不同品种大豆培养基对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体代谢成分的影响

以不同品种大豆为培养基对蝙蝠蛾拟青霉代谢成分影响进行研究,筛选出最佳大豆品种,为蝙蝠蛾拟青霉标准化生产提供参考。首先对15个不同大豆品种培养基的主成分含量进行测定,同时对各品种大豆培养基培养的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体生物量、菌丝体腺苷含量及腺苷总量进行测定。采用非靶向代谢组学方法对不同品种大豆培养基培养的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中的代谢成分进行研究。结果表明,15个不同品种大豆豆饼中的粗蛋白和粗脂肪含量以及对应培养基培养的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷含量均有显著性差异(P<0.05),其中9号品种大豆培养基培养的菌丝体腺苷含量最高为(1089.35±25.51)mg/kg,5号的最低为(60.68±9.56)mg/kg,5号、9号和10号培养的菌丝体之间存在显著性差异(P<0.05)。代谢组学研究表明,5号、9号和10号菌丝体代谢成分相对含量差异较大。其中9号菌丝体丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等氨基酸,水苏糖、半乳糖等糖类,以及三羧酸循环产物2-氧代丁酸、柠檬酸等代谢物相对含量显著高于5号和10号菌丝体。KEGG富集分析表明,9号培养基通过促进天冬氨酸及谷氨酸代谢通路,可增加天冬氨酸和谷氨酸含量,进而增加腺苷含量。培养基中不同品种大豆培养基对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体腺苷含量影响显著,其中9号大豆培养基培养菌丝体的腺苷含量最高。本研究为筛选培养蝙蝠蛾拟青霉最佳大豆培养基提供了参考。

胰酪大豆胨琼脂培养基比对研究

目的研究5个不同品牌胰酪大豆胨琼脂培养基产品信息标识差异,分析适用性检查结果,为提高检验检测效率,规范培养基生产和管理提供研究依据。方法比对5个不同品牌,各3个批号的胰酪大豆胨琼脂培养基内外包装信息标识和自检项目,并按照《中华人民共和国药典》2020版四部和《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》(GB 4789.28-2013),对培养基适用性进行研究分析。结果5个品牌胰酪大豆胨琼脂培养基内外包装标识信息存在较大差异,自检报告使用的检验依据和具体检测项目以及适用性判定标准都不相同,5个品牌胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查结果均符合相关标准要求,但相同品牌不同批号间的检查结果均一性存在差异。结论培养基质量控制标准有待规范和完善,有利于培养基生产和使用。

无菌检查用真菌培养基与大豆-酪蛋白消化物培养基的比较试验

目的:验证美国药典用大豆-酪蛋白消化物培养基能否替代中国药典无菌检查用的真菌培养基。方法:参照灵敏度试验,比较试验菌在两种培养基中的生长情况。结果:试验菌在真菌培养基生长优于大豆-酪蛋白消化物培养基。结论:大豆-酪蛋白消化物培养基不能替代中国药典无菌检查用的真菌培养基,真菌培养基也不完全具备适合细菌生长的特性。

人参土芽孢杆菌用于胰酪大豆胨琼脂培养基的质量控制研究

目的:通过考察辅料检出的人参土芽孢杆菌(Bacillus ginsengihumi)在不同胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)的生长情况反映培养基的性能差异,讨论菌株作为TSA培养基适用性试验用菌的可行性。方法:将带菌辅料和经多项鉴定的人参土芽孢杆菌分别接种至8个厂家的TSA培养基和TSA对照培养基,讨论9种TSA培养基对辅料污染微生物的检出能力,以及8家企业TSA培养基对人参土芽孢杆菌的促生长能力。结果:由于该辅料携带微生物对营养要求的特殊性,部分厂家TSA检出能力不足,需氧菌总数检查结果偏低。仅B、E两个厂家培养基的促生长能力较高(均大于70%),结果与检出能力一致。结论:质控实验室根据实际需要,可将人参土芽孢杆菌作为TSA质量控制菌株之一。通过本文的讨论模式,各质控实验室也可增加生产环境或产品中的分离菌株,以用于培养基的质量评价,确保培养基对样品检测的灵敏度和可信度,使检验方法更加科学,检验结果更加准确。

