大豆蛋白胨对粗糙脉孢菌3.1607产番茄红素的影响及其发酵条件优化

该试验以番茄红素产量及干质量为评价指标,通过单因素试验考察大豆蛋白胨对粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)3.1607产番茄红素的影响,并对其添加量、添加时间、菌种接种量进行优化。以单因素试验结果为基础,结合响应面法,对添加了大豆蛋白胨的粗糙脉孢菌发酵产番茄红素发酵条件进行优化。结果表明,当添加大豆蛋白胨时,孢子干质量及番茄红素的产量都明显提高,最佳发酵条件为:大豆蛋白胨添加量11 g/L、发酵55 h时添加、菌种接种量6%,添加后继续发酵51 h后孢子干质量达0.25 g/L,番茄红素产量达9.64 mg/L。

改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的应用效果

评估GB 4789.11-2014《食品安全国家标准食品微生物检验β型溶血性链球菌检验》中改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基的质量。选取国内三家(标记为A、B、C)和国外一家(标记为D)培养基生产商的胰蛋白胨大豆肉汤培养基(商品化脱水合成培养基)和相应添加剂,使用目标菌(乙型溶血性链球菌FSCC225016)和非目标菌(大肠埃希氏菌ATCC25922),依据GB4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物检验培养基和试剂的质量要求》中选择性增菌培养基的定性测试方法进行质量评估。同时不加添加剂进行试验。国内A、B和C三家改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值均为0,非目标菌浊度值为0。国外D改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基中目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为0;未加试剂的培养基目标菌浊度值为2,非目标菌浊度值为1。国内A、B、C三家的改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量评估证明是胰蛋白胨大豆肉汤培养基(不加添加剂)基础成分的问题;国产胰蛋白胨大豆肉汤培养基质量有待提高。

生物酶/ACF复合材料降解甲醛实验研究

以具有很强吸附能力的含活性炭腈氯纶纤维(ACF)为载体,将生物酶负载于ACF制成复合材料。实验研究了制备生物酶的最佳条件,探讨了大豆蛋白在不同酸、碱、蛋白酶条件下的水解效果;测定了生物酶负载到ACF上对甲醛的去除率。采用SEM,VIS-7220表征了ACF负载生物酶的形貌变化及甲醛去除率等性能。结果表明,柠檬酸水解大豆蛋白后,其氨基氮含量可达5.4%;将其水解产物负载到ACF上,对甲醛去除率可达77%。

黑曲霉高耐热葡聚糖酶的分子截短与制备条件优化

该文旨在通过分子截短的方式提高高耐热葡聚糖酶AnEglA6的表达水平并针对重组菌建立相应的发酵方法。高耐热β-葡聚糖酶在禽类饲料生产中有着重要作用。黑曲霉来源的葡聚糖酶AnEglA6具有优越的耐热性能,适合在禽类饲料中使用。采用C端截短方式对该葡聚糖酶进行分子精简,构建了去除连接桥和纤维素结合结构域的截短体基因eglA6c,分别在乳酸克鲁维酵母和巴斯德毕赤酵母中进行异源表达获得重组酶AnEglA6cK和AnEglA6cP。乳酸克鲁维酵母表达的重组酶AnEglA6cK最适温度为75℃,在80℃下酶活力半衰期达55 min,能短时耐受85℃高温,应用性能显著优于AnEglA6cP。针对截短体酶AnEglA6cK在发酵后期酶活力快速下降的问题,对发酵条件进行了优化。通过以大豆蛋白胨替代酪蛋白胨的方式延长产酶时间、大幅度提高了摇瓶发酵水平。

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢测量方法研究

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢是生物防护和灭菌效果评价的重要指示微生物,其量值准确可以保证评价的有效性和可比性。对枯草芽孢杆菌涂布平板法进行了方法验证和协同实验验证以及不确定度分析。结果显示,当平板上的菌落数在30~300 CFU之间时,该方法重复性和再现性均较好,室内重复性相对标准偏差为10.0%,室间相对标准偏差为14.1%。经统计分析,胰蛋白胨大豆琼脂培养基平板涂布法相对扩展不确定度为12.0%(k=2),适用于枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢定量测量,对于人员防护装备防护性能评价、消毒剂检测及灭菌质量控制具有重要意义。

2%NaCl TSB及单冻煮蛤肉中副溶血性弧菌生长模型的建立及应用

我国食源性疾病的发病率较高,其中由微生物引起的食物中毒案例占较大的比例。在沿海地区,夏秋季节的食物中毒案例中,有80%是由于食用被副溶血性弧菌污染的海产品造成的。本研究主要进行了副溶血性弧菌在特定温度下,在2%NaCl TSB及单冻煮蛤肉中生长曲线的测定,并用CurveExpert 1.3软件作为辅助工具,选取了四种模型(Logistic模型、Richards模型、Compertz模型、MMF模型)进行拟合,通过比较得出了最适的生长方程,建立了其在不同培养条件下的生长模型。通过考察副溶血性弧菌在不同环境条件下的生长情况,结合剂量—反应模型,估计了产品污染后在不同储存条件下的暴露时间,对产品的安全消费提出了建议。

