二次微分简易示波伏安法用于大豆甙元及其衍生物清除超氧阴离子自由基的研究

用二次微分简易示波伏安法研究了大豆甙元及其衍生物3’-大豆甙元磺酸钠对邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基(O_2^(-·))的清除作用,并计算了两种抗氧化剂对O_2^(-·)清除作用的IC_(50)。试验结果表明,大豆甙元和3’-大豆甙元磺酸钠对O_2^(-·)均有一定的清除作用,清除能力3’-大豆甙元磺酸钠大于大豆甙元,其原因与3’-大豆甙元磺酸钠分子的共轭程度高和分子内氢键的形成有关。与检测自由基的其它方法相比,该方法用于某些化学反应检测有其独特的优越性。

3′-大豆甙元磺酸钠的电化学行为及应用研究

采用线性扫描伏安法、循环伏安法和常规脉冲伏安法电化学手段详细研究了改性药物 3′ 大豆甙元磺酸钠 ( 3′ daidzeinsulfonicsodium ,Dss)在pH 1 0～ 6 2的水溶液中的电化学行为 .在不同pH范围内得到了Dss的三个还原波 .研究证实 ,在pH <3 2条件下所获得的Pc1,Pc2 波分别为质子化的Dss的单电子不可逆吸附还原波及还原中间体自由基的单电子单质子不可逆吸附还原波 ;在 3 2 <pH <6 2条件下所获得的Pc3 波 ,属于Dss后随质子化的单电子不可逆吸附还原波 ,而还原中间体自由基的单电子波被氢波掩盖 .测得在单分子层饱和吸附的条件下 ,每一个Dss分子所占汞电极面积为 0 664nm2 .此外 ,通过邻苯三酚自氧化产生活性氧自由基再还原 ,对Dss清除活性氧自由基能力进行了研究 ,从电化学角度对其药理机制进行了探讨 ,研究证实Dss具有较强的抗氧化性 ,是一种有效的活性氧自由基清除剂 .

大豆甙元(S86019)与乳香有效成分Bc-4或阿糖胞苷对HL-60细胞分化的联合诱导

大豆甙元($86019)单独处理HL-60细胞,对细胞生长诱导分化作用较弱,NBT阳性细胞数低于10%。当S86019与乳香有效成分Bc-4联合应用时,对HL-60细胞的生长有明显抑制,并有明显的分化诱导;S86019与Bc-4或Ara-c联合应用,对细胞的增殖有较强的抑制和分化诱导作用。S86019与Bc-4联合应用4d,NBT阳性细胞达80%,75%细胞获得吞噬乳胶颗粒能力,90%细胞向成熟粒细胞方向分化;S86019与Ara-c联合应用4d,NBT阳性反应细胞达70%,82%细胞获得吞噬能力,90%细胞形态发生分化。S86019与Bc-4或Ara-c联合用药4d,可明显阻断细胞由G1期向s期移行,G1期细胞数明显增加。

大豆甙元对小鼠B16黑色素瘤细胞的分化诱导作用

大豆甙元在10～40μg·ml^(-1)浓度范围内,能够明显抑制B16细胞的增殖,受药物作用4d的B16细胞,克隆形成能力及体内成瘤能力明显降低,大豆甙元在抑制B16细胞增殖的同时,促进黑色素的生成,且对B16细胞形态具有明显的影响,低浓度时促使细胞平行排列,当浓度增加时,形成网状结构,黑色素颗粒明显增多。

辅酶Q10、大豆甙元以及卵磷脂对小鼠体内抗氧化体系的影响

目的:通过辅酶Q10、大豆甙元、卵磷脂单独以及三者联合补充,观察对小鼠体内抗氧化体系的影响。方法:采用灌胃方法,各组持续给予受试物6周。取小鼠血清、肝以及脑组织进行与抗氧化相关的生化检验,大脑海马区神经细胞做膜脂流动性检测。结果:单独补充辅酶Q10、卵磷脂能显著降低小鼠血清中MDA含量,单独补充大豆甙元能显著降低小鼠肝组织中MDA含量(P<0.05);联合补充能显著提高肝组织中GSH-Px活性、脑及肝组织中T-SOD活性以及显著降低血清、脑以及肝组织中MDA含量(P<0.05);单独(辅酶Q10除外)及联合补充均能显著提高小鼠大脑神经细胞膜脂流动性(P<0.05)。结论:辅酶Q10、大豆甙元及卵磷脂均能不同程度的改善小鼠体内抗氧化体系、脂质代谢以及大脑神经细胞膜脂流动性,且体现一定的联合协同效应。

