大苞雪莲乙醇提取物对模拟高原缺氧小鼠物质代谢的影响

目的模拟高原低压低氧动物缺氧模型,从改善缺氧小鼠水、糖、脂肪、蛋白质等物质代谢的角度探讨大苞雪莲乙醇提取物抗高原缺氧作用机制。方法将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺阳性药对照组和大苞雪莲乙醇提取物高、中、低3个剂量组,单次腹腔注射给药,给药30 min后,将各组小鼠分别放入低压氧舱中,模拟海拔6000 m低压低氧环境,维持6 h,进行心肌和脑组织常规病理学观察,并检测器官含水量、脏器指数、糖代谢、蛋白质代谢和脂肪代谢等指标变化情况。结果与正常对照组相比,缺氧模型组小鼠器官含水量明显升高,脏器指数下降,血糖、肝糖原和肌糖原升高,甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量下降(P<0.01),蛋白质含量下降;与缺氧模型组相比,大苞雪莲乙醇提取物各剂量组缺氧小鼠的器官含水量有所下降,脏器指数显著提高,血糖降低,肝糖原升高,肌糖原无明显变化,TG、TC含量降低,HDL-C含量上高(P<0.01),蛋白质含量升高。结论大苞雪莲乙醇提取物能减轻模拟高原急性缺氧小鼠心肌、脑和肺脏组织水肿程度,有效调节缺氧小鼠的物质代谢,降低基础代谢水平,保证机体生存所需要的能量。

正交试验法优选大苞雪莲总黄酮的提取工艺

目的优选大苞雪莲总黄酮的提取工艺。方法采用L9(34)正交试验,以浸膏得率和雪莲总黄酮含量为指标,考察提取溶剂浓度、溶剂用量、提取时间和提取次数4个因素对提取效果的影响,优选工艺条件。结果最佳提取工艺为10倍量70%乙醇、提取2次,每次2 h,总黄酮含量为12.53%,芦丁含量为2.46%,出膏率为18.20%。结论该提取工艺具有稳定性好和简便易行的优点,适合工业化大生产。

大苞雪莲内酯的分子结构和晶体结构

新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar. et Kin)为我国西北地区名贵中草药,可用于治疗风湿性关节炎和妇科疾病,从中分离得到一种新的倍半萜内酯的β葡萄糖苷,命名为大苞雪莲内酯(右图),其结晶为无色透明针状,m.p.219～221℃。

大苞雪莲对中华鳑鲏耐缺氧能力的影响

在缺氧水中，把中华鳑鲏分别放在不同剂量的大苞雪莲水溶液中进行密闭缺氧试验，观察中华鳑鲏的存活时间，探讨大苞雪莲对中华鳑鲏耐缺氧能力的影响。结果显示，在13～16℃水温下，不同剂量的大苞雪莲水溶液均可延长中华鳑鲏的存活时间，有的剂量达到显著效果（P＜0．05）或极显著差异（P＜0．01）。说明一定剂量的大苞雪莲水溶液可显著提高中华鳑鲏的耐缺氧能力。

大苞雪莲四种成分抗癌作用研究

用体外细胞培养３Ｈ－ＴｄＲ参入法，芦丁ｒｕｔｉｎ及ｊａｃｅｏｓｉｄｉｎ、ｈｉｓｐｉｄｕｌｉｎ两种黄酮对腹水型肝癌细胞的平均抑制率分别达２３．８％，４６．４３％，４０．０６％。

大苞雪莲抗缺氧有效成分对模拟高原缺氧小鼠物质代谢的影响

目的研究大苞雪莲(又名新疆雪莲、天山雪莲,Saussurea involucrata)抗缺氧有效成分(石油醚活性部位及其主要单体成分二十八烷)对模拟高原缺氧小鼠水、糖、脂肪、蛋白质等物质代谢的影响。方法将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺阳性药对照组、大苞雪莲石油醚部位组和二十八烷组,单次尾静脉注射给药,给药20min后,将各组小鼠分别放入低压氧舱中,模拟海拔6 000m低压低氧环境,维持8h,检测器官含水量、脏器指数、糖代谢、蛋白质代谢和脂肪代谢等指标变化情况。结果给小鼠预先尾静脉注射石油醚部位200mg/kg和二十八烷100mg/kg,可以通过降低脏器中含水量抑制急性高原缺氧引起的心、脑、肺组织水肿(P<0.05或P<0.01),抑制血糖、肌糖原、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平的升高(P<0.05或P<0.01),阻止肝糖原、心肌和脑组织蛋白含量的降低(P<0.05或P<0.01)。结论大苞雪莲石油醚部位和二十八烷能有效调节缺氧小鼠的物质代谢,降低基础代谢水平,保证机体生存所需能量。

