注意缺陷多动障碍共患对立违抗障碍儿童大脑皮质形态学特点

目的:探讨注意缺陷多动障碍(ADHD)共患对立违抗障碍(ODD)儿童的大脑皮质形态学特点。方法:选取符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)诊断标准的ADHD共患ODD儿童16例,不共患ODD的ADHD儿童20例,及性别、年龄匹配的36例正常对照儿童。采用中国修订韦氏儿童智力量表(C-WISC)评估智商。所有被试进行脑磁共振成像扫描及数据采集,采用FreeS urfer软件分析大脑皮质形态学指标。结果:ADHD伴ODD组[(6528.1±857.5)mm^(3)vs.(7591.2±657.3)mm^(3)]、ADHD不伴ODD组[(6867.2±841.3)mm^(3)vs.(7591.2±657.3)mm^(3)]左外侧颞上回脑区皮质体积均小于正常对照组(P<0.05),而ADHD伴ODD与ADHD不伴ODD两组间体积差异无统计学意义(P>0.05);ADHD组左外侧颞上回脑区皮质体积与ODD症状的相关无统计学意义(P>0.05)。3组间皮质厚度、表面积和曲率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:左外侧颞上回皮质体积减小可能是ADHD儿童的重要脑结构异常指征,共患ODD未改变这一特点。

不同吞咽时期大脑皮质激活特征:基于功能性近红外光谱技术

目的采用功能性近红外光谱技术(fNIRS)研究吞咽不同时期大脑皮质激活情况。方法2023年10月至12月,招募健康成年人18例,在fNIRS采集过程中执行视觉刺激、咀嚼、舌尖滑动和反复吞咽4项任务,计算覆盖额叶、顶叶和枕叶3个区域共计41个通道的皮质激活β值。结果在口腔前期,双侧运动前区和辅助运动皮质区(PSMC)、双侧额下回、右侧视觉联合皮质(AVC)和左侧初级运动皮质(PMC)被激活(P<0.05)。在口腔准备期,右侧额下回三角部(PTG)、右侧额极区(FPA)、右侧背外侧前额叶(DPC)、左侧初级躯体感觉皮质(PSC)、左侧PSMC、左侧PMC被激活(P<0.05)。在口腔期和咽期的过渡期,双侧PSMC,双侧PMC被激活(P<0.05)。在口腔期和咽期两个连续时期,双侧PSC、双侧PTG、双侧FPA、双侧眶额区、双侧PSMC、双侧DPC、双侧PMC被激活(P<0.05)。结论吞咽运动需要额叶、顶叶和枕叶的大脑皮质共同协调完成,不同吞咽时期主要激活的脑区具有差异性,PSMC和PMC参与大部分吞咽时期。

小鼠大脑皮质星形胶质细胞的体外培养方法及优化

目的探究并优化新生小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外原代培养方法,为星形胶质细胞的体外培养提供更优解。方法为优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外培养方法,取新生3 d的C57BL/6J小鼠大脑皮质组织,去除脑膜和血管,经胰酶消化后离心,加入高糖的杜氏改良Eagle培养基(DMEM)吹打形成细胞悬液。进一步通过差速贴壁法、十字交叉手摇法以及恒温振摇法进行纯化,将细胞分别以不同培养密度接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶中,并通过形态学观察,免疫荧光染色等方法对星形胶质细胞进行纯度鉴定。结果新生小鼠大脑皮质细胞以5×10^(6)个/瓶密度接种效果好,活性高;纯化过程中使用高糖DMEM培养基联合差速贴壁法、十字交叉手摇法及恒温振摇法,星形胶质细胞纯度可达99%。结论成功建立并优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞的原代培养方法。