3种培养基对鸡肉产品中两类耐药菌培养的影响

目的:评估不同培养基对鸡肉产品表面四环素耐药(T^(r))菌和磺胺耐药(S^(r))菌菌群的培养效果差异。方法:基于高通量测序技术,分析分别在脑心浸液肉汤(BHI)、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)3种培养基上培养获得的冷鲜鸡和鸡肉熟食表面T^(r)菌和S^(r)菌的菌群结构及丰度。结果:在冷鲜鸡表面鉴定到的101个属的耐药细菌中,仅在BHI、TSA和PCA培养基上获得培养的特有T^(r)菌属各有30,5,3个,特有S^(r)菌属各有9,8,14个;在鸡肉熟食样品表面鉴定到的50个属的耐药菌中,3种培养基上的特有T^(r)菌属分别为3,2,1个,特有S^(r)菌属分别为1,6,0个。耐药菌属丰度差异的Metastat分析结果表明,BHI和TSA对耐药菌群的结构影响具有较高的相似性,冷鲜鸡表面4种T^(r)菌(气单胞菌属Aeromonas spp.、水栖菌属Enhydrobacter spp.、乳杆菌属Lactobacillus spp.和泛菌属Pantoea spp.)和2种S^(r)菌(肠球菌属Enterococcus spp.和乳杆菌属Lactobacillus spp.)在PCA培养基上获得培养的稳定性及丰度均较高。结论:不同培养基获得耐药菌的种类及丰度存在差异,应汇总多种培养基培养所得菌群的测序信息,才能完整描述鸡肉样品表面耐药菌的组成。

铜绿假单胞菌定量冷冻干燥菌球与新鲜制备菌悬液用于胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查的研究

目的:探讨使用铜绿假单胞菌CMCC(B)10104定量冷冻干燥菌球制备菌悬液(以下简称冻干型菌悬液)与新鲜制备菌悬液(以下简称新鲜型菌悬液)评价胰酪大豆胨琼脂培养基适用性的差异。方法:将铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液和新鲜型菌悬液分别涂布5种市售胰酪大豆胨琼脂培养基,获得培养物的菌落数量、菌落平均直径及肉眼可见菌落出现时间,使用SPSS软件进行统计学分析。结果:铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液与新鲜型菌悬液的差异主要体现在菌落平均直径上,前者大于后者。铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液在不同品牌胰酪大豆胨琼脂培养基平板上菌落计数明显不同。结论:使用铜绿假单胞菌CMCC(B)10104冻干型菌悬液更利于筛选对损伤菌促生长能力强的培养基,可以用于计数培养基(胰酪大豆胨琼脂培养基)适用性检查。

改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的应用效果

评估GB 4789.11-2014《食品安全国家标准食品微生物检验β型溶血性链球菌检验》中改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的质量。选取国内三家(标记为A、B、C)和国外一家(标记为D)培养基生产商的胰蛋白胨大豆肉汤培养基(商品化脱水合成培养基)和相应添加剂,使用目标菌(乙型溶血性链球菌FSCC225016)和非目标菌(大肠埃希氏菌ATCC25922),依据GB4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物检验培养基和试剂的质量要求》中选择性增菌培养基的定性测试方法进行质量评估。同时不加添加剂进行试验。国内A、B和C三家改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0。国外D改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为1。国内A、B、C三家的改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量评估证明是胰蛋白胨大豆肉汤培养基(不加添加剂)基础成分的问题;国产胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量有待提高。

大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)质量控制程序

浮游菌和沉降菌是医院洁净手术部和临床实验室的空气质量控制指标之一。为了细化浮游菌和沉降菌的测试方法,加强对微生物培养基的质量控制,避免误操作引起的生物污染,保障检测过程中的人员健康,本文给出了大豆酪蛋白琼脂培养基的质量控制程序,希望有助于微生物检测工作的同行们更好的开展工作。

环境监测用胰酪大豆胨琼脂培养基中和消毒剂效能验证

目的:验证环境监测用胰酪大豆胨琼脂培养基(Tryptone Soya Agar,TSA)中和消毒剂的效能。方法:配制7种常见环境微生物菌悬液,每一种菌的理论配制浓度为200 CFU/mL,对配制后的菌悬液进行平皿菌落计数。模拟生产车间人员消毒行为,在距离TSA平皿水平距离大于100 cm、垂直距离40 cm的位置,喷洒消毒剂(75%乙醇和70%无菌异丙醇)进行手部消毒,分别在消毒前后用菌悬液涂布TSA平皿,同时分别设置阴性对照组和空白对照组,用独立样本t检验方法对培养基菌落进行统计学分析。结果:金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、表皮葡萄球菌、婴儿芽孢杆菌的实际浓度分别为270 CFU/mL、240 CFU/mL、220 CFU/mL、220 CFU/mL、150 CFU/mL、300 CFU/mL、330 CFU/mL。通过统计学分析,各实验处理组的菌落计数结果与空白对照组差异不显著(P>0.05)。结论:当前公司车间人员的日常手部消毒方式对环境监测用胰酪大豆胨琼脂培养基造成的消毒剂残留不影响环境微生物的培养,环境监测结果真实可靠。

