大茴香醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞分化和凋亡的影响

目的观察大茴香醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用。方法用不同浓度的3（3-吡啶）-4-[（4-甲氧基-苯亚甲基）氨基]-5-甲硫基-1，2，4-三唑（LH-38）与BEL．7402细胞体外培养。四甲基偶氮唑蓝【MTT）法检测细胞增殖和LH．38对细胞增殖的抑制作用。用Hoechst33258荧光染色细胞形态学和AnnexinV／PI双标记技术观察细胞凋亡变化。放射免疫法检测BEL-7402细胞甲胎蛋白（α-FP）和白蛋白（Alb）的分泌量，以了解细胞分化状态。蛋白质免疫印迹（Western blotting）半定量分析Caspase-3和p53的表达。可见光法测定超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力。结果LH-38在0．1～10μmol．L-1的浓度范围能抑制细胞增殖，且抑制率随浓度和时间的增加而增高。10和1．0μmol．L-1的LH-38使细胞Alb、Caspase-3和p53的蛋白表达明显增加，α—FP含量下降。SOD活性升高（P〈0．01），而CAT活性降低，差异有显著性fP〈0．01，P〈0．05）。药物浓度在10μmol．L-1作用48h，BEL-7402细胞皱缩，呈现凋亡各期改变，细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0．05）。结论大茴香醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌BEL．7402细胞具有抗增殖、促分化和凋亡作用，作用可能与过氧化氢的氧化损伤作用有关。

香草醛缩氨基均三唑席夫碱对肝癌细胞分化相关酶和蛋白的影响

目的：研究香草醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导分化作用。方法：用不同剂量的3-吡啶-3-基-4-[（4-羟基-3-甲氧基-苯亚甲基）氨基]-5-甲硫基-l，2，4-三唑（LH-37）与SMMC-7721细胞共同培养，以MTF法检测细胞增殖和LH-37对细胞增殖的抑制作用；镜下观察细胞形态改变；采用酶联免疫法检测细胞甲胎蛋白含量，金氏法检测细胞碱性磷酸酶活性的变化。结果：LH-37在1×10^-5-1×10^-3mol／L的浓度范围均能抑制细胞增殖且抑制率随浓度的的增加而增高（P〈0．05或P〈0．01），细胞形态和结构向正常肝细胞方向逆转，1×10^-5mol／L和1×10^-6mol／L的LH-37均可使细胞甲胎蛋白含量明显下降，碱性磷酸酶活性明显升高。结论：香草醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌SMMC-7721细胞具有抗增殖、促分化作用。

胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对BEL-7402细胞凋亡的诱导作用

目的:研究胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对BEL-7402人肝癌细胞凋亡的诱导作用。方法:分别用不同浓度胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱处理细胞;采用改良MTT法检测细胞增殖抑制率;荧光显微镜观察凋亡细胞形态;免疫组织化学检测细胞内激活型caspase-3表达;Annecxin-Ⅴ和PI双染流式细胞分析测定凋亡细胞数。结果:胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱可抑制细胞增殖并且抑制率呈浓度依赖性,IC50为4.61×10-5mol.L-1。1×10-5mol.L-1药物作用48 h后,细胞皱缩,呈现凋亡各期改变,caspase-3阳性细胞明显增加,细胞凋亡率为(24.94±5.95)%,对照组为(2.11±5.6)%,两组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对BEL-7402人肝癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。

胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞分化和凋亡的影响

目的观察胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用。方法用不同浓度的1－（3，4-二氧亚甲基）苯甲亚氨基－2－吡啶－3－基－5－甲硫基－[1，2，4]三唑（LH－36）与BEL－7402细胞体外培养。MTT法检测细胞增殖和LH－36对细胞增殖的抑制作用。用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡变化。免疫细胞化学检测细胞内激活型Caspase-3表达。反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测细胞甲胎蛋白（α—FP）和白蛋白（Alb）mRNA表达，以了解细胞分化状态。蛋白质免疫印迹分析P53的表达。可见光法测定超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活力。结果LH－36在0．1μmol／L－10μmol／L的浓度范围能抑制细胞增殖，且抑制率随浓度和时间的增加而增高。0．1μmol／L和1．0μmol／L的LH－36使细胞α—FPmRNA表达量明显下降，Alb表达量增高，P53的蛋白表达明显增加，SOD活性升高（P〈0．01），而CAT活性降低，差异有显著性（P〈0．01，P〈0．05）。药物浓度在10μmol／L作用48h，BEL－7402细胞皱缩，呈现凋亡各期改变，Caspase-3阳性细胞明显增加，细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0．05）。结论胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌BEL-7402细胞具有抗增殖、促分化和凋亡作用，作用可能与过氧化氢的氧化损伤作用有关。