乳源凝固酶阴性金黄色葡萄球菌挥发性代谢特征分析

为探究乳源金黄色葡萄球菌的挥发性代谢特征,从牛乳中分离得到5株凝固酶阴性金黄色葡萄球菌(31B、0250H、777H、S12-1和S2-2),采用顶空固相微萃取/气相色谱-质谱联用技术,分别对接种这5株菌的胰蛋白胨大豆肉汤(tryptic soy broth,TSB)和牛乳的挥发性代谢产物进行动态测定。结果表明,TSB中5株菌总计检出33个挥发性代谢产物,1-丁醇、乙酸、3-甲基-丁酸和2-丁酮是5株菌共同检出的典型挥发性代谢产物。牛乳中5株菌总计检出28个挥发性代谢产物,2-呋喃甲醇、辛酸和3-甲基-丁酸是5株菌共同检出的典型挥发性代谢产物。无论是在TSB还是牛乳中,3-甲基-丁酸始终是凝固酶阴性金黄色葡萄球菌稳定的挥发性代谢产物。不同菌株产生3-甲基-丁酸的强度不相同,同一菌株在TSB和牛乳两种不同基质中3-甲基-丁酸的产生强度也不相同。

3种培养基对鸡肉产品中两类耐药菌培养的影响

目的:评估不同培养基对鸡肉产品表面四环素耐药(T^(r))菌和磺胺耐药(S^(r))菌菌群的培养效果差异。方法:基于高通量测序技术,分析分别在脑心浸液肉汤(BHI)、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)3种培养基上培养获得的冷鲜鸡和鸡肉熟食表面T^(r)菌和S^(r)菌的菌群结构及丰度。结果:在冷鲜鸡表面鉴定到的101个属的耐药细菌中,仅在BHI、TSA和PCA培养基上获得培养的特有T^(r)菌属各有30,5,3个,特有S^(r)菌属各有9,8,14个;在鸡肉熟食样品表面鉴定到的50个属的耐药菌中,3种培养基上的特有T^(r)菌属分别为3,2,1个,特有S^(r)菌属分别为1,6,0个。耐药菌属丰度差异的Metastat分析结果表明,BHI和TSA对耐药菌群的结构影响具有较高的相似性,冷鲜鸡表面4种T^(r)菌(气单胞菌属Aeromonas spp.、水栖菌属Enhydrobacter spp.、乳杆菌属Lactobacillus spp.和泛菌属Pantoea spp.)和2种S^(r)菌(肠球菌属Enterococcus spp.和乳杆菌属Lactobacillus spp.)在PCA培养基上获得培养的稳定性及丰度均较高。结论:不同培养基获得耐药菌的种类及丰度存在差异,应汇总多种培养基培养所得菌群的测序信息,才能完整描述鸡肉样品表面耐药菌的组成。

对虾中副溶血性弧菌生长模型的建立

为评估对虾中副溶血性弧菌的危害,建立对虾和2.5%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）中副溶血性弧菌的生长模型。采用修正Gompertz、修正Logistic、Richards和Baranyi模型拟合在15-40℃下副溶血性弧菌的生长曲线,选出最适生长模型。以平方根模型和Davey模型为二级模型,分别对最适模型的生长速率和延滞期进行拟合,并采用偏差因子和准确因子来验证模型的可靠性。结果表明,修正Compertz模型的拟合度较好,二级模型对生长速率和延滞期的拟合度较好,偏差因子和准确因子均在可接受范围内,能有效预测15-40℃温度条件下对虾中副溶血性弧菌的生长。

食品中β-溶血性链球菌检验技术的研究

〔目的〕通过对食品中β-溶血性链球菌检验技术的研究,选择操作性强、证实方法简便准确、检测周期较短的检验技术,为今后修订国家标准,向国际标准化靠拢提供有利依据。〔方法〕利用胰蛋白胨大豆肉汤TSB增菌液、哥伦比亚CNA血琼脂平板厌氧培养、API20STREP生化鉴定试剂盒及常规生化鉴定检测食品中的β-溶血性链球菌。〔结果〕试验结果显示,本方法适用于β-溶血性链球菌的培养、分离与鉴定。胰蛋白胨大豆肉汤TSB增菌液、哥伦比亚CNA血琼脂平板的增菌、分离效果优于GB/T4789.11-2003中的葡萄糖肉浸液肉汤和普通血琼脂。〔结论〕API 20 STREP快速鉴定系统更是为简化操作程序,缩短检测周期提供有效方法。

不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力影响的研究

目的研究不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力的影响。方法采用悬液定量和载体定量杀菌试验方法,对不同培养基培养出的枯草杆菌黑色变种芽孢抗力进行比较。结果相同培养条件下,胰蛋白胨大豆琼脂培养基与普通营养琼脂培养基培养制备出的20 ml芽孢悬液的浓度分别为4.52×109cfu/ml和2.15×109cfu/ml。湿热100℃作用20 min、干热160℃作用10 min、5 000 mg/L的邻苯二甲醛溶液作用40 min、2 000 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用15 min,对两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭率均为99.99%。结论两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的抗力无明显差异。