两种大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液粉末化特性研究

将超声处理及高压均质后的纳米乳液,直接利用真空冷冻干燥法制备了大豆蛋白-磷脂酰胆碱的乳化粉末,并进一步通过扫描电子显微镜、激光粒径分析仪、红外光谱等手段对真空冷冻干燥粉末以及复原乳液的物理化学等特性进行研究。研究发现冻干粉末复原乳液水复溶性良好,基本保持了与原始乳液相同的纳米级粒径。扫描电子显微镜及冻干粉末的粒径分布显示超声和高压均质制备的纳米乳液粉末结构致密均匀,表面无裂缝和孔隙,且高压均质制备粉末的表面更为平整,粒径分布总体呈现单峰分布,粒径平均值仅为6.13μm。使用超声和高压均质制备的纳米乳液冻干粉末的包埋产率和效率均达到90%以上,同时超声制备的纳米乳液冻干粉末更有利于β-胡萝卜素的包埋,更好地防止β-胡萝卜素损失。采用红外光谱学实验验证后发现,高压均质制备纳米乳液粉末的蛋白α-螺旋与β-折叠结构含量较低。与大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液相比,真空冷冻干燥粉末的储藏稳定性及货架期显著提高。

大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液高压均质工艺研究

以高压均质技术制备大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液,对其特性及稳定性进行试验分析,通过单因素响应面优化确定大豆蛋白-磷脂酰胆碱复合成稳定纳米乳液最优配比:大豆蛋白添加量1.5%,大豆磷脂酰胆碱添加量0.22%,高压均质压力100MPa,此条件下大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液平均粒径217.43nm,TSI为3.02,乳化产率为93.35%。

超声及高压均质处理对大豆蛋白-磷脂酰胆碱相互作用的影响

为揭示不同物理处理对大豆蛋白-磷脂酰胆碱间相互作用的影响,采用荧光猝灭法分析超声及高压均质处理下大豆蛋白-磷脂酰胆碱间相互作用及作用力类型,利用三维荧光光谱探究蛋白构象变化。内源猝灭荧光研究表明:磷脂酰胆碱对大豆蛋白有猝灭作用,在超声及高压均质处理下大豆蛋白最大荧光发射波长均发生红移,两种物理处理均使大豆蛋白-磷脂酰胆碱存在相互作用;高速分散处理、超声及高压均质处理下大豆蛋白-磷脂酰胆碱相互作用的吉布斯自由能绝对值大小排序为:高压均质处理>超声处理>高速分散处理,说明高压均质作用及超声处理均可增强大豆蛋白-磷脂酰胆碱的相互作用强度,且高压均质作用的效果较超声处理更为显著(P<0.05)。三维荧光光谱研究表明:高压均质处理对大豆蛋白-磷脂酰胆碱相互作用的影响显著高于超声处理(P<0.05)。本研究结果为将超声及高压均质处理运用于制备大豆蛋白-磷脂酰胆碱纳米乳液提供参考。

射流空化对大豆分离蛋白-磷脂酰胆碱乳化特性的影响

为探究射流空化对大豆分离蛋白(soy protein isolates,SPI)-磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)复合体系乳化特性影响,采用荧光光谱表征复合体系构象变化,并分析乳层析指数、粒径、微观结构、表面疏水性和乳化活性及乳化稳定性解析射流空化对SPI-PC复合乳液结构变化及理化/功能性质的影响。结果表明:射流空化能显著改善复合乳液理化性质及乳化性等功能特性,与SPI相比,0.2 MPa、10 min处理组SPI-PC复合乳液的乳化活性指数和乳化稳定性指数分别增加了82.7%和9.43倍。通过动态光散射和光学显微镜验证了射流空化处理SPI-PC较未射流空化处理样品的平均粒径减小,且表面疏水性提高,其中空化压力0.2 MPa、空化时间10 min时,复合乳液的平均粒径最低,表面疏水性最高;说明射流空化处理会使SPI疏水基团暴露,使SPI与PC之间的相互作用增加。荧光光谱分析说明空化作用力对SPI产生了猝灭作用。

