大蒜硒多糖对紫外线诱发的晶状体损伤的抑制

紫外线过量照射是产生白内障的重要原因之一。研究证实，晶状体蛋白质在被波长为２００～４００ｎｍ的光源照射后，蛋白质中的色氨酸不断减少，而光敏产物ＮＦＫ（Ｎ－ｆｏｒｍｙｔｋｙｎｕｒｅｎｉｎｅ）的荧光增强。由于紫外线照射，小分子蛋白质不断交联、聚合，造成高分子蛋白质比例明显增加而使晶状体浑浊，产生白内障。从湖北恩施地区所产的富硒大蒜中经提取、除蛋白及凝胶色谱法（ＳｅｘｈａｄｅｘＧ２５－Ｇ２００）分离纯制得到的大蒜硒多糖能够阻止高分子蛋白质的形成，在予防紫外照射对晶状体的氧化损伤有重要的保护作用。对照实验中发现其抗氧化损伤作用比Ｖｉｔｃ强１００倍。这为研究由紫外线诱发的白内障治疗药物提供了一定的依据。

硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制鸡的颉颃作用

为探究硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制的颉颃作用,将336只11日龄非免疫健康罗曼雏鸡随机均分为7组:空白对照组(BC)、免疫对照组(VC)、环磷酰胺对照组(Cy)、sGPS3、sGPS5、sGPS6和药物对照组(APS),每组6个重复,每个重复8只鸡。BC组和VC组注射0.5mL生理盐水,其余组均肌肉注射8mg/mL环磷酰胺0.5mL,每天1次,连续3d;14日龄时,除BC组外,其余组均用新城疫疫苗免疫,同时3个硒大蒜化多糖组分别注射0.5mL浓度为1mg/mL的sGPS3、sGPS5、sGPS6,APS组肌肉注射黄芪多糖注射液0.5mL,Cy组、VC组和BC组注射生理盐水0.5mL,每天1次,连续3d,28日龄二免。分别于首免后的第7、14、21、28天,每组随机抽取6只罗曼鸡翼静脉采血,分离血清,β-微量法检测血清ND-HI抗体效价、ELISA法检测血清γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)含量。称量体重后采集胸腺、脾脏和法氏囊组织并称重,计算免疫器官指数。结果显示,各给药组的血清ND-HI抗体效价、血清IFN-γ和IL-2含量、法氏囊指数均显著高于Cy组(P<0.05);sGPS6组血清抗体效价、IFN-γ含量在28d,血清IL-2含量在21、28d均显著高于其余各组(P<0.05);在免疫后21、28d,4个给药组中sGPS6组体重、法氏囊指数最高,显著高于其余3个给药组(P<0.05);在免疫后28d,4个给药组中sGPS6组胸腺指数、脾脏指数最高,显著高于其余3个给药组(P<0.05)。结果表明,硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致的免疫抑制具有颉颃作用,其中sGPS6组的活性最高,可作为新型免疫抑制颉颃剂的候选药。

硒化大蒜多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

【目的】研究硒化大蒜多糖(sGPS)对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响,以期为硒化大蒜多糖的作用挖掘和临床应用提供依据。【方法】依次通过分离、纯化得到大蒜多糖(GPS),并经硝酸-亚硒酸钠硒化修饰得到sGPS3、GPS5和sGPS6。以小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,用6.25、12.5、25、50、100μg/mL sGPS3、GPS5、sGPS6及10μg/mL脂多糖(LPS组)处理小鼠腹腔巨噬细胞48 h,同时设置不加药物的细胞为对照组,用中性红法测定其吞噬功能,CCK-8法测定其增殖能力,筛选出活性最好的硒化大蒜多糖;然后用ELISA法检测活性最好的硒化大蒜多糖对巨噬细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(IL-12)含量的影响;再通过小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测定空白对照组(生理盐水)及高(2 mg/mL)、中(1 mg/mL)、低(0.5 mg/mL)剂量活性最好的硒化大蒜多糖的吞噬指数与吞噬百分率。【结果】除6.25μg/mL sGPS3外,6.25、12.5、25、50和100μg/mL sGPS3、sGPS5、sGPS6组小鼠腹腔巨噬细胞的A490 nm值均显著高于对照组(P<0.05),其中,50和100μg/mL sGPS6组的A490 nm值显著高于LPS组(P<0.05),因此选用sGPS6进行后续试验;12.5、25、50和100μg/mL sGPS6组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著高于对照组,25、50和100μg/mL sGPS6组小鼠腹腔巨噬细胞上清中IFN-γ、IL-12显著高于对照组(P<0.05),其中100μg/mL sGPS6组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-12显著高于LPS组(P<0.05)。2和1 mg/mL sGPS6组的吞噬指数和吞噬率均显著高于空白对照组(P<0.05)。【结论】硒化大蒜多糖能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和增殖能力,促进细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌。