大豆甙元对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的 :探讨大豆甙元体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法 :用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,大豆甙元以不同浓度加入细胞培养体系 ,作用不同时间后 ,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况 ;用放射免疫法 (RIA)测定细胞外骨钙素 (BGP)的含量 ,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果 :大豆甙元 1× 10 -5～ 1× 10 -9mol/L浓度范围内 4 8h ,72h促进成骨细胞增殖 ,在 1× 10 -7～ 1× 10 -9mol/L范围内 4 8h和 72h提高成骨细胞外骨钙素含量。结论

葛根超微粉、葛粉中葛根素、大豆甙和大豆甙元的分析研究

采用高效液相色谱法测定功能食品葛根超微粉、葛粉中的葛根素、大豆甙和大豆甙元,为葛根保健品的质量控制提供方法保证。试验利用70%乙醇溶液超声提取样品,流动相为甲醇与水二元体系。结果显示,葛根超微粉中葛根素、大豆甙和大豆甙元的含量远远高于葛粉。加标回收率为90.1%~100.5%,该方法操作简便,准确可靠。

大豆甙元联合TRAIL诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制研究

目的:研究大豆甙元(Daidzein,Da)联合TRAIL对SGC-7901细胞的影响。方法:采用不同浓度的Da和TRAIL单独及联合作用于SGC-7901细胞,通过MTT细胞和流式细胞术检测增殖、凋亡和周期的变化情况,透射电镜观察对细胞内部形态和微结构的影响,利用Western blot检测对相关凋亡基因Bcl-2、survivin、caspase-3的表达变化。结果:Da联合TRAIL处理人胃癌SGC-7901细胞后,生长有明显的抑制作用,并且具有一定的剂量依赖性;细胞周期阻滞于S期;细胞内部出现典型凋亡形态学改变;Bcl-2和survivin蛋白表达下调,caspase-3蛋白被上调。结论:Da联合TRAIL通过细胞周期S期阻滞,及下调Bcl-2、survivin蛋白及增强caspase3蛋白表达而诱导胃癌细胞凋亡。

大豆甙元磺酸盐对豚鼠离体回肠收缩的影响及途径分析

实验采用豚鼠回肠离体肠段,置于装有Krebs液的恒温灌流浴槽中,记录肠段收缩活动,探讨大豆甙元对消化道平滑肌的作用及其作用机理.结果表明,大豆甙元磺酸盐对豚鼠离体回肠收缩有明显抑制作用,纳洛酮能减弱大豆甙元磺酸盐对回肠的抑制作用,心得安、酚妥拉明、阿托品均不影响大豆甙元磺酸盐对回肠平滑肌的作用.实验结果提示,大豆甙元能抑制回肠平滑肌的收缩活动,其作用部分由μ 受体介导.

具有双螺旋链的新型镉(II)大豆甙元衍生物配位聚合物[Cd(L)(H_2O)_3]·2H_2O的合成与晶体结构研究

合成新型大豆甙元衍生物Cd(II)配合物[Cd(L)(H2O)3]·2H2O(H2L=3'-磺酸钠-4'-羟基-7-羧甲基异黄酮),采用单晶X射线衍射、元素分析和IR对其进行表征.该配合物属单斜晶系,空间群为P21/a,晶胞参数a=1.3691(3)nm,b=0.72157(16)nm,c=2.0163(5)nm,α=90°,β=93.501(4)°,γ=90°,V=1.9882(8)nm3,Mr=592.79,Z=4,Dc=1.980g·cm-3,F(000)=1192,μ=1.283mm-1,R1=0.0387,wR2=0.1224.X射线单晶衍射分析结果表明,该单晶中Cd(II)为六配位,它除了与配体L中羧基和磺酸基上的氧原子配位外,还与溶剂中的3个水分子发生配位,形成了以Cd(II)为中心的八面体配位构型.该晶体结构中存在着平行于b轴的双螺旋链,左手螺旋Cd-L链和右手螺旋Cd-L链的交替排列构成了二维层状结构.由于配位水和晶格水以及配体中CO2,SO3,O,CO,OH等的存在,该晶体中存在着丰富而复杂的氢键,二维层状结构之间依靠这些复杂的氢键作用形成三维超分子结构.