多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠肝脏SREBP-1c与ABCA1蛋白表达的影响

目的观察多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏SREBP-1c、ABCA1蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料建立SD大鼠NAFLD模型,并用多烯磷脂酰胆碱胶囊进行干预治疗4周,观察该药对大鼠血脂、肝脏脂肪含量的影响,并用免疫组化法观察药物对大鼠肝脏SREBP-1c、ABCA1蛋白表达的影响。结果空白组、观察组肝脏TG、TC含量明显低于模型组(P<0.01);同时SREBP-1c蛋白表达水平也明显低于模型组(P<0.01),但观察组与空白组比较差异无统计学意义;而ABCA1蛋白表达水平均明显高于模型组(P<0.01)。结论对肝脏组织SREBP-1c蛋白表达的下调,以及对ABCA1蛋白表达的上调,可能是多烯磷脂酰胆碱改善NAFLD的重要机制。

葛根素对溶血磷脂酰胆碱诱导血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:观察葛根素对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨葛根素抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:用不同浓度(1.0～10.0mg/L)的溶血磷脂酰胆碱(LPC)孵育体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24h,观察培养上清液中MMP-9含量的变化。不同浓度(10-6～10-4mol/L)的葛根素预先孵育平滑肌细胞4h,然后加入LPC(5.0mg/L)作用24h,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中MMP-9含量,实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测平滑肌细胞MMP-9 mRNA的表达,蛋白印迹法(Western blot)检测NF-κB p65蛋白的表达。结果:LPC能明显增加上清液中MMP-9的含量,而预先应用不同浓度的葛根素干预后,MMP-9含量、mRNA表达以及NF-κB p65蛋白的表达水平均明显降低,并且具有剂量依赖性。结论:LPC通过激活NF-κB p65而使平滑肌细胞MMP-9表达增强,而葛根素对上述效应具有抑制作用。

双歧杆菌三联活菌联合多烯磷脂酰胆碱与运动-饮食护理干预在非酒精性脂肪性肝病患者中的应用效果

目的分析非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者应用双歧杆菌三联活菌联合多烯磷脂酰胆碱与运动?-?饮食护理干预的效果,为临床治疗NAFLD提供参考依据。方法采用随机数字表法将黄石市第五医院于2021年1月至2023年7月期间收治的107例NAFLD患者分为对照组(53例,采用多烯磷脂酰胆碱+运动-饮食护理干预治疗)和观察组(54例,在对照组的基础上联合双歧杆菌三联活菌治疗)。两组患者均连续治疗3个月。对比两组患者的临床疗效,治疗前后的脂肪衰减系数(CAP)、肝脏硬度(LSM)及血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-Lac)、肝功能指标,以及治疗期间的不良反应发生情况。结果观察组患者临床疗效和总有效率高于对照组;治疗后观察组患者CAP及两组患者血清DAO、D-Lac水平与治疗前比均降低,且观察组血清DAO、D-Lac均低于对照组;治疗后两组患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、层黏连蛋白(LN)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))与治疗前比均降低,且观察组均低于对照组(均P<0.05);治疗前后两组患者组内和组间LSM及对照组患者CAP比较,以及治疗期间两组患者不良反应总发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论NAFLD患者应用双歧杆菌三联活菌联合多烯磷脂酰胆碱与运动-饮食护理干预疗效显著,能有效改善其肠黏膜屏障功能和肝功能,且安全性良好。

氟伐他汀对溶血磷脂酰胆碱致内皮细胞粘附分子和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的：观察氟伐他汀对内皮细胞粘附分子（intercellular adhesion molecule，ICMA）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响，探讨氟伐他汀抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，待细胞生长到融合状态时加入溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LPC）5mg／L作用0、12、24、48h，观察LPC对ICAM和MMP-9表达的影响。不同浓度（10^-7 -10^-5mol／L）的氟伐他汀预先孵育20min，然后加入LPC（5nvdL）作用24h，用免疫细胞染色法检测核因子-κBp65（NF-κBp65）、ICAM-1、血管细胞粘附分子-1（vasettlar cell adhesion molecule-1。VCAM-1）蛋白和用RT-PCR检测MMP-9mRNA的表达水平。结果：LPC能明显增加ICAM-1、VCAM-1和MMP-9的表达，相关分析表明，NF-κBp65与ICAM-1、VCAM-1和MMP-9的表达呈直线相关关系。而预先应用不同浓度的氟伐他汀干预后，上述效应明显减弱，并且具有剂量依赖性。结论：LPC通过激活NF-κBp65而导致内皮细胞ICAM-1、VCAM-1和MMP-9的表达增强，而氟伐他汀对上述效应有抑制作用。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物与水飞蓟宾对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤保护作用的对比

