基于蛋白质组学和液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱测定鱼糜制品中的大豆过敏原蛋白

目的:建立鱼糜制品中痕量大豆过敏原蛋白的液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱(Qtrap-LCMS/MS)的检测方法。方法:选择大豆中的致敏蛋白Glycinin G2作为目标蛋白,筛选出该致敏蛋白的特异肽段:EAFGVNMQIVR,人工合成特异肽段,建立联合应用多反应监测-信息依赖-增强型子离子扫描(MRM-IDA-EPI)定性定量测定鱼糜制品中痕量大豆过敏蛋白的方法。结果:鱼糜制品中大豆过敏原蛋白定量限为:0.108μg/g。方法的线性方程及相关系数:Y=14895 X-38916,R^2=0.9975。方法的回收率78.2~108.3%。结论:本方法采用多反应监测定量的同时结合了增强子离子扫描谱库检索进一步定性,实现了同时定性和定量测定,可以有效的应用到鱼糜制品中大豆过敏原蛋白的检测,具有良好的应用前景。

大豆球蛋白提取纯化工艺研究

目的:大豆蛋白因其具有丰富的营养物质被广泛用于食品加工行业,而由此带来的食品致敏问题却给大豆敏感人群带来了极大的危害,其中11S球蛋白是一种主要的大豆过敏原,故本文就大豆球蛋白提取纯化工艺进行研究。方法:本实验通过碱溶酸沉法从大豆中分离纯化出大豆球蛋白(11S球蛋白)。通过设置浓度、料液比、p H、提取液的单因素对比实验,研究对大豆球蛋白提取的影响,并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对提取的11S球蛋白进行纯度分析,利用正交试验确定最佳分离优化条件。结论:结果显示使用提取液pH8.0、Tris-HCl缓冲液、料液比1∶15、提取液浓度0.10 mol/L的条件下11S球蛋白提取率为44%。