菌种组合比例对豆粕发酵过程中蛋白酶活及大豆肽转化率的影响

为了研究不同菌种组合比例对豆粕发酵过程中蛋白酶活及大豆肽转化率的影响,试验采用正交组合方法,以米曲霉、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌添加比例为3个因素,每个因素3个水平,按L9(33)设计发酵豆粕试验。结果表明:不同菌种添加比例(米曲霉:枯草芽孢杆菌:嗜酸乳杆菌)对组合菌种发酵豆粕过程中蛋白酶活的影响差异极显著(P<0.01)。菌种组合比例2:3:1处理组的中性蛋白酶、碱性蛋白酶及总蛋白酶活极显著地高于其他各处理组(P<0.01),菌种组合比例1:2:3处理组的酸性蛋白酶极显著地高于其他各处理组(P<0.01)。不同菌种组合比例对大豆肽转化率的影响差异极显著(P<0.01),3:3:3处理组大豆肽转化率极显著地高于其他各处理组(P<0.01),与3:2:1处理组差异不显著(P>0.05);3:2:1处理组极显著地高于其他处理组(P<0.01),显著高于2:2:2处理组(0.01<P<0.05)。

液体发酵法产大豆肽发酵条件的优化

为了提高B-1菌株发酵豆粕产大豆肽能力,采用单因素法和正交试验对B-1菌株的发酵培养基组成及发酵培养条件进行了优化。最终确定最适发酵培养基组成为蔗糖4%、豆粕浓度12%、MnCl20.05%、MgSO40.2%。通过对其进行发酵工艺条件参数的正交优化试验得出发酵培养基的最佳工艺参数:发酵时间48 h、装液量50 ml/250 ml、种龄14 h、pH值6.5。在此条件下B-1菌株液体发酵后大豆肽转化率为52.12%,与基础发酵培养基相比,大豆肽转化率提高了40.11%。本试验为高效降解豆粕中的大分子蛋白,提高大豆肽转化率和豆粕品质提供参考。

豆粕固态发酵产活性肽的发酵条件优化

以豆粕粉为原料,采用固态发酵法,接入产酶能力较强的米曲霉、黑曲霉和混合细菌进行发酵,以多肽转化率为指标对发酵过程中的发酵条件进行优化,单因素试验优化的发酵条件为:发酵时间102 h,发酵温度32℃,接种量4%。采用响应面分析法确定最适发酵工艺条件为:接种量2.6%,发酵温度32℃,发酵时间96～98 h,得到的大豆肽转化率为38.13%。层析柱分析得到分子量在500～1 000 Da之间的肽段是具有特殊生理活性的功能肽。

枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕产大豆肽的条件研究

在摇瓶条件下,以大豆肽转化率为指标,通过单因素试验和正交试验设计,优化得到最佳发酵培养基为豆粕粉80 g/L、麦芽糖15 g/L、磷酸二氢钾6 g/L。在10 L发酵罐条件下,研究了搅拌速率和通气量对枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕产大豆肽的影响,结果表明:当搅拌速率150 r/min、通气量5 L/min、发酵温度37℃时,发酵罐运转良好,在发酵48 h左右时,中性蛋白酶酶活力和大豆肽转化率均高于摇瓶培养,分别达到了852.5 U/mL和76.73%。

高产蛋白酶菌株的分离、筛选及鉴定

为了降解豆粕中的大分子蛋白为大豆肽,利用酪蛋白平板法作为筛选模型,从土壤中分离和筛选高产蛋白酶的菌株,选取水解圈直径与菌落直径比值较大的菌株液体发酵后进行蛋白酶活力和大豆肽转化率的测定,结果得到1株蛋白酶活力和大豆肽转化率较高的菌株B1,其酶活力达到111.8 U/mL,大豆肽转化率达到37.2%。对该菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。

枯草芽饱杆菌与米曲霉混合发酵制备豆粕饲料的研究

对枯草芽饱杆菌与米曲霉混合发酵制备豆粕饲料的条件进行了研究。研究结果表明在发酵72 h的条件下,枯草芽孢杆菌1389与米曲霉3.042混合发酵制备豆粕饲料的最佳发酵条件是:接种时间差6 h、发酵温度30℃、培养基含水量64%、菌种混合比例1∶1。在此条件下测得蛋白酶活值在980 U/g左右,大豆肽转化率在50%左右。

枯草芽孢杆菌与黑曲霉混合发酵制备豆粕饲料

本文对枯草芽饱杆菌与黑曲霉混合发酵制备豆粕饲料的条件进行了研究。研究结果表明在发酵时间为86小时的前提下,枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350混合发酵豆粕制备豆粕饲料的最佳发酵条件是:豆粕含量30%、菌种混合比例(枯草芽孢杆菌/黑曲霉)为1:2、发酵温度30℃,在此条件下测得发酵豆粕的蛋白酶酶活值为396.8 U/g,肽转化率值为40.8%。

单因素试验中不同发酵温度对组合菌种发酵豆粕的影响

为了研究不同发酵温度对组合菌种发酵豆粕过程中蛋白酶活及大豆肽转化率的影响,试验采用单因素方法,以24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃设计7个温度点,每个设计3个重复,自48h起每隔12h测定发酵培养基的蛋白酶活和大豆肽转化率。结果表明:不同发酵温度试验组对混合菌种发酵豆粕过程中蛋白酶活的影响差异极显著(P<0.01),发酵温度为30℃处理组的蛋白酶活极显著地高于其他各处理组(P<0.01)。在大豆肽转化率上,发酵温度30℃处理组极显著地高于24℃、26℃、28℃、36℃、34℃处理组(P<0.01)。

菌种接种时间差对组合菌种发酵豆粕的影响

为了克服单菌发酵豆粕饲料的缺点,利用米曲霉、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌组合菌种发酵豆粕,试验采用单因素法研究菌种接种时间差对豆粕发酵过程中蛋白酶活及大豆肽转化率的影响。结果表明:组合菌种发酵豆粕过程中总蛋白酶活及大豆肽转化率在不同接种时间差(3,6,9,12 h)各试验组间差异极显著(P<0.01),接种时间差为9 h蛋白酶活及大豆肽转化率极显著高于其他各处理组(P<0.01);接种时间差为9 h总蛋白酶活最高,此时蛋白酶大量分解大豆蛋白转化为大豆肽,肽转化率达到最高。

不同含水量对组合菌种发酵豆粕效果的影响

为了探讨组合菌种发酵豆粕培养基的适宜含水量,试验利用米曲霉、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌组合菌种发酵豆粕,采用单因素设计培养基含水量为40%、45%、50%、55%、60%、65%6个处理组,每个处理组设3个重复,自培养48小时起每隔12 h测定1次发酵培养基的蛋白酶活性和大豆肽转化率,分析组合菌种发酵培养基不同含水量对蛋白酶活性和大豆肽转化率的影响。结果表明:含水量为50%时,中性蛋白酶、碱性蛋白酶及总蛋白酶活性达到了最大值;培养基含水量为55%、60%处理组大豆肽转化率极显著高于40%、45%处理组(P<0.01),65%处理组显著高于40%、45%处理组(P<0.05),其他各处理组间差异不显著(P>0.05),含水量为60%时大豆肽转化率达到了最大值。说明培养基含水量为55%更利于生产的控制和饲料品质的保证。