目的比较水飞蓟宾 磷脂酰胆碱复合物 (SPC)与水飞蓟宾对四氯化碳所致的小鼠肝损伤的保护作用。方法 5 0只小鼠随机分成 5组 ,通过对对照组、给药组小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织学观察 ,比较SPC与水飞蓟宾对四氯化碳所致小鼠肝损伤之预防作用的效果。结果水飞蓟宾和SPC均能降低小鼠血清ALT、AST活性 ,能减轻肝脏病理学变化 ,但以SPC作用最为明显。结论SPC对四氯化碳造成的急性肝损伤有明显的保护作用 ,SPC的作用强于水飞蓟宾。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对四氯化碳(CCl4)所致的小鼠急性肝损伤的预防和治疗作用。方法:50只小鼠随机分成5组,每组10只:正常对照组、模型组、预防组、治疗组和预防+治疗组,采用CCl4造成小鼠急性肝损伤模型,预防组于注射CCl4前多次给小鼠灌服SPC,治疗组于注射CCl4后给SPC,预防+治疗组于注射CCl4前后均给SPC,24h后采血,分离血清,检测血清ALT和AST活性,并取肝组织观察比较肝脏病理组织学改变。结果:SPC明显降低小鼠血清ALT和AST活性,治疗、预防及预防+治疗组与模型组比较差异均有极显著性(P<0.01),预防组与治疗组比较差异有显著性(P<0.05),预防+治疗组与治疗组比较差异有极显著性(P<0.01),且均能改善肝脏病理组织学变化。结论:SPC对CCl4造成的急性肝损伤有明显的预防和治疗作用。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对异硫氰酸-α-萘酯致小鼠肝损伤的保护作用

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对异硫氰酸-α-萘酯(ANIT)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法小鼠40只随机均分成4组:正常对照组、ANIT模型组、ANIT+SPC低剂量(150 mg/kg)、ANIT+SPC高剂量(300 mg/kg)组。前两组予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)悬液灌胃,后两组分别予SPC(150、300 mg/kg)CMC-Na悬液灌胃,连续1周。末次予SPC 12 h后,正常对照组灌胃予花生油,余3组予ANIT 60 mg/kg(花生油配制),制成小鼠急性肝损伤模型,16 h(禁食不禁水12h)后摘眼球采血,分离血清,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果予ANIT后,模型组小鼠血清ALT、AST、TB、MDA明显升高,SOD活性明显降低;SPC能明显对抗这种改变,SPC组(1503、00 mg/kg)与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论SPC对ANIT造成的急性肝损伤有明显的保护作用。

水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物的制备及体外溶出速率评价

目的:通过水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物的处方工艺研究,筛选得率和体外溶出速率高的制备处方和工艺并对其进行复合机理的研究。方法:采用正交实验设计制备水飞蓟素-磷脂复合物,以得率和体外溶出速率筛选最佳处方。结果:经处方筛选得最佳复合工艺条件为:水飞蓟素与磷脂摩尔比1∶2,温度45℃,反应时间3 h。经差热分析和核磁共振法证实水飞蓟素与磷脂经复合形成了新的复合物。其复合物体外溶出速率为市售益肝灵片剂的2.27倍。结论:水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物可提高水飞蓟素的溶出速率,是一种值得开发的水飞蓟素产品。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对糖尿病小鼠肾非酶糖基化的抑制作用