初生及成年牦牛大脑皮质的转录组分析

旨在分析初生和成年牦牛大脑皮质转录组表达谱,筛选影响大脑皮质发育的候选基因。本研究选取初生(1~7日龄(NYB),n=3)和成年(3~4岁(AYB),n=3)牦牛,放血处死,采集大脑皮质,利用Illumina HiSeq平台对转录组进行测序与分析,筛选得到差异表达基因,在此基础上对差异基因进行GO功能注释、KEGG富集分析和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法验证。测序结果共分析得到了4790个显著差异表达的基因(P<0.05),其中包括2670个上调表达的差异基因,2120个下调表达的差异基因。随机选取了9个差异基因进行qRT-PCR验证,表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠。GO功能注释发现其中占比较多的条目为与蛋白合成及ATP利用相关的转录调控、RNA聚合酶II正调控转录、蛋白结合及ATP结合;KEGG富集分析发现占比较多与大脑发育相关的通路为调控轴突发育及重塑的轴突导向通路,与神经胶质细胞增殖相关的MAPK信号通路,与突触传递相关的神经活性配体-受体相互作用、PI3K-Akt、钙信号及磷脂酶D信号通路,与免疫防御相关的Toll样受体通路,与低氧适应调控相关的HIF信号通路。从富集通路中发现,Slit2、SEMA 5A、BDNF、Rab 3a、FGF18、HIF 1α、HIF 2α、NGF、VEGF A、CaMK 2A、PLD1、TLR1、TLR 4基因可能是影响牦牛大脑皮质发育的候选基因。上述结果提示,成年牦牛大脑皮质的突触发育、可塑性和传递、免疫防御可能更活跃,并且低氧适应性更强,这为进一步探讨牦牛大脑发育潜在分子机理提供了一定参考。

体外培养大脑皮质类器官与活体大脑皮质发育的比较

目的 探讨体外培养大脑类器官与体内正常大脑皮质发育的差异。方法 1.分组:在体大脑皮质组、体外培养大脑皮质类器官组。2.取材:收取昆明小鼠胚胎7.5 d(E7.5)、E9.5完整胚胎以及E11.5、E14.5、出生后3 d(P3)、P7大脑组织,每组标本取3只。利用小鼠诱导性多能干细胞(iPSCs)培养大脑皮质类器官,收取不同培养时间点的标本,每时间点取3个以上。3.检测方法:通过免疫荧光染色分析各组标本不同类型细胞的分布。结果 大脑类器官在组织发生、神经细胞与神经胶质细胞分化等方面与活体大脑皮质发育类似,但大脑类器官尚不具有活体大脑皮质复杂的片层结构。结论 大脑类器官可以模拟在体大脑的发育,用于疾病模型建立,但大脑类器官的培养技术仍需改进。

儿童大脑皮质室管膜瘤的影像学分析

目的:总结儿童大脑皮质室管膜瘤(CE)的临床及影像学特征。方法:搜集本院经手术及病理证实的5例儿童CE以及发表文献中的17例,共22例,分析及总结其临床及影像学特征。结果:22例患儿中,男、女各11例。发病年龄为9个月~14岁,平均(6.99±4.00)岁。临床症状表现为癫痫者7例(31.8%),头痛、呕吐7例(31.8%),肢体无力4例(18.2%),其余的包括上肢抖动、昏厥、发热、腹泻等。肿瘤位于右侧大脑半球15例(68.2%),位于左侧大脑半球7例(31.8%),其中位于额叶5例(22.7%),额顶叶5例(22.7%),顶叶4例(18.2%),颞叶4例(18.2%),另外额颞叶、颞顶叶、颞枕叶及枕叶各1例。瘤体为实性者10例(45.5%),囊-实性9例(40.9%),囊性伴壁结节3例(13.6%)。10例(45.5%)实性部分伴有不同程度的钙化。9例患儿中,5例(55.6%)瘤周无水肿,4例(44.4%)轻度水肿。所有病例均有不同程度的强化。13例(59.1%)为WHOⅢ级,9例(40.9%)为WHOⅡ级。结论:儿童CE男女性别比例相当,好发于右侧大脑半球,好发于额、顶叶,常见的临床表现为癫痫发作及头痛、呕吐。瘤体可为实性、囊-实性或囊性伴壁结节。影像学特征包括钙化多、囊变多、不均质强化及瘤周水肿轻。CT与MRI相互补充,CT显示钙化优,MRI更有助于显示瘤周水肿、强化程度及鉴别肿瘤的良恶性。

