大豆多肽中α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制剂的虚拟筛选及体外活性验证

目的:通过抑制碳水化合物消化酶的活性延缓碳水化合物的消化,来预防和控制糖尿病的作用已经成为多领域的研究热点。β-伴大豆球蛋白是大豆蛋白中含量最高的功能性蛋白,但其胃肠道消化后产生的多肽是否具有抑制碳水化合物消化酶的活性还不得而知。方法:将β-伴大豆球蛋白进行胃肠道模拟消化,通过虚拟筛选和ADMET预测选出α-葡萄糖苷酶抑制肽和α-淀粉酶抑制肽,检测多肽对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。结果:通过胃酶、胰酶和糜蛋白酶将β-伴大豆球蛋白虚拟酶解成95个小分子多肽;筛选出8个α-葡萄糖苷酶抑制肽和α-淀粉酶抑制肽;发现氢键和静电相互作用在多肽与α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶结合中起重要作用;体外验证发现四肽EASY具有较强α-葡萄糖苷酶抑制效果,其IC_(50)值为208.6μg/mL,未发现明显α-淀粉酶抑制效果。结论:α-葡萄糖苷酶抑制肽EASY具有抑制碳水化合物消化酶的活性,可能成为控制糖尿病的潜在抑制剂。

大豆多肽山楂复合饮料工艺及稳定性研究

大豆多肽具有良好的抗氧化、调节免疫及降血压作用,研究以山楂为主要原料,添加大豆多肽、白砂糖、维生素C等添加剂,研发新型复合饮料。应用单因素试验及正交试验对复合饮料配方进行优化,结果显示山楂汁添加量20%,大豆多肽粉添加量0.25%,白砂糖添加量8%,维生素C添加量0.1%,制备饮料感官风味较好。稳定性试验结果表明,饮料采用羧甲基纤维素钠、黄原胶复配,比例为1∶3,总添加量为0.2%,饮料状态及稳定性最佳。大豆多肽山楂复合饮料口感良好,具有一定功能性,极具开发前景。

大豆多肽运动饮料对体育运动员身体机能的影响分析

选取省级水平男子运动员60名,随机分成对照组、补糖组和补肽组,通过检测运动员的血尿素、血清离子浓度、免疫球蛋白、身体素质等指标,分析大豆多肽运动饮料对体育运动员身体机能的影响。结果表明:运动后,补糖组运动员血尿素上升2.2mmol/L左右,补肽组运动员血尿素上升不足1.0mmol/L;对照组、补糖组、补肽组的心率平均值分别为340b/min、315b/min、290b/min;补糖组、补肽组的浆频次数、拉浆时间、功率以及身体素质指标相比于运动前均有所提升,且补肽组提升更为显著;三组运动员的免疫球蛋白水平无显著变化;补糖组、补肽组均可提升最大功率、输出总功和血清离子浓度,且补肽组提升效果较好。说明大豆多肽运动饮料可减轻体育运动员的疲劳感,增加机体承受负荷能力,增强心率恢复,改善有氧、无氧运动能力,提升身体素质,缓解电解质代谢紊乱现象,减短体育运动员运动性疲劳的时间;但是对体育运动员免疫球蛋白水平影响不大。

大豆多肽营养品对长跑运动训练效果的影响

长跑运动员要想在日常训练中不断刷新自身的体能极限,就必须在平时进行持之以恒的训练,强化自身的体能素养和运动技能,但长期高强度的运动易导致长跑运动员机体出现疲劳状态。一旦长跑运动员身体机能长期处于运动性疲劳状态并且没有及时得到改善,那么他们日常的训练效果和竞技水平就会受到影响,甚至还有可能导致在身体和心理上出现多种健康问题。为此,应采取针对性策略解决长跑运动员的健康问题,缓解他们的运动性疲劳,从而保证他们平时的训练效果,在各类专业田径赛事中取得好成绩。作为一类有着广泛应用价值的寡肽混合物,大豆多肽易于被人体分解和吸收,不仅能够针对性地增强长跑运动员的肌肉量和力量,在提升训练效果和缓解运动疲劳方面同样有着积极影响。因此,对大豆多肽营养品对长跑运动训练效果的影响及作用机制进行了全面分析。

