大青叶药材HPLC指纹图谱的优化研究及聚类分析

目的 建立并优化大青叶的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合聚类分析(CA)对不同产地及批次的大青叶药材质量进行比较研究。方法 采用HPLC建立10个批次大青叶药材的指纹图谱,对其进行了相似度比较,并运用SPSS软件进行CA分析。结果 优化了色谱柱、流动相条件,建立了大青叶药材的共有指纹特征图谱;CA将所有批次大青叶药材共分为3类,反映了10个批次药材的质量特征差异。结论 HPLC指纹图谱结合CA可对不同产地、不同批次大青叶药材质量的差异进行客观、有效的评价分析,为全面控制大青叶药材的质量提供依据。

运用近红外光谱技术快速测定大青叶中靛玉红含量

目的运用近红外光谱技术快速测定大青叶中靛玉红含量,建立靛玉红的近红外定量分析模型,并通过模型分析评价大青叶的品质。方法采用传统的高效液相色谱法对74批大青叶中靛玉红含量进行测定及方法学验证,运用偏最小二乘法建立靛玉红含量与近红外光谱之间的定量校正分析模型,并对验证集样品进行含量预测,将预测值与实际测定值进行统计分析。结果靛玉红浓度在1.04~3.13μg·ml^(-1)范围内线性良好,回归方程为Y=11566X+911.7,r=0.9990;精密度、重复性、12 h内稳定性的RSD分别为0.31%、0.86%、1.11%;加样平均回收率为99.22%。建立的定量分析模型准确性好,内部交叉验证均方差、内部交叉验证决定系数分别为0.226、0.983。通过对24份校正集样品进行外部验证,近红外预测值与高效液相测定值的预测回收率为93.66%。对两组数据进行方差显著性分析,其显著性指标值分别为0.540和0.428,表明两种试验方法的数据差异无统计学意义,该模型的精度和再现性均符合规定。结论近红外光谱技术对大青叶中靛玉红含量测定结果较好,建立的定量分析模型可以无损、快速、准确地对大青叶进行质量评价,提高生产效率。

大青叶洗剂治疗ICU患者导尿管相关尿路感染疗效观察

目的:探索大青叶洗剂对重症监护室患者导尿管相关尿路感染(CAUTI)的疗效。方法:选取2019年1月至2022年6月本院ICU科室200例CAUTI患者,随机均分为对照组和观察组。观察组用大青叶洗剂擦洗会阴部和尿道口,对照组用温开水擦洗相同部位。收集两组擦洗前、擦洗后2~3min、2h、4h会阴部标本送细菌室培养。比较两组细菌丰度、细菌菌落总数、细菌清除率和CAUTI发病率。结果:相比对照组,观察组在擦洗后细菌丰度显著改变,细菌菌落总数和CAUTI发病率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大青叶洗剂能显著降低ICU患者会阴部细菌总数,减少CAUTI的发生。

大青叶黄酮化合物的分离纯化及对小鼠运动耐力的影响

采用大孔树脂纯化大青叶黄酮提取物后,比较提取物与纯化物对小鼠运动耐力的影响。以吸附率、解吸率及产物中总黄酮含量为评价指标,优化大青叶黄酮提取物的纯化工艺条件,并测定小鼠的力竭游泳时间和相关抗疲劳生化指标。结果表明,采取AB-8大孔树脂纯化大青叶总黄酮提取物的最佳工艺条件为:上样浓度1.0 mg/mL、上样液pH 3.5、上样体积50 mL、上样流速1.5 mL/min、乙醇溶液体积分数70%、洗脱液用量80 mL、洗脱流速1.0 mL/min。该条件下所得产物的总黄酮含量为65.0%,约为纯化前3.3倍。与空白对照组和提取对照组相比,大青叶黄酮纯化物有助于增长小鼠的运动时间,减少乳酸、尿素氮在体内的累积与丙二醛的生成,提高肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力,具有良好的抗运动疲劳活性。