大苞雪莲有效成分的抗缺氧药效学研究

目的研究大苞雪莲有效成分(石油醚活性部位及其主要单体成分二十八烷)的抗缺氧药效学。方法首先采用常压密闭缺氧耐受力实验和急性减压缺氧耐受力实验联合评价大苞雪莲石油醚部位和二十八烷的抗缺氧活性,然后采用3种化学中毒缺氧模型(氰化钾、亚硝酸钠、盐酸异丙肾上腺素)进行其抗化学中毒缺氧活性的药效学评估。结果大苞雪莲石油醚部位和二十八烷可以有效延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间(P<0.01),降低急性减压缺氧小鼠的死亡率(P<0.01),且具有剂量依赖关系;化学中毒缺氧药效学研究表明,石油醚部位和二十八烷在化学中毒缺氧实验中的小鼠存活时间均明显大于乙酰唑胺(P<0.05)。结论大苞雪莲石油醚部位和二十八烷具有良好的抗缺氧活性。

复方雪莲胶囊中大苞雪莲内酯及其β-D-葡萄糖苷和大苞雪莲碱的LC-Q-TOFMS法鉴别

建立了液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(LC-Q-TOF MS)法鉴别复方雪莲胶囊中的大苞雪莲内酯及其-D-葡萄糖苷和大苞雪莲碱。采用Zorbax RRHD C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子化(ESI)源,以正离子模式采集MS与MS/MS信号。以去氢木香内酯和脯氨酸为参照物,鉴别雪莲花药材和复方雪莲胶囊中的大苞雪莲内酯及其-D-葡萄糖苷和大苞雪莲碱。

大苞雪莲总黄酮体外抗氧化活性

目的:研究大苞雪莲总黄酮体外自由基清除能力及抗氧化活性。方法:采用体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·),2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐阳离子自由基(ABTS+·),超氧阴离子(O-2·),羟基自由基(·OH),一氧化氮(NO),以及测定金属螯合能力、还原力、总抗氧化能力共8种方法对大苞雪莲总黄酮的自由基清除能力及抗氧化活性进行了评价。每组实验平行3次。结果:大苞雪莲总黄酮在一定浓度下能够有效地清除DPPH·,ABTS+·,O-2·,·OH,NO,对DPPH·,ABTS+·,·OH,NO的半数清除质量浓度分别为52.52,71.71,60.38,203.95 mg·L-1,对超氧阴离子的半数清除质量浓度为271.06 mg·L-1,小于维生素C(VC,380.10 mg·L-1),半数金属螯合质量浓度为184.52 mg·L-1,并且具有一定的还原力和总抗氧化能力。结论:大苞雪莲总黄酮具有较强的体外自由基清除能力及抗氧化活性,是一种具有较高研究价值和潜力的天然抗氧化物质。

大苞雪莲醇提物的抗缺氧作用及其初步机制研究

目的:研究大苞雪莲醇提物的抗缺氧作用及其机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为缺氧模型组大苞雪莲醇提物高低剂量(500,250 mg·kg-1)组及阳性药(乙酰唑胺300 mg·kg-1)对照组,单次ip给药,通过常压密闭缺氧试验、急性减压缺氧试验,化学物质中毒缺氧试验,观察ip大苞雪莲醇提物,小鼠在不同缺氧状态下的存活时间;并模拟高原低压低氧环境测定小鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)、乳酸(LD)含量。结果:与缺氧模型组相比,大苞雪莲醇提物5002,50 mg·kg-1均能显著延长不同缺氧状态下小鼠的存活时间(P<0.01),其中常压密闭缺氧模型小鼠存活时间及延长率分别为:(37.09±4.25)min,(32.36±4.22)min及44.36%,23.93%。血浆生化指标测定结果表明,大苞雪莲醇提物500,250 mg·kg-1均能提高模拟高原低压低氧环境下小鼠血浆中SOD(126.31±19.18),(120.45±13.78)U.mL-1和LDH(11 334±212.3),(10 882±173.5)U.L-1活性,降低MDA(3.21±0.52),(3.52±0.33)μmol.L-1和LD(2.37±0.44),(2.92±0.36)nmol.L-1含量(P<0.01)。结论:大苞雪莲醇提物具有明显的抗缺氧作用,其机制可能与降低血乳酸水平、促进细胞无氧酵解和改善体内氧自由基代谢的作用有关。