大脑皮质下结构与癫痫

随着神经电生理学、神经影像学等技术的快速发展,已有大量证据显示癫痫的发生发展与皮质-皮质下神经网络密切相关。本文拟就丘脑、下丘脑、小脑、基底节、脑干等皮质下结构参与癫痫发生发展的相关研究,以及目前神经调控治疗耐药性癫痫所针对的重要皮质下神经核团靶点进行综述,以为发掘癫痫治疗新靶点提供帮助。

胎儿期大脑皮质发育异常MRI征象分析

目的探讨MRI对胎儿期大脑皮质发育异常(malformations of cortical development,MCDs)的诊断价值。方法选取54例胎儿期MCDs的MR图像,总结其MRI影像特征。结果54例MCDs患者中,小头畸形10例,半侧巨脑畸形5例,灰质异位5例,无脑回畸形9例,多小脑回畸形11例,脑裂畸形8例,局灶性皮层发育不良6例。MRI征象:外侧裂异常45例;皮层发育节点延迟28例;不成熟或异常脑沟33例;侧脑室形态异常44例;皮质厚度异常36例;脑沟、回异常39例;大脑半球形态异常42例;皮层结构简化26例;皮层信号不连续8例;皮层出现异常结节灶8例。结论在MCDs的产前诊断影像检查中,MRI较超声检查有一定的优势,可提高胎儿期MCDs诊断率。

新生SD大鼠大脑皮质神经元的原代培养及鉴定

背景:培养神经元的质量是研究中枢神经系统疾病的关键所在,但培养方法一直没有统一的标准。目的:探究取材部位及阿糖胞苷处理对原代培养神经元活性、纯度及成熟度的影响。方法:选取新生24 h内的SD乳鼠,取大脑皮质表面2.0-3.0 mm处细胞,培养后24,48,72 h,用5μmol/L或10μmol/L阿糖胞苷处理48 h;另取全部大脑皮质细胞,培养后48 h用5μmol/L阿糖胞苷处理48 h。培养至第7天,倒置显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8法检测阿糖胞苷对神经元活性的影响,免疫荧光和Western blot检测神经元的纯度及成熟度。结果与结论:①倒置显微镜:10μmol/L阿糖胞苷24,48,72 h组神经元密度分别低于同时间下的5μmol/L阿糖胞苷组,该6组神经元突起相互之间均可连接成紧密的网状结构,神经元胞体丰满并充满折光特性;全皮质组细胞密度低于正常对照组,并可明显观察到非神经元;②CCK-8检测:各阿糖胞苷组细胞活性均低于正常对照组(P<0.001),10μmol/L阿糖胞苷24,48,72 h组神经元活性低于同时间下的5μmol/L阿糖胞苷组(P<0.05),5μmol/L阿糖胞苷24 h组神经元活性低于5μmol/L阿糖胞苷48,72 h组(P<0.01);③免疫荧光染色:各阿糖胞苷组神经元纯度大于正常对照组、全部皮质组(P<0.001),各阿糖胞苷组神经元纯度无差异;④Western blot检测神经元特异性烯醇化酶蛋白表达:各阿糖胞苷组神经元成熟度高于正常对照组(P<0.05),其中以5μmol/L阿糖胞苷48 h组成熟度最高;⑤结果表明:取新生24 h内大鼠大脑皮质表面2.0-3.0 mm处皮质,培养后48 h加入5μmol/L阿糖胞苷处理得到的神经元活性、成熟度和纯度较好。