大青叶和黄柏提取物的体外抑菌活性研究

以传统中草药大青叶、黄柏为原料,以声波提取时间、乙醇浓度、超声频率、药物配比为影响因素,以抑菌圈直径为评价指标,通过正交试验对其提取工艺进行优化。结果表明,大青叶、黄柏提取物对金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的抑菌效果较明显,当提取时间为30 min、乙醇浓度80%、超声频率100 Hz、药配比6∶4时,对金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用,抑菌圈直径达18 mm。当提取时间为30 min、乙醇浓度80%、超声频率90 Hz、药配比3∶7时,对蜡样芽孢杆菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径为16 mm。研究结果对资源的合理利用及开发具有重要意义,可为临床提供依据。

Multidisciplinary strategies to enhance therapeutic effects of flavonoids from Epimedii Folium:Integration of herbal medicine,enzyme engineering,and nanotechnology

Flavonoids such as baohuoside I and icaritin are the major active compounds in Epimedii Folium(EF)and possess excellent therapeutic effects on various diseases.Encouragingly,in 2022,icaritin soft capsules were approved to reach the market for the treatment of hepatocellular carcinoma(HCC)by National Medical Products Administration(NMPA)of China.Moreover,recent studies demonstrate that icaritin can serve as immune-modulating agent to exert anti-tumor effects.Nonetheless,both production efficiency and clinical applications of epimedium flavonoids have been restrained because of their low content,poor bioavailability,and unfavorable in vivo delivery efficiency.Recently,various strategies,including enzyme engineering and nanotechnology,have been developed to increase productivity and activity,improve delivery efficiency,and enhance therapeutic effects of epimedium flavonoids.In this review,the structure-activity relationship of epimedium flavonoids is described.Then,enzymatic engineering strategies for increasing the productivity of highly active baohuoside I and icaritin are discussed.The nanomedicines for overcoming in vivo delivery barriers and improving therapeutic effects of various diseases are summarized.Finally,the challenges and an outlook on clinical translation of epimedium flavonoids are proposed.

大青叶化学成分的研究

目的研究大青叶Isatidis Folium的化学成分。方法大青叶75%乙醇提取物采用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为(Z)-9-heptadecenoic acid(1)、(7 R,8S)-赤式-愈创木基丙三醇(2)、2,6-二甲氧基-4-羟基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、isotachioside(4)、tachioside(5)、(3 S,5R,6R,7E,9S)-megastigman-7-ene-3,5,6,9-tetrol 3-O-β-D-glucopyranoside(6)、6-O-β-D-glucopyranosy-β-D-(1-O-sinapoyl-2-O-feruloyl)glucopyranose(7)、2-(乙酰胺基)-苯甲酸(8)、芥子酸(9)、4-O-sinapoyl-α/β-D-glucopyranose(10)、6,6′-di-O-sinapoylsurcose(11)、6-O-β-D-glucopyranosy-β-D-(1-O-sinapoyl-2-O-sinapoyl)glucopyranose(12)、对苯二甲酸二丁酯(13)、胭木二酮(14)、反式-4-苯基-3-丁烯酸(15)、N-butyl-N′-(2′-nitrophenyl)urea(16)。结论化合物16为新天然产物,化合物1~8、10~15为首次从菘蓝属植物中分离得到。

蓼大青叶标准汤剂鸟苷含量测定及指纹图谱研究

目的 建立蓼大青叶标准汤剂鸟苷含量测定及指纹图谱分析方法。方法 采用Agilent ZORBAX Bonus-RP色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);以甲醇-水为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^(-1);柱温30℃;进样量10μL;检测波长260 nm。测定15批蓼大青叶样品中鸟苷含量,进行相似度评价,建立15批标准汤剂指纹图谱,并确认共有色谱峰。结果 15批标准汤剂鸟苷含量范围1.67 mg·g^(-1)~2.84 mg·g^(-1);指纹图谱共确定9个共有峰,相似度均大于0.98,并通过对照品对比指认出尿苷、鸟苷和腺苷3个特征