超声波辅助提取大豆甙元工艺研究

研究挤压膨化技术对大豆甙元提取的影响,并确定最佳的超声波提取条件。在考察超声波功率、超声波时间等单因素对大豆甙元得率影响的基础上,选取提取液H+浓度、超声波时间和乙醇浓度进行三因素三水平的响应曲面试验,以确定超声波辅助提取大豆甙元最佳条件。并以超声波辅助提取未经挤压的大豆中大豆甙元得率和挤压处理过的大豆用乙醇作为溶剂提取的大豆甙元得率作为对照。超声波辅助提取大豆甙元的最佳条件为的提取液H+浓度为1.43 mol/L,超声波时间为52 m in,超声波温度为69℃,超声波功率为250 W,乙醇浓度为80%,料液比(V/W)为30,浸置时间为50 m in,提取1次,得率为0.188%,显著高于对照试验。挤压膨化技术处理有利于大豆甙元的提取,超声波技术辅助提取大豆甙元方法效果优于传统方法。

大豆甙元对生长期锦江黄牛生产性能、抗氧化能力及免疫性能的影响

本试验旨在研究大豆甙元对生长期锦江黄牛生产性能、抗氧化能力及免疫性能的影响。选取20头健康状况良好、体重为(140±5)kg的生长期锦江黄牛,随机分为4组,每组5头牛。对照组饲喂基础饲粮(精粗比为4∶6),试验组分别饲喂在基础饲粮中添加了100、200和400 mg/kg大豆甙元的试验饲粮。限饲各组的干物质采食量均为3.98 kg/d。预试期为10 d,正试期为60 d。结果表明:1)各试验组平均日增重显著高于对照组(P<0.05),400 mg/kg组较对照组高126.6 g/d。2)各试验组粗蛋白质表观消化率均显著高于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,各试验组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著升高(P<0.05);各试验组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性相比于对照组均有升高的趋势(0.05≤P≤0.10);各试验组血清丙二醛(MDA)含量均低于对照组,但差异不显著(P>0.05)。4)各试验组血清免疫球蛋白(Ig)M含量均显著高于对照组(P<0.05),同时400 mg/kg组显著高于100 mg/kg组(P<0.05);各试验组的血清IgG含量相比于对照组均有一定程度的升高,但差异均不显著(P>0.05)。由上述结果可见,饲粮中添加适量的大豆甙元可以提高生长期锦江黄牛养分消化率,促进犊牛的生长,同时提高免疫及抗氧化性能。

大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其受体作用机制研究

目的观察大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖及其雌激素受体(ER)表达的影响。方法体外培养子宫内膜癌HEC-1B细胞,采用MTT法检测不同浓度大豆甙元对子宫内膜癌细胞增殖的影响,同时检测大豆甙元对启动子(ERE)调控的ERα和ERβ的荧光素酶报告基因表达的影响。结果大豆甙元对HEC-1B细胞体外增殖有明显抑制作用,其抑制作用在一定范围内呈剂量及时间依赖性。大豆甙元在低浓度时已可显著诱导报告基因luc的表达,在80×10-6 mol/L时达到最高值;在高浓度时,其诱导作用逐渐下降;大豆甙元通过ERβ介导的报告基因表达水平的升高程度强于ERα。结论大豆甙元可抑制子宫内膜癌细胞的增殖,这种抑制作用可通过调节子宫内膜癌细胞ERα和ERβ的表达、调整ERα/ERβ比例而实现。

溶剂浮选法分离富集葛根中大豆甙元的研究

采用溶剂浮选法分离富集葛根中的大豆甙元。考察了浮选溶剂、氮气流速、试液pH、浮选时间及电解质(KCl)等因素对浮选效率的影响,优选出最佳浮选条件;对最佳条件下的浮选效果进行了评价,并与溶剂萃取法进行了对照,前者明显优于后者。

大豆甙元对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的 :探讨大豆甙元体外对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法 :用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,大豆甙元以不同浓度加入细胞培养体系 ,作用不同时间后 ,用动力学法测定细胞内碱性磷酸酶 (ALP)的活性。结果 :大豆甙元在 1× 10 3 mol/L范围内 48h和 72h ,1× 10 5mol/L 96h及 1× 10 7mol/L 72h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论 :大豆甙元体外能提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。

大豆甙元对超重并肥胖人群的干预效应

目的探讨大豆甙元对超重并肥胖人群的心血管疾病危险因素的影响。方法采用随机对照临床试验,从重庆市某三甲医院筛选80例体质量指数(BMI)>24kg/m2的高胆固醇血症患者为受试对象,分为试验组和对照组,每组40例。试验组每日服用含80mg大豆甙元的大豆分离蛋白粉5g,对照组服用不含大豆异黄酮的大豆分离蛋白粉5g,干预时间为6个月。服用前后测定心血管疾病危险因素相关指标。结果干预后试验组BMI下降,下降率为3.81%,自身干预前后比较差异有统计学意义(P<0.01);血清中总胆固醇(TC)下降,下降率为10.11%,自身干预前后比较差异有统计学意义(P<0.01),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);糖化血红蛋白(HbA1c)下降,下降率为13.91%,自身干预前后比较差异有统计学意义(P<0.01),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);血糖(Glu)下降,下降率为0.76%,自身干预前后比较差异有统计学意义(P<0.01)。血常规、肝功能、肾功等安全性指标干预前后均无明显改变。结论大豆甙元能降低高胆固醇血症患者BMI、TC、HbA1c、Glu等心血管疾病危险因素。