儿童及青少年骨成熟度对大脑皮质髓鞘发育的影响

目的观察骨成熟度对儿童及青少年大脑皮质髓鞘发育的影响。方法前瞻性纳入94名接受骨龄及脑部高分辨率MR检查的儿童及青少年,根据骨龄与实际年龄分为骨龄偏低组(n=20)、正常组(n=30)及偏高组(n=44);计算68个脑区T1W/T2W比值,以之表征脑皮质髓鞘含量;对性别、年龄等因素加以校正后,采用线性回归模型分析骨发育状态对各脑区皮质髓鞘发育的影响。结果3组间8个脑区皮质T1W/T2W比值差异有统计学意义(P均<0.05);骨龄偏高组左侧扣带回峡部、右侧眶额部皮质外侧及右侧缘上回皮质T1W/T2W比值低于,而左侧额中回上部、右侧枕外侧T1W/T2W比值高于骨龄正常组(P均<0.05);骨龄偏低组左侧中央后回、双侧内嗅区皮质T1W/T2W比值高于骨龄正常组(P均<0.05)。结论骨成熟度影响多个脑区皮质髓鞘发育,并具有区域异质性;骨龄偏高对皮质髓鞘发育的影响可能更为复杂。

紫云英苷抑制APP/PS 1小鼠大脑皮质神经元凋亡

【目的】探讨紫云英苷(AST)对APP/PS1转基因小鼠大脑皮质神经元凋亡的影响。【方法】将18只6月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为APP/PS1、APP/PS1+40 mg/kg AST、APP/PS1+20 mg/kg DNP(Donepezil,DNP)三组,每组各6只动物。同时另选6只同月龄C57BL/6雄性小鼠作为正常对照组(Control)。腹腔注射给药AST,每日一次,连续给药一个月后,Tunel染色法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡情况;免疫荧光染色法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase9、Cleaved-Caspase3表达情况;Western blot法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内Bax、Bcl-2、Caspase9及Caspase3表达水平的变化。【结果】Tunel染色结果显示,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均可减少APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡,其中AST抑制效果尤为明显。免疫荧光染色结果表明,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均抑制APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元中Bax、Caspase9及Cleaved-Cas⁃pase3的表达,增加Bcl-2的表达。Western blot结果进一步证实,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均可下调APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元Bax(P<0.05,P<0.05)、Caspase9(P<0.005,P<0.05)及Caspase3(P<0.0001,P<0.0001),上调Bcl-2(P<0.05,P<0.05)。【结论】AST能够抑制APP/PS1小鼠大脑皮质神经元凋亡。

妊娠期高碘对子代大鼠甲状腺功能和大脑皮质超微结构的影响

目的建立妊娠期碘过量模型,观察过量碘对子代大鼠甲状腺功能和大脑皮质形态学的改变,探讨妊娠期碘过量对子代大鼠甲状腺和大脑发育的影响。方法选取断乳两周的SPF级雌性Wistar大鼠90只,随机分成适碘对照(normal iodine,NI)组、轻度碘过量(mild iodine excess,MIE)组和严重碘过量(severe iodine excess,SIE)组,每组30只,每组动物均给予低碘动物饲料,通过饮用含不同浓度碘化钾(KI)的去离子水建立不同碘摄入模型,碘酸钾浓度分别为183、2283和11617μg/L,干预3个月后交配受孕。子代大鼠于21天腹主动脉取血,检测游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)和促甲状腺素(thyrotropin,TSH)激素水平,同时每组各取7只子代大鼠的大脑皮质采用透射电镜观察神经元超微结构。结果SIE组、MIE组母鼠尿碘水平分别为2368.7和644.2μg/L,均显著高于NI组286.8μg/L(P<0.05);SIE组子代大鼠血清FT3水平与NI组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);SIE组、MIE组子代大鼠血清FT4和TSH水平与NI组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示,MIE组和SIE组子代大鼠大脑皮质神经元内部均出现不同程度损伤,可见神经细胞核肿胀、扩张,部分线粒体重度水解、出现空泡样变,粗面内质网囊腔肿胀,有髓神经髓鞘分层,突触小泡节段不完整、变窄、轴突出现水肿等病理性改变。结论过量碘摄入可影响子代大鼠甲状腺功能,且妊娠期轻度碘过量和严重碘过量均可对子代大鼠大脑皮质造成病理性损伤,进而影响子代脑发育及功能。