[目的]探讨水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(silybin-phosphatidylcholine compound,SPC)对糖尿病小鼠肾非酶糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的抑制作用。[方法]小鼠70只,随机选10只作为正常对照组,其余60只尾静脉注射80 mg.kg-1四氧嘧啶(Alloxan)造模,72 h后测空腹血糖,将血糖值﹥16.7 mmol.L-1的小鼠41只随机分为模型组、SPC高剂量组、SPC中剂量组、SPC低剂量组,正常对照组和模型组每日灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)混悬液,SPC高、中、低剂量组分别给予SPC(用0.5%CMC-Na配成一定浓度的混悬液)400、200、100 mg.kg-1灌胃,连续12周,并于第4、8、12周剪尾采血测血糖。12周末摘眼球取血,分离血清检测血清中肌酐、尿素氮、糖化血清蛋白,同时取肾组织匀浆测SOD与MDA、取肾皮质测AGEs。[结果]SPC对糖尿病小鼠血糖浓度无明显影响(P﹥0.05),但能明显降低糖尿病小鼠血清中肌酐(Crea)、尿素氮(BUN)、糖化血清蛋白(果糖胺,Fmn)及肾皮质中AGEs的含量,抑制肾组织中SOD活性的降低和MDA值的升高(与模型组比较,P﹤0.05)。[结论]高、中剂量SPC(400、200 mg.kg-1)对糖尿病小鼠肾非酶糖基化产物的形成有抑制作用。

十六烷基磷脂酰胆碱复合聚ε-己内酯电纺微球的制备及表征

目的用静电纺技术制备载表面活性剂型药物十六烷基磷脂酰胆碱的聚ε-己内酯微球并对其进行初步表征。方法将十六烷基磷脂酰胆碱、聚ε-己内酯和胆固醇共同溶解在二氯甲烷-乙酸-四氢呋喃混合溶剂中形成均相溶液后静电纺。将纺得物冻干后扫描电子显微镜进行形态观察,图形软件评价其粒度及分布。广角X-射线、差示热分析及热重分析考察十六烷基磷脂酰胆碱在微球中的存在状态。结果可由十六烷基磷脂酰胆碱、胆固醇与聚ε-己内酯所组成的溶液体系电纺得到微球,药物本身载量的增高和胆固醇的添加使得微球球形度变差。扫描电子显微镜下观察到小球周长<10μm和纤维直径<500 nm的珠串状微球-纤维复合体系。广角X-射线衍射和热分析可知十六烷基磷脂酰胆碱与聚ε-己内酯结合良好。结论静电纺有可能作为一种新的制备微球的理想方法进行开发。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对小鼠急性肝损伤保护作用的量效关系

目的 观察不同剂量水飞蓟宾 -磷脂酰胆碱复合物 (SPC)对四氯化碳 (CCl4)所致小鼠急性肝损伤的影响。方法 雌性小鼠随机分组给药后测定血清中谷丙转氨酶 (ALT)和谷草转氨酶 (AST)活性 ,取肝组织作病理学检查。结果 不同剂量的水飞蓟宾 -磷脂酰胆碱复合物均可明显降低CCl4所致小鼠血清中ALT和AST活性升高 ,并与剂量呈正相关。SPC组肝组织变性、坏死的程度亦明显减轻 (P <0 .0 0 1,P<0 .0 1,P<0 .0 5 )。结论 SPC对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用 ,高、中、低剂量组间降酶作用呈明显的量效关系。

壳聚糖磷脂酰胆碱对轻度认知障碍患者血清白介素-1β和肿瘤坏死因子α及海马中脑代谢物质的影响

目的探讨壳聚糖磷脂酰胆碱对轻度认知障碍(MCI)患者血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及海马脑代谢产物的影响。方法从潍坊市老人院按照MCI诊断标准选取MCI患者18例(MCI组),同时选取性别、年龄与MCI患者相匹配的健康老年人17例作为对照组。MCI组给予壳聚糖和磷脂酰胆碱,共服用2个月。对照组不服药。采用放射免疫法检测两组被检者的血清IL-1β和TNF-α水平,采用磁共振波谱成像技术检查海马N-乙酰天门冬氨酸(NAA)/肌酐(Cr)、胆碱(Cho)/Cr、肌醇(MI)/Cr的值。MCI患者分别在服用药物前后采集血标本进行检测及进行磁共振波谱成像检查。采用SPSS 13.0统计软件进行数据处理与分析。结果 MCI组治疗前血清IL-1β、TNF-α较对照组明显升高(P<0.05),MCI组治疗后血清IL-1β、TNF-α较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。MCI组NAA/Cr较对照组降低(P<0.05),MI/Cr较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);MCI组NAA/Cr及MI/Cr治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.05);对于Cho/Cr,对照组与MCI组比较,以及MCI组治疗前后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论壳聚糖磷脂酰胆碱能降低MCI患者的血清IL-1β及TNF-α水平;并改善海马的代谢,对MCI有一定的治疗作用。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对小鼠急性肝损伤的预防和治疗作用

