大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽的抗氧化活性及稳定性研究

该研究以大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽为研究对象,通过测定其自由基清除能力和还原力系统评价大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽的抗氧化活性,并考察温度、酸碱度、模拟胃肠道消化等因素对其稳定性的影响。结果表明,大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽具有良好的自由基清除能力和显著的还原能力,其清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基和ABTS阳离子自由基的IC_(50)值分别为33.48、9.68、6.86、17.78 mg/mL,其还原力呈浓度依赖效应。大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽的抗氧化活性在温度25~100℃条件下较为稳定;在pH 6.0~8.0条件下可保持较高抗氧化活性,但在强酸或强碱条件下抗氧化活性显著下降(P<0.05);经体外模拟胃肠道消化后仍能保持原有抗氧化活性的80.26%以上。综合分析,大西洋鳕鱼骨胶原蛋白肽具有较好的抗氧化活性,其相关产品的加工贮藏应避免强酸、强碱条件的影响。研究结果可为鳕鱼骨资源高值利用以及多肽类抗氧化产品开发提供科学指导。

建立一种快速鉴定大西洋鳕鱼及其制品的SYBR Green荧光PCR方法

通过大西洋鳕鱼CoxI序列的比对分析,在序列的差异处设计了大西洋鳕鱼的特异性引物,建立了一种大西洋鳕鱼SYBR Green荧光PCR定性检测方法,并进行了引物特异性和灵敏度分析.结果表明:检测的大西洋鳕鱼样品和49份其他动、植物样品DNA中,只有大西洋鳕鱼样本出现显著扩增,6次平行反应的Ct值为23.216±0.113,5份大西洋鳕鱼同属鳕鱼样品和44种常见其他动、植样品均无明显扩增曲线.模拟样品灵敏度检测实验显示,该特异性引物可用于检测质量分数为0.01%的大西洋鳕鱼肉粉,灵敏度可达0.06ng/μL.通过对市售鳕鱼片检测的验证,该方法特异性强,灵敏度高,可用于食品中大西洋鳕鱼成分真实性的鉴别.

重组酶聚合酶扩增反应结合侧流层析试纸条技术快速鉴别大西洋鳕鱼制品真伪

建立了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)结合侧流层析试纸条技术(RPA-lateral flow dipstick,RPA-LFD)快速鉴别大西洋鳕鱼制品真伪的方法。对比大西洋鳕鱼和常用来冒充鳕鱼的鱼类线粒体基因组序列,设计针对大西洋鳕鱼的特异性探针和引物,建立针对大西洋鳕鱼的RPA-LFD检测方法。该实验筛选最佳引物和探针并评估其特异性,优化反应温度、时间和现场检测条件,并对20份市售“大西洋鳕鱼”及常见的冒充鳕鱼的鱼类制品进行现场检测,评估检测效果。实验结果表明,RPA-LFD检测方法特异性强,在44℃、14 min条件下的检测效果最好。在现场开展快速检测,效果良好,20份鳕鱼制品检测结果经过基因测序证实和产品真实成分一致。该研究建立的大西洋鳕鱼RPA-LFD检测方法特异性强、反应耗时短、操作简便、结果可视,有良好的现场快速检测应用前景,为大西洋鳕鱼制品现场快速检测提供了新思路,为水产品市场监管提供了技术支持。

大西洋鳕鱼肌红蛋白血管紧张素转化酶抑制肽的计算机模拟评估

本研究的主要目的是通过计算机模拟胃肠消化的方法推定大西洋鳕鱼的肌红蛋白中生物活性肽出现的概率及其丰度。从NCBI数据库中得到肌红蛋白的氨基酸序列并下载,将其导入Peptide Cutter中选用不同的酶模拟酶解,并在BIOPEP-UWM的“酶促工具”中对其短肽进行分析,在Toxin Pred中分析其理化性质、毒性特征。同时,将结果导入Peptide Ranker中对肽活性进行排序,并从中筛选出两种血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制肽CW和LFPK,将活性较高的肽与ACE进行分子对接,分析了CW和LFPK的ACE抑制机制,为从食品中寻找ACE抑制肽的研究提供参考。

气候变暖改变大西洋鳕鱼的种群结构

本文以北大西洋海域的鳕鱼为主要研究对象,将温度因素引入到具尺度结构的种群模型,模拟气候变暖对大西洋鳕鱼个体生长发育及种群结构的影响。结果表明:(1)若不考虑人类的捕捞行为,某些鳕鱼种群在低于14.9℃的环境下存在灭绝的风险,且在人类捕捞行为的作用下,灭绝的临界温度将进一步降低为11.8℃;当海洋温度达到20.35℃时,无论是否有人类捕捞活动,大西洋鳕鱼均会灭绝;(2)随着气候变暖效应的加剧,大西洋鳕鱼的平均体长将减小约15%,幼年鳕鱼将占据种群的主导地位;(3)鳕鱼在不同生长发育阶段有不同的温度喜好—幼年鳕鱼偏好较暖水域,成年鳕鱼偏好较冷水域。以上结果为指导人类开展合理的海洋活动提供了科学依据,对促进大西洋鳕鱼的繁衍发展及维持海洋生态系统的平衡具有重要的指导意义。