硒化修饰提高大蒜多糖体外抗新城疫病毒活性的研究

旨在研究硒化修饰提高大蒜多糖的体外抗新城疫病毒(NDV)活性并筛选出体外抗NDV活性较好的硒化大蒜多糖。依次通过水提醇沉法、Sevage法去蛋白得到大蒜多糖(GPS),并采用硝酸-亚硒酸钠法对大蒜多糖进行硒化修饰,得到9个硒化大蒜多糖sGPS_(1)~sGPS_(9)。以鸡胚成纤维细胞(CEF)为作用对象,采用MTT法通过先加硒化大蒜多糖,或先加NDV,或两者同时加入3种方式比较9个硒化大蒜多糖抗NDV侵入、复制、直接抑制NDV的作用,同时设置细胞对照(CC)和病毒对照(VC),并计算病毒抑制率;筛选出活性较好的sGPS_(3)、sGPS_(5)、sGPS_(6)测定其对NDV感染CEF后细胞凋亡、细胞周期的影响以及其对鸡胚的存活数的影响,同时设置GPS对照、VC对照、空白对照(BC)。结果表明,GPS_(5)、sGPS_(6)组的细胞凋亡率、处于S期的细胞百分数显著低于VC组和GPS组(P<0.05);sGPS_(6)组36 h、48 h的细胞凋亡率显著小于sGPS_(3)、GPS_(5)组(P<0.05),处于S期的细胞百分数小于sGPS_(3)、sGPS_(5)组,sGPS_(3)组在36 h、sGPS_(5)组在24 h和36 h、sGPS_(6)组在3个时间点的鸡胚死亡数均显著小于GPS组(P<0.05),sGPS_(6)组在3个时间点的鸡胚死亡数均为最低。综上,硒化修饰能提高大蒜多糖抗NDV的活性,其机制可能与阻止NDV侵入、抑制NDV诱导CEF凋亡有关。其中sGPS_(6)的活性最强,可作为抗NDV的候选药。

大蒜多糖及其硒化产物抗氧化活性的比较研究

目的比较大蒜多糖与硒化大蒜多糖对经过氧化氢(H2O2)诱导损伤的大鼠嗜铬瘤细胞株(PC12)的保护作用。方法用H2O2建立PC12细胞损伤模型,应用四氮唑蓝(MTT)比色法检测PC12细胞的活力;化学比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内和细胞培养液中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果硒化大蒜多糖、大蒜多糖500μg/ml及以上剂量组和亚硒酸钠12.50μg/ml及以上剂量组均能有效抑制由H2O2引起的细胞存活率的下降(P<0.01)。硒化大蒜多糖、大蒜多糖2000μg/ml可显著降低LDH释放量和细胞培养液及细胞内的MDA含量,以及提高SOD活性(P<0.01),表现出良好的抗氧化活性,而硒化大蒜多糖的抗氧化作用更为明显(P<0.05)。结论硒化大蒜多糖对经H2O2诱导损伤的PC12细胞具有保护作用,这种保护作用明显优于大蒜多糖或单纯硒,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关。

Exploration for a Natural Selenium Supplement——Characterization and Bioactivities of Se-containing Polysaccharide from Garlic

A Se—containing polysaccharide(Se-GPS),with average molecular weight of 1.5×10~4 was isolated from Hubei Enshi garlic(Allium sativum L.)and purified by means of Sephadex G25 to G200 chromatographies.Its chemical homogeneity and composition were studied by optical rotation,HPLC and paper chromatographical methods.The abilities of scavenging active oxygen free radicals and inhibiting the damage of erythrocyte membrane by SiO_2 were established by spin trapping ESR studies.Se-GPS was shown to inhibit human cytomegalovirus by plague reduction assays and cytopathogenic effect tests.

生物、生理及仿生光学

Q652 96053498大蒜硒多糖对紫外线诱发的晶状体损伤的抑制=Inhibition of lens damages induced by UV irradiation by se-containing garlic polysaccha-ride[刊,中]/杨铭,胡齐悦(北京医科大学天然药物及仿生药物国家重点实验室.北京(100083)),王明—