目的:研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对小鼠急性肝损伤的预防和治疗作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组、预防组、预防治疗组和治疗组,用四氯化碳造成急性肝损伤模型,用水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)进行预防和治疗。结果:CCL4造成小鼠急性肝损伤,出现明显肝功能异常。预防组、预防治疗组和治疗组的小鼠血清ALT和AST水平均比模型组明显降低(P<0.01,P<0.05);肝细胞变性、坏死等病理损伤也均比模型组明显减轻。结论:SPC对四氯化碳造成小鼠急性肝损伤模型具有保护、修复肝细胞的作用。

1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱在诊断缺血性心脏病中的价值研究

目的筛选缺血性心脏病(IHD)患者血清内发生重要浓度变化的代谢物并探讨其临床价值。方法检测52例IHD患者和45名正常对照者10项与诊断心肌缺血或梗死有关的血液常规生化指标[包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、C-反应蛋白(CRP)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)]。血清中主要代谢物的代谢组学分析利用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)技术进行。相应数据经统计分析后,筛选并鉴定出有重要变化的代谢物。结果应用HPLC-MS发现4个平均质荷比(m/z)分别为496.33、478.34、184.13和991.71的离子碎片。经鉴定,4个离子碎片均来自于1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱(C16:0)。IHD组血清1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱(C16:0)浓度为(76.35±18.28)μmol/L,明显高于正常对照组[(64.24±15.56)μmol/L,P<0.001]。IHD组其他传统心肌指标与对照组比较,除AST升高外(P<0.05),其余9项均无明显差异(P>0.05)。受试者工作特性(ROC)曲线显示,诊断IHD时1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱(C16:0)的ROC曲线下面积(0.90±0.03)显著高于其他常规生化指标(P<0.05)。结论 1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱(C16:0)对IHD具有重要的临床价值。

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对氯仿所致肝损伤的保护作用

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对氯仿(CHCl3)所致小鼠肝损伤的保护作用。方法40只小鼠随机分成4组:正常对照组、CHCl3损伤组、CHCl3+SPC低剂量组、CHCl3+SPC高剂量组。前两组给予羧甲基纤维素钠(CMC-Na)混悬液灌胃,后两组分别给予SPC,连续8 d。最后一天给予SPC后2 h腹腔注射CHCl3致肝损伤,16 h后采血、分离血清,检测血清中ALT、AST活力,测肝组织中MDA和SOD值。结果损伤组小鼠血清中ALT、AST和肝组织中MDA值明显升高,SPC明显降低血清中ALT、AST值,SPC组肝组织中MDA值降低、SOD活力增加,SPC组与损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SPC对CHCl3造成的急性肝损伤有明显的保护作用。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定中/长链脂肪乳注射液中磷脂酰胆碱含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定脂肪乳注射液中磷脂酰胆碱（PC）含量。方法采用Lichrospher 100Diol柱（4．6mm×250mm，5μm），以正庚烷-异丙醇（86：114）为流动相A，正庚烷-异丙醇-水（31：62：12）为流动相B，进行梯度洗脱。流速为1．0mL·min^-1，柱温为40℃；蒸发器温度80℃，空气，喷气流速为2．0L·min^-1，结果磷脂酰胆碱的线性范围为0．134～0．938g·L^-1，r=0．9982（n=7），PC加样回收率为98．9％，RSD为0．3％（n=9）。结论本法操作简便快速、重复性好、灵敏度高、准确、专属性高。