磷酸化大豆多肽螯合钙的制备工艺优化及其对成骨细胞的活性影响

为了探究磷酸化大豆多肽螯合钙(PSPCC)的生理活性,提高磷酸化大豆多肽螯合钙的钙螯合量,本研究通过单因素实验和响应面试验相结合的方式优化磷酸化大豆多肽螯合钙的制备工艺,并通过体外实验评价了磷酸化大豆多肽螯合钙对成骨细胞的活性影响。结果表明,制备磷酸化大豆多肽螯合钙的最佳工艺条件为:三聚磷酸钠与大豆多肽的质量比1:2,磷酸化反应温度52℃,磷酸化反应pH7.0,磷酸化反应时间9.7 h,磷酸化大豆多肽与氯化钙的质量比2:1,螯合反应pH8.0,螯合反应温度50℃,螯合反应时间1.5 h,钙螯合量最大为107.25±0.10 mg/g;MTT法结果显示,磷酸化大豆多肽螯合钙组(D组)成骨细胞相对增殖率是大豆多肽组(A组)的1.6倍(第3 d);ALP染色实验表明,D组染色阳性率是空白组的33.6倍。采用ALP试剂盒对各样品第7 d的ALP活性进行检测,结果显示D组ALP活力是空白组的6.2倍。通过茜素红染色实验发现,D组钙结节数量是空白组的94倍。本研究使用响应面法对磷酸化大豆多肽螯合钙的制备工艺优化合理,并初步证明了磷酸化大豆多肽螯合钙对成骨细胞具有显著的促增殖、分化作用(P<0.05),且作用效果高于其它样品,为后续磷酸化大豆多肽螯合钙的进一步开发利用提供了一定的理论基础。

脱苦大豆多肽产生菌的筛选及其水解条件的优化

从八株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)中筛选出了一株适合于豆粕粉水解的B.subtilis菌株;通过正交试验确定最佳水解条件为:豆粕粉6%,pH6.0,温度30℃,发酵时间48h;用某曲霉菌产生的羧肽酶水解B.subtilis的发酵液,经氨基酸自动分析仪测定产物中游离氨基酸的含量和种类,初步确定了B.subtilis蛋白酶的主要酶切位点。

柠檬酸水解法制备大豆多肽的研究

大豆多肽具有降血压、降胆固醇和免疫调节等多种活性功能。采用柠檬酸浸泡处理大豆的方法,研究孵育pH值、孵育温度、孵育时间对大豆多肽形成的影响。在单因素试验基础上通过响应面法优化大豆多肽的制备工艺参数,采用SDS-PAGE电泳分析不同处理条件对大豆蛋白种类和含量的影响。结果表明,影响大豆多肽制备工艺参数大小关系依次为孵育温度>孵育pH值>孵育时间。响应面模型优化后实际制备工艺为pH值4.0,孵育温度48℃,孵育时间6 h,制备的多肽质量浓度为1437μg/mL。研究为高效绿色制备大豆多肽提供参考。

补充大豆多肽对中长跑运动员训练期生化指标的影响

目的 :观察大豆多肽固体饮料对耐力项目运动员促进恢复的作用。方法 :2 1名男性省级中长跑运动员随机分为对照组 (n =7)、补糖组 (n =6 )和补肽组 (n =8)进行为期 4周的大强度训练 ,补肽组每天训练课后补充含有 8g大豆多肽和 35g糖的运动饮料 ,补糖组服用含有 35g糖的饮料 ,对照组服用外观及口感与大豆多肽饮料相近的安慰剂。实验前、训练两周后及实验后对受试对象的体成分、RPE等级和血液生化指标进行测试。结果 :补肽组运动后的体重、瘦体重比实验前明显提高 (P <0 0 5 ) ,血清睾酮水平比对照组显著提高 (P <0 0 5 ) ,而补肽组RPE等级显著下降 (P <0 0 1) ,同时血清肌酸激酶亦下降 (P <0 0 5 )。结论 :服用大豆多肽可促进中长跑运动员瘦体重的增加、提高血清睾酮的水平以及降低训练后RPE的等级 ,提示大豆多肽可促进蛋白质的合成 ,并具有一定的抗疲劳作用。此外摄入大豆多肽可降低中长跑运动员运动后血清肌酸激酶的水平 。

液体发酵法制备风味良好的大豆多肽

研究了液体发酵法制备大豆多肽的一些影响因素 ,包括培养基的组成、发酵温度、pH、接种量、菌龄以及发酵时间等。结果表明 ,在 2 8℃ ,pH6,发酵 2 4～ 3 0h的条件下可获得色泽良好、风味纯正的大豆蛋白水解液 ,其水解度达到 2 5 %～ 3 0 % ,多肽得率高达 75 %。经质谱分析 ,发酵液分子质量主要分布在 40 0 0u 。

大豆多肽运动饮料的研制

以大豆多肽为主要原料 ,辅以多种中草药、无机盐及维生素 ,经调配研制出 2种不同功能、风味的固体多肽运动饮料 ,通过试验确定了产品的配方及生产工艺参数。该饮料人体服用结果表明 ,在促进运动后损伤组织修复 。

枯草芽孢杆菌生产大豆多肽溶液的加工功能特性研究

枯草芽孢杆菌B.s.Shi HeziIII发酵豆粕粉产生多肽溶液。不同发酵时间的多肽溶液有着不同的加工特性。水解度DH随着发酵时间的延长而上升;可溶性氮指数(NSI)与发酵时间和pH值均有关,总体上发酵时间越长,NSI越大,pH值在中性条件下NSI较高;浊度受pH值影响,pH值越低,浊度越高,36h的多肽溶液在pH3.0～7.0范围内,浊度较低;多肽溶液均有着较好的乳化性,但乳化稳定性较差。

