观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠SVZ和SGZ细胞增殖的影响。方法 大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,立体定位下侧脑室注射GDNF,应用5 -溴脱氧尿核苷(Brd U )标记分裂细胞,观察模型组、GDNF组大鼠SVZ和SGZ神经干细胞的增殖,同时应用Y迷宫监测大鼠学习记忆能力。结果 局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠GDNF组神经干细胞增殖明显增加,Brd U免疫阳性细胞数与相应对照组比较,差异有显著性意义(P<0 .0 5 )。GDNF组大鼠学习和记忆能力与相应对照组比较,差异有显著性(P<0 .0 5 )。结论 GDNF可增强局灶性脑缺血SVZ和SGZ细胞增殖能力,外源性GDNF可加速中枢神经损伤的修复。

短暂地氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的:探讨短暂地氟醚预处理诱导脑缺血耐受的可行性。方法:30只雄性SD大鼠,随机分为三组:对照组动物不接受任何处理;吸氧组动物接受1 h吸氧预处理( 94%氧) ;地氟醚组动物吸入1 h5 .7%的地氟醚预处理。所有动物均采用右侧颈动脉尼龙线栓塞大脑中动脉致局灶性脑缺血1 2 0 min,观察再灌注后2 4 h神经行为学改变及脑梗死容积。结果:直肠温度、p H、PO2 、PCO2 、血压及血糖在预处理期间各组无明显差异。再灌后2 4 h神经行为学评分地氟醚组明显小于吸氧组和对照组( P<0 .0 5 ) ;地氟醚组脑梗死容积明显低于吸氧组和对照组,后两组梗死容积无显著性差异( P>0 .0 5 )。

大鼠脑缺血再灌注后TNF-α及ICAM-1的相关性分析

目的 观察大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子- 1(ICAM - 1)、肿瘤坏死因子-α(TNF -α)在脑缺血再灌注损伤不同时间段的表达规律,探讨ICAM - 1、TNF -α在脑缺血再灌注损伤中的关系。方法 采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,大鼠大脑中动脉阻塞2h ,分别再灌注2、6、12、2 4、4 8、96h ,免疫组织化学法测定ICAM - 1、TNF -α表达水平。并设正常组、假手术组及永久缺血组对照。结果 ICAM - 1的表达:永久缺血组、缺血再灌注组ICAM - 1明显高于正常对照组和假手术组(P <0 .0 1) ;与永久缺血组比较,缺血再灌注组除再灌注2h时段外,ICAM - 1表达明显增高(P <0 .0 5 ) ;脑缺血再灌注2h组局部脑组织ICAM - 1的表达于再灌注4 8h达到峰值,再灌注96h仍保持较高水平。TNF -α的表达:缺血再灌注组大鼠缺血侧半球TNF -α的表达于再灌注2h开始升高,再灌注12h ,阳性细胞显著增多,2 4h达到高峰,其后逐渐下降,96h达基础水平;缺血再灌注组TNF-α的表达较正常组、假手术组有显著差异(P <0 .0 1) ,比永久缺血组TNF -α阳性细胞低,但无统计学意义(P>0 .0 5 )。缺血再灌注组TNF -α的表达与ICAM - 1的表达在2 4、4 8、96h时间段呈正相关(r分别为0 .76 5、0 886、0 .787,P <0 .0 5 ) ;TNF -α的表达早于ICAM - 1的表达,?

不同剂量BPI-1095对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护研究

目的 探讨BPI-1095对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法 90只SD大鼠被随机分成6组：BPI-1095大剂量组（240mg／kg）、BPI-1095中剂量组（80mg／kg）、BPI-1095小剂量组（27mg／kg）、阿司匹林组（80mg／kg）、安慰剂组、假手术组，每组15只。于线栓法复制永久性大脑中动脉闭塞缺血模型术后10min，动物分别以灌胃的方式给予不同剂量的观察药物及对照药物。于给药后4h、24h采用动物行为学量表对缺血动物的神经功能进行评价。24h评分完成后，在造模成功且存活的各组动物中，每组随机取7或8只（使每组各剩余5只）用氯化三苯四唑（TTC）染色，利用计算机图像分析系统测定大脑半球梗死面积百分数。结果 大剂量及中剂量BPI-1095可以改善缺血大鼠神经功能障碍（P〈0．05）；大、中剂量治疗组梗死面积百分数小于安慰剂组（P〈0．05）。结论 80～240mg／kg BPI-1095可以改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能，缩小梗死体积。

早期“强制性使用”对局灶性脑梗死大鼠大脑皮层微管相关蛋白-2表达的影响

目的:探讨早期“强制性使用”对局灶性脑梗死大鼠大脑皮层微管相关蛋白-2(M A P-2)表达的影响。方法:70只W istar大鼠随机分为假手术(D)组(10只)和手术组(60只),后者制作成右侧大脑中动脉阻塞(M CAO)模型,24h后再分为患侧前肢固定(A)组、未固定(B)组和健侧前肢固定(C)组,每组20只。21天后解除固定,于M CA O后21天和28天时,用免疫组化的方法检测梗死灶周围大脑皮质M AP-2的表达。结果:与D组相比,手术组大鼠梗死灶周围皮质M AP-2阳性神经元数量明显减少,但光密度值增高(P<0.05或P<0.01);手术组大鼠梗死灶周围皮质M AP-2阳性细胞数及光密度值,B组高于A组,A组高于C组(P<0.05)。结论:脑缺血损伤可刺激M AP-2的表达,肢体固定或过度使用对梗死灶周围皮质部分神经元代偿性高表达M A P-2有不利影响,其中患侧前肢过度使用的影响尤其明显。

NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响

目的观察NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响。方法采用大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)造成局部脑缺血模型,观察NBT对脑缺血大鼠行为症状、脑梗死面积、脑组织含水量的影响。结果预先给予NBT0.21g/kg,0.42g/kg7d,可减轻MCAO大鼠行为障碍、减少脑梗死面积、降低脑组织的含水量(P<0.05)。结论NBT对大鼠脑缺血有一定的预防作用。

脑醒喷鼻剂对脑缺血再灌注损伤抗炎保护作用的实验研究

目的:观察脑醒喷鼻剂对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α和白细胞介素-1β(IL-1β)含量变化的影响。方法:将70只大鼠随机分为脑醒喷鼻剂高剂量组(高剂组)、脑醒喷鼻剂中剂量组(中剂组)、脑醒喷鼻剂低剂量组(低剂组)、尼莫通腹腔注射组(对照组)、生理盐水喷鼻剂组(NS组)、溶酶喷鼻剂组(溶酶组)、假手术组(正常组)共7组,每组10只。用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉建立左大脑中动脉栓塞模型并进行再灌注。在造模前3天及再灌注期间,脑醒喷鼻剂高、中、低剂组分别以含川芎嗪和石菖蒲生药5.4mg·kg-1·d-1和1.08g·kg-1·d-1、2.7mg·kg-1·d-1和0.54g·kg-1·d-1、1.35mg·kg-1·d-1·和0.27g·k-1·d-1的剂量滴鼻;NS组以生理盐水0.18ml·kg-1·d-1滴鼻;溶酶组以溶酶0.18ml·kg-1·d-1滴鼻;对照组用尼莫通注射液0.8mg·kg-1·d-1腹腔注射;正常组按常规饲养。检测血清TNF-α和IL-1β。结果:高剂组、中剂组可降低血清中IL-1β和TNF—α含量,与NS组比较,差异有非常显著性或显著性意义(P<0.01,P<0.05)。低剂组虽然也能降低TNF—α和IL-1β含量,与NS组比较,差异无显著性意义(P>0.05);但与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:脑醒喷鼻剂能抑制TNF-α和IL-1β的表达,使血清中TNF-α和IL-1β生成减少,从而阻断其介导的炎症反应,对脑缺血再灌注损伤具有抗炎和神经保护作用。

大鼠脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶2和9的表达

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9(MMP-9)表达的变化规律与脑水肿的关系。方法:用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),用免疫组化技术分别观察脑缺血再灌流不同时间点MMP-2和MMP-9的表达。结果:(1)脑缺血再灌流后24h可见MMP-2阳性细胞开始出现,3～7d时阳性细胞数达高峰,显色最深,至14d时仍有表达,略高于假手术组。(2)脑缺血再灌流后6h缺血区内MMP-9阳性细胞开始出现,12h明显增高,至2d达高峰,3d后阳性细胞数开始减少,至14d时恢复到基础水平,各相邻时间点比较差异显著。结论:脑缺血再灌流后,病变区MMP-2和MMP-9表达增加,二者在脑缺血再灌流后脑水肿方面起重要作用。

月季花总黄酮对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠的影响

目的:通过研究月季花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响,探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、月季花总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg^(-1))及阳性组[尼莫地平组(20 mg·kg^(-1)),脑络通组(500 mg·kg^(-1))]。预先连续给药7 d,末次给药1 h后,复制大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型。造模2 h后再灌注22 h,对死亡率、神经功能缺失评分,检测血清中S-100β;脑组织中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),三磷酸腺苷(ATP)酶;并观察脑组织形态学改变。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注模型复制成功。与模型组比较,月季花总黄酮高、中、低剂量组均可显著降低大鼠神经功能缺失的评分(P<0.01),显著降低血清中的S-100β含量(P<0.01),显著降低脑组织中MDA,NO,NOS活性(P<0.01),显著升高脑组织中SOD活性(P<0.01),显著升高脑组织中Na^+K^+-ATP酶,Mg^(2+)-ATP酶,Ca^(2+)-ATP酶活性(P<0.01),显著降低脑组织中的TNF-α,IL-1β,ICAM-1含量(P<0.01);显著改善脑组织的损伤(P<0.01)。结论:月季花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗自由基,减轻脑组织的炎症反应及改善脑缺血再灌注损伤后脑组织的能量代谢有关。

三七总皂苷对大鼠脑梗死区ICAM-1表达和中性粒细胞浸润的影响

目的:研究三七总皂苷对大鼠脑梗死区细胞间粘附分子-1(ICAM- 1)表达和中性粒细胞浸润的影响。方法:大鼠大脑中动脉短暂阻塞制成局灶性脑缺血2h再灌注24h模型。再灌注后2h腹腔注射三七总皂苷25或50mg/kg。再灌注24h后分光光度法测定缺血区大脑皮层和尾壳核髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫组织化学染色测定大脑皮层和尾壳核细胞间粘附分子1(ICAM -1)的表达。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注后,缺血区大脑皮层和尾壳核MPO活性和ICAM -1表达明显增加,三七总皂苷50mg/kg治疗用药能降低MPO活性和抑制ICAM- 1表达。结论:三七总皂苷可抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注后ICAM- 1表达和中性粒细胞浸润,减轻脑梗死区炎症反应。

局灶性脑缺血再灌注时间窗的病理研究

局灶性脑缺血再灌注时间窗的病理研究刘立，郭玉璞，马中弘局灶性脑缺血的时间窗研究，对脑梗塞的超早期治疗有极大的指导意义。尤其是近年局灶性脑缺血再灌注模型的应用，更为其提供了非常有价值的试验手段。我们采用血管内尼龙线阻断大脑中动脉制成大鼠局灶脑缺血再灌注...