大豆甙元成分的TLC-SERS研究

利用高效薄层色谱（ＴＬＣ）分离技术和表面增强拉曼散射技术（ＳＥＲＳ）的结合，获得了分析大豆甙元成分的新方法。ＳＥＲＳ结果表明，在ＴＬＣ原位约３μｇ样品就获得大豆甙元的主要振动特征谱带。通过表面增强光谱揭示出，ＳＥＲＳ与固体光谱的异同，并指明了大豆甙元与银溶胶的吸附模式。ＴＬＣ－ＳＥＲＳ使高效分离与指纹性鉴定结合，可对化学成分进行高灵敏度的检测。

大豆甙元对慢性应激大鼠海马BDNF和NPY表达及非特异免疫调节的作用

目的:探讨大豆甙元(Daidzein)对慢性应激抑郁模型大鼠海马脑源性神经生长因子(BDNF)、神经肽Y(NPY)蛋白表达和非特异免疫调节作用的影响。方法:取健康成年SD大鼠40只,雄性,体质量(210±19)g,清洁级,用1%蔗糖水喂养4 d,使动物原来的饮水习惯发生改变。第5天开始24 h禁水,但不禁食,第6天给予1%蔗糖水4 h,测1%蔗糖水的偏嗜度。根据1%蔗糖水偏嗜度和体重随机分成4组,每组10只,糖水偏嗜度和体重各组间没有显著差异(P>0.05)。正常对照组(CG)、模型对照组(MG)、氟西汀对照组(FG,10.0 mg/kg)、大豆甙元组(DG,80.0 mg/kg)。造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药32 d。造模方法为慢性轻度不可预见性的应激模型加孤养。观察大鼠的行为改变,免疫蛋白印记(Western blot)技术和免疫组织化学法检测海马BNDF和NPY表达,观察淋巴细胞增值功能,脾脏指数,外周血白细胞数目及抗体分泌细胞功能。结果:与正常对照组相比慢性应急刺激大鼠体重、蔗糖消耗量及大鼠旷场试验得分显著降低,游泳不动时间延长,海马BNDF和NPY表达水平低下,差异有统计学意义(P<0.01)。氟西汀治疗组和大豆甙元治疗组与模型对照组相比大鼠体重、蔗糖消耗量、大鼠旷场试验得分以及海马BNDF和NPY表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。大豆甙元组大鼠外周血白细胞数目、抗体分泌细胞功能及淋巴细胞增殖力显著高于模型组。大豆甙元剂量脾脏指数显著高于模型组(P<0.01)。结论:大豆甙元能显著拮抗慢性应激模型大鼠抑郁症状,大豆甙元可增加海马内BDNF和NPY蛋白的含量,并且有增强慢性应激模型大鼠体液免疫应答和淋巴细胞增殖能力的作用,大豆甙元拮抗慢性应激模型大鼠抑郁作用的机制可能与大豆甙元治疗后海马中BDNF和NPY蛋白含量增加及免疫调节作用有关。

大豆甙元对氧自由基所致PC12细胞毒作用的影响

目的:观察大豆甙元对氧自由基所致PC12细胞毒性作用的影响。方法:采用超氧自由基发生系统FeSO4/Vit C作用于PC12细胞,以大豆甙元拮抗其作用,观察细胞的形态学变化,MTT法检测细胞存活率情况。结果:FeSO4/Vit C作用后,PC12细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率增加;5×10-9M大豆甙元能明显改善其凋亡情况,细胞存活率升高。但随大豆甙元浓度升高,其作用降低,浓度达到5×10-8M时,不再有保护作用。当浓度进一步升高至5×10-5M时,其能促进细胞凋亡,且随浓度升高,促凋亡作用越明显。结论:大豆甙元在低浓度的情况下能对抗氧自由基所致PC12细胞毒性作用,高浓度时有细胞毒性作用。

竞争酶联免疫吸附法测定丹贝中大豆甙元

本文合成了两种不同载体蛋白的大豆甙元抗原，首次建立了丹贝活性成分大豆甙元酶联免疫吸附测定法。大豆甙元测定浓度范围为6.25～400μg／L（2．46×10-8～1．57×10－6mol／L）；检测限3．125μg／L；回收率88％～118％；亲和常数1．89×107，与芒柄花素交叉率1．6％；与槲皮素、儿茶素、单宁、乙酰甲醌及核黄素无交叉反应。