双酶法生产低苦味大豆多肽研究

研究了Protamex酶对大豆蛋白的有限水解作用,分析了酶加量、pH、温度、底物浓度、反应时间等因素对大豆蛋白酶水解的影响,确定了Protamex酶水解大豆蛋白的较佳条件范围;同时研究了不同浓度的Flavourzyme酶对大豆多肽的水解作用及对大豆多肽风味的影响,提出了采用Protamex酶和Flavourzyme酶双酶法分步酶解工艺来生产低苦味大豆多肽的方法。

不同分子量段大豆多肽功能特性的研究

采用Alcalase和Neutrase双酶分步水解法,制备了水解度约为24%的大豆多肽,用截留分子量分别为30000、10000、5000Da的超滤膜将其分离成4个分子量段,对不同分子量段大豆多肽的溶解性、起泡性及起泡稳定性、乳化性及乳化稳定性、抗氧化性和ACE抑制活性进行了研究。

大豆多肽螯合锌对自然衰老小鼠的作用

目的探讨大豆多肽螯合锌对自然衰老小鼠模型的影响及其机制。方法自然衰老的小鼠分别给予400 mg/kg大豆多肽、40 mg/kg硫酸锌和400 mg/kg大豆多肽螯合锌溶液连续灌服4 w。采用酶化学方法检测肝组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂褐质(LPO)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量等指标。结果成功建立了小鼠衰老模型。大豆多肽鳌合锌可以明显增加衰老小鼠的进食量和进水量(P<0.01),可以明显地降低衰老小鼠肝脏中的MDA(P<0.05)、SOD(P<0.01),可以明显地增强衰老小鼠肝脏总氧化能力(P<0.05)。结论大豆多肽鳌合锌可以通过抗氧化机制达到对抗衰老的作用。

大豆多肽提取工艺的研究

以优质大豆为原料，低温脱溶法除去油脂，水提取蛋白质。经酸沉淀纯化的蛋白质，采用双酶水解，配合活性炭吸附处理，有效的控制了苦味肽带来的苦味。同时，系统介绍了大豆多肽生产工艺参数，使其能进入工业化规模生产。

大豆多肽制备工艺的研究

大豆多肽是一种功能性食品添加剂 ,在低 pH的情况下依然保持溶解性 ,且随浓度升高 ,其粘度变化也不大。此外 ,大豆多肽还具有促进肠道有益菌生长等特点。本文就大豆多肽的提取工艺提出了一个初步方案 ,并对其提取纯化 。

多酶协同作用生产大豆多肽的研究

以大豆多肽饮料的研制为着眼点,根据单酶水解大豆分离蛋白的研究,从中选择合适的酶复配组合成多酶,然后在多酶水解的基础上,分别采取分步加酶和同时加酶方式,对比Flavourzyme和 Kojizyme这两种复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的特点,最终确定了大豆分离蛋白用于多肽生产时的酶解工艺条件。

水酶法水解液中大豆多肽的吸附纯化及其氨基酸组成分析

考察大孔吸附树脂对水酶法水解液中大豆多肽的吸附性能和纯化效果,通过静态吸附和解吸实验对8种树脂进行了初步筛选,并进一步研究了上样体积、上样流速、解吸剂体积分数等条件对大孔吸附树脂纯化能力的影响。结果表明:DA201-C大孔吸附树脂对水酶法大豆多肽的吸附性能优于其他7种树脂,其最佳动态吸附工艺为:上样体积140 m L、上样流速1.5 m L/min、水洗体积350 m L,体积分数25%、50%、75%、100%乙醇溶液分级洗脱,每次80 m L,流速2 m L/min。经纯化后各大豆多肽组分纯度均在80%以上,总回收率为95.65%,树脂吸附量为13.32 mg/g,糖类及盐类杂质分别降低51%及90%以上;乙醇分级洗脱可分离4个大豆多肽组分,其中75%体积分数组分SP-DA_(75)氧自由基清除能力最强,肽段的抗氧化性与其疏水性氨基酸含量及酸性氨基酸含量具有一定相关性。

米曲霉发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉的发酵生产大豆多肽,先以水解度为指标初步探索发酵工艺条件,然后通过正交试验,并以大豆多肽含量为指标确定摇瓶发酵的最佳工艺条件,即发酵液初始pH6.0,发酵培养温度28℃,培养基中大豆分离蛋白含量3%,摇瓶转速180r/min,发酵时间60h～70h,得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。

三酶复合法提取大豆多肽工艺的研究

探讨并构建了三酶复合法提取大豆多肽的新工艺。即将大豆分离蛋白经三酶复合酶解、活性炭脱色、超滤、真空浓缩和离心喷雾干燥等提取工艺,最终获得大豆多肽。其制备的关键工艺条件为①最佳复合酶解条件:中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶比例为1∶2∶4,pH 7.0,底物浓度4.0%,酶解时间9 h;②最佳脱色处理条件:粉末活性炭用量2.0%,温度50℃,pH 3.0,吸附时间3 h;③超滤分离条件:NF-1纳滤膜,压力1.0 MPa,膜通量26.0 L/(m2.h)。