不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质功能区的微血管形态计量学分析

目的 观察不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51显微镜结合Image-Pro Plus 5.1进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5.1软件进行微血管长度密度(mlcrovascular length density, Lv)、微血管表面积密度(microvascular surface area density, Sv)、微血管体积密度(microvascular volume density, Vv)的定量分析。结果 碱性磷酸酶在成年组和老年组的大脑皮质微血管内表达丰富,在幼年组略有表达,而在乳鼠组无表达;软脑膜血管进入皮质的方式分T字形、Y字形、大弧形和小弧形四种;相同年龄不同部位的Lv、Sv和Vv显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0.05)。老年组的各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论 C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区微血管内碱性磷酸酶的表达随年龄增长而增多,成年时达到峰值,其脑内微血管构筑为脑血管疾病及模型制备提供形态学参数。

人端粒酶反转录酶基因转染人胚胎大脑皮质神经元的凋亡

背景:人端粒酶反转录酶重组腺病毒转染原代培养的人胚胎大脑皮质神经元,可以促进细胞生存,抑制凋亡。目的:观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)诱导人胚胎大脑皮质神经元凋亡的影响。方法:人胚胎大脑皮质神经元原代培养后,分为3组:对照组、Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组。Aβ25-35组和人端粒酶反转录酶组细胞在培养144 h后,用Aβ25-35 5μmol/L干预24 h。人端粒酶反转录酶组在Aβ25-35 5μmol/L干预72 h进行人端粒酶反转录酶基因转染。结果与结论:原代培养的人胚胎大脑皮质神经元培养7 d后,出现凋亡细胞,而Aβ25-35干预后使凋亡细胞数量增加,而人端粒酶反转录酶可防止Aβ25-35诱导的人胚胎大脑皮质神经元的凋亡。

微波辐射对大鼠大脑皮质突触结构和神经递质含量的影响

目的探讨微波辐射对大鼠大脑皮质突触结构和神经递质含量的影响。方法采用10、30和50mW/cm2微波辐射Wistar大鼠,辐射后6h通过透射电镜观察大鼠大脑皮质突触结构改变;采用高效液相色谱仪检测大脑皮质氨基酸递质含量改变,采用分光光度法检测乙酰胆碱递质含量以及胆碱酯酶活性的变化。结果10、30、50mW/cm2微波辐射均可引起大脑皮质突触囊泡堆积、活性区延长、突触后致密物和突触曲率增加以及突触穿孔。10mW/cm2辐射后6h,天门冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)含量增加(P<0.01);30mW/cm2辐射后6h,大脑皮质Gly含量减少(P<0.05);50mW/cm2辐射后6h,Asp、谷氨酸(Glu)、Gly、γ-氨基丁酸(GA-BA)含量均增加(P<0.01)。10mW/cm2辐射后6h,大脑皮质乙酰胆碱含量增加(P<0.05),胆碱酯酶活性降低(P<0.01);30和50mW/cm2辐射后6h,乙酰胆碱含量增加,胆碱酯酶活性升高(P<0.01)。结论微波辐射可引起大脑皮质突触结构损伤,氨基酸递质和乙酰胆碱代谢紊乱,进而可能影响正常的脑功能。