大苞雪莲石油醚部位对缺氧大鼠脑组织的保护作用及其机制研究

目的:研究大苞雪莲石油醚部位(petroleum ether extract of Saussurea involucrata,PESI)对常压密闭缺氧大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法:首先采用常压密闭缺氧模型进行缺氧大鼠的PESI剂量依赖性实验,给药剂量分别为125,250,500 mg·kg-1,单次腹腔注射给药,最终确定的最佳给药剂量为PESI高剂量。然后取90只雄性Wistar大鼠随机分为缺氧模型组、乙酰唑胺250 mg·kg-1组和大苞雪莲石油醚部位高剂量组,每组又按不同缺氧时间分为3个亚组,各亚组10只大鼠。采用与上述相同的方法缺氧和给药,并于缺氧处理0,3,6 h后处死大鼠,取脑组织进行常规组织学观察和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)免疫组化染色,并用Real-time RT-PCR检测HIF-1α,促红细胞生成素(EPO),血红素加氧酶(HO-1)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因表达情况,用蛋白印迹法检测HIF-1α蛋白的表达情况。结果:缺氧模型组脑组织随缺氧时间的延长而出现严重的病理损伤,乙酰唑胺组和PESI高剂量组的损伤情况则明显减轻。基因表达和蛋白印迹检测均发现,PESI高剂量抑制HIF-1α的表达,单纯基因表达检测发现,PESI高剂量增强EPO和HO-1 mRNA的表达,但抑制Caspase-3 mRNA的表达。结论:PESI对常压密闭缺氧大鼠脑组织的保护机制可能与其抑制HIF-1α表达、增强血液输氧能力和抗脑细胞凋亡有关。

培养大苞雪莲（S．involucrata）毛状根生产雪莲黄酮类有效成分的方法

该发明专利是一种利用大苞雪莲雪莲毛状根细胞系及液体培养毛状根生产雪莲黄酮类化合物的方法。

大苞雪莲多糖清除自由基及抗疲劳作用

从新疆大苞雪莲花中首次提取到多糖。用氮蓝四唑比色法测得新疆大苞雪莲花多糖清除超氧阴离子自由基的半清除浓度为２２．０μｇ·ｍｌ＾－１，９５％可信限为１９．９－２４．１μｇ·ｍｌ＾－１。多糖能明显抑制小鼠肝匀浆硫代巴比妥酸反应物的产生，ＩＣ５０为２．３ｍｇ／ｇ鲜肝重，９５％可信限为２．０５－２．５５ｍｇ／ｇ鲜肝重。多糖ｉｐ２５ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｄ＾－１×５ｄ可降供应上鼠耗氧量３４．４％。

雪莲有效成分对高原缺氧小鼠心脑组织的保护作用

目的:研究大苞雪莲石油醚部位(PESI)及其活性单体成分二十八烷对高原缺氧小鼠大脑和心肌组织的保护作用。方法:将50只BALB/c雄性小鼠随机分为健康对照组、模型对照组、乙酰唑胺组(乙酰唑胺200 mg/kg)、PESI组(PESI200 mg/kg)和二十八烷组(二十八烷100 mg/kg),每组10只,单次尾静脉注射给药。采用低压低氧动物实验舱模拟海拔6000 m高原环境,减压缺氧8 h。HE染色观察高原缺氧小鼠心肌和脑组织显微结构的变化;采用WST-1法、ABTS法、硫代巴比妥酸法检测小鼠血浆、心肌和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛含量;采用比色法和微板法检测小鼠血浆、心肌和脑组织中乳酸含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用比色法检测小鼠心肌和脑组织中ATP含量和ATP酶活性。结果:PESI和二十八烷均能减轻高原缺氧小鼠心肌和脑组织的病理损伤;增强血浆、心肌和脑组织中SOD活性、T-AOC、LDH活性,降低丙二醛、乳酸含量;增加心肌和脑组织中ATP含量;同时增强心肌组织钠钾ATP酶、镁ATP酶、钙ATP酶、钙镁ATP酶活性,增强脑组织镁ATP酶、钙镁ATP酶活性。结论:PESI及二十八烷均能减轻高原缺氧小鼠心肌和脑组织损伤,提高机体抗氧化能力,减少自由基损伤,促进细胞无氧酵解,缓解缺氧导致的能量缺乏和代谢障碍。