血液制品无菌生产工艺验证-培养基灌装试验

目的通过无菌灌装胰酪胨大豆肉汤培养基来验证血液制品无菌生产工艺的有效性和安全性。方法按正常分装程序进行无菌灌装,同时在灌装过程中模拟最快灌装速度、最多工作人员数量、最大灌装数量、最长工作时间、常规干扰试验和非常规干扰试验。结果通过模拟灌装过程中的最快灌装速度、最多工作人员数量、最大灌装数量、最长工作时间、常规干扰试验和非常规干扰试验,分装后的培养基孵放后无微生物生长。结论无菌灌装胰酪胨大豆肉汤培养基的验证过程及结果可以证明血液制品无菌生产工艺的控制是有效的和安全的。

胰酪胨大豆肉汤培养基和改良马丁培养基在药品无菌检查中的比较研究

目的:观察胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)和改良马丁培养基(MM)对真菌和需氧菌检测效果的差异。方法:选用3株细菌和3株霉菌试验菌株,用定性和定量2种方法分别测试培养基对试验菌株的促生长能力和检测灵敏度;定性方法参照现行中国药典;定量方法采用平板计数法。结果:定性和定量2种检测方法所得的实验结果基本一致,除腊叶芽枝霉外,在规定的条件下TSB和MM培养基对试验菌株的促生长能力比较,经统计学分析,差异无显著性(P>0.05);TSB培养基对所有试验菌株的检测灵敏度均可达到<1 CFU,下限可达到<0.1 CFU,与MM培养基比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:在现行中国药典规定的接种和培养条件下,TSB培养基对试验菌株的促生长能力和检测灵敏度与MM培养基基本等同,能满足我国现行药典的检测要求。

不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力影响的研究

目的研究不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力的影响。方法采用悬液定量和载体定量杀菌试验方法,对不同培养基培养出的枯草杆菌黑色变种芽孢抗力进行比较。结果相同培养条件下,胰蛋白胨大豆琼脂培养基与普通营养琼脂培养基培养制备出的20 ml芽孢悬液的浓度分别为4.52×109cfu/ml和2.15×109cfu/ml。湿热100℃作用20 min、干热160℃作用10 min、5 000 mg/L的邻苯二甲醛溶液作用40 min、2 000 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用15 min,对两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭率均为99.99%。结论两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的抗力无明显差异。

粉针剂工艺模拟分装过程验证探讨

目的通过无菌乳糖模拟分装工艺验证证实分装注射用无菌粉末的无菌生产工艺规程和从事此生产工艺的操作人员能够保持产品的无菌性,证明其无菌工艺的可靠性。方法采用无菌乳糖干燥粉替代无菌原料药,模拟分装于西林瓶,然后于西林瓶中加入胰酪胨大豆肉汤液体培养基的方法来进行验证,将分装样品先后在20~25℃与30~35℃下培养7d,并作阴性、阳性对照。结果无菌分装环境及操作人员表面微生物检查合格,阴性、阳性对照成立,试验样品无菌。结论无菌粉针剂分装过程中,经培训的操作人员在规定的洁净环境中按操作规程操作所生产的产品可以保证无菌。

透气包装材料湿性微生物屏障试验方法研究

YY/T 0681.14—2018《无菌医疗器械包装试验方法第14部分:透气包装材料湿性和干性微生物屏障试验》[1]中规定,透气包装材料湿性微生物屏障试验方法,将微生物液滴滴加到试验样品上,液滴干燥后,进行试验以测定是否有微生物穿透到试验样品的另一面。根据试验结果评价透气包装材料是否可以提供充分的微生物屏障。该行业标准中关于培养基和试验微生物制备方法比较单一,存在一定的局限性,本文旨在研究方法的改进措施以使之具有更广泛的实践指导意义。

洁净室微生物监测培养基的选择

洁净室环境监测包括空气、表面和人员。不同对象的微生物监测在培养基和培养条件的选择上是有区别的。

口服液体药用塑料瓶微生物污染状况分析及试验方法改进

目的:通过分析口服液体药用塑料瓶的微生物污染状况,评价其对口服液体制剂质量的贡献。方法:参考中国药典2010年版和美国药典36版方法,测定2013年全国评价性抽验中得到的4个品种、9种规格、43家企业的55批口服液体药用塑料瓶的微生物种类和数量。采用薄膜过滤法处理样品提取液,用胰酪大豆胨琼脂培养基进行培养,计数需氧菌总数,用胆盐乳糖增菌液培养,进行控制菌检查。结果:每批样品的细菌、霉菌和酵母菌数及大肠埃希菌均符合国家药品包装容器(材料)标准(试行)规定,58%的样品未检出污染微生物,污染有微生物的样品菌数均未超过7 cfu·瓶-1,均为环境污染菌芽孢杆菌类及球菌类,且均未检出大肠埃希菌。结论:口服液体药用塑料瓶微生物污染未超标。将细菌数、霉菌和酵母菌数统一合并为需氧菌总数测定,可在一张滤膜上同时测定样品的细菌数、霉菌和酵母菌数。改进的检验方法具有省时、方便的特点。