新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定

采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察，建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2．5μg／mL阿糖胞苷（Ara-C）对培养3d的神经元进行24h干预，去除神经胶质细胞、成纤维细胞、神经干细胞等杂质细胞，以提高神经元产率；用Nissl’s染色法进行神经元鉴定；利用微量滴定（MTT）法测定了一个培养周期（约10d）的神经元活性分布。光学显微镜观察结果表明，培养至第4h绝大多数神经元已贴壁生长，胞体上可见1～2个细小突起；培养至第3d、第6d时，Nissl’s染色结果显示，加Aralc能显著提高神经元纯度（≥929／6）；MTT结合形态学观察结果表明，神经元培养至第6d时活性最强，细胞呈卵圆形、蜘蛛状、锥体状等多种形态，细胞胞体饱满，光晕明显，神经网络形成完整。

桃红四物汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质神经元Caspase-3与p53表达的影响

目的:探讨桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质神经元Caspase-3与p53表达的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、桃红四物汤低、中、高剂量组(0.7 g/kg、1.4 g/kg、2.1g/kg)共6组。采用改良后的Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注模型,缺血90分钟再灌注24小时后,桃红四物汤各剂量组分别以桃红四物汤低、中、高剂量灌胃绐药量为1 ml/100 g,正常组和假手术组以等容量生理盐水灌胃。至第8天时将各组大鼠处死并取脑。通过2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法观察各组大鼠脑梗死体积及梗死体积率;TUNEL染色法显示大脑皮质凋亡神经元的形态和数量,免疫组织化学染色法观察半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)与p53的表达情况。结果:与模型组比较,桃红四物汤各剂量组均能降低大鼠脑梗死体积与梗死体积率(P<0.01);减少大脑皮质顶叶区凋亡神经元(P<0.01),降低大脑皮质顶叶区神经元Caspase-3与p53的表达(P<0.01);并且其治疗效果随桃红四物汤给药剂量的增加而增强(P<0.01)。结论:桃红四物汤能够抑制脑缺血再灌注损伤后大鼠大脑皮质神经元Caspase-3与p53的表达。

电热隔药贴灸对老年前期大鼠大脑皮质单胺类神经递质含量的影响

目的 :探讨“神阙”延缓衰老的作用机理。方法 :取 18～ 2 0月龄老年前期SD大鼠随机分组治疗 ,采用荧光比色法测定单胺类神经递质。结果 :电热隔药贴灸“神阙”穴能显著提高老年前期大鼠大脑皮质单胺类神经递质的含量 ,与老年前期空白组比较差异具有显著性意义 ,与传统隔药灸组比较差异无显著性意义。结论 :电热隔药灸“神阙”穴能够对老年前期大鼠大脑皮质单胺类神经递质含量的增龄性改变产生良性影响 ,并与传统隔药灸法的作用相似。

四君子汤对衰老小鼠肝和大脑皮质影响的透射电镜观察

应用透射电镜观察了四君子汤对衰老小鼠的肝和大脑皮质超微结构的影响，结果表明四君子汤能明显改善衰老小鼠的肝和大脑皮质的超微结构，提示四君子汤通过补脾益气，使脏器不断得到气血滋养，纠正脏腑虚衰，促使机体健康长寿。

胎鼠大脑皮质神经元的体外培养及鉴定

为了建立SD大鼠大脑皮质神经元的分离、培养及免疫细胞化学鉴定技术,本研究通过分离孕15 d SD胎鼠大脑皮质组织,经机械吹打后,加入含有5％马血清、5％小牛血清的MEM培养基接种在24孔培养板中进行原代培养,并于第3 d在培养基中加入阿糖胞苷抑制胶质细胞的生长,于第9 d将细胞固定后采用免疫细胞化学技术检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果表明从孕15 d SD胎鼠大脑皮质分离的神经元纯度高,生长旺盛,形态典型,90％以上表达NSE免疫阳性。该结果提示我们建立的培养大鼠大脑皮质神经元的方法易于标准化操作,结果稳定,值得推广应用。