理化因素对大蒜凝集素生物活性的影响

大蒜（Alliumsativum L.）鳞茎经浸取、硫酸铵分级沉淀、离子交换柱和凝胶过滤得到凝集素（Alliumsativum L.Lectin,ASL）样品。ASL能凝集兔血红血球和鸡血红血球,使鱼血红血球发生溶血,其中对兔血红血球的凝集活性最强。大蒜凝集素在70℃以上的温度加热10 min才失活,表明大蒜凝集素有较强的热稳定性。凝集活性最适pH为4.5~6.4,其凝集活性部分依赖于金属离子,且大蒜凝集素的凝集活性能被变性剂所抑制。

蒜氨酸酶与凝集素的分离纯化及质谱鉴定分析

对大蒜中的蒜氨酸酶和凝集素分离纯化并进行质谱分析。首次采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析法对大蒜中蒜氨酸酶和凝集素进行了分离纯化,并采用SDS-PAGE电泳、MALDI-TOF/MS质谱法对目标蛋白进行了鉴定。结果表明:以Tris-HCl作为浸提液,经DEAESepharose Fast Flow柱纯化的蒜氨酸酶和凝集素可达到电泳纯,质谱结果表明,所分离目标物质为蒜氨酸酶和大蒜凝集素,其分子质量分别为54.147 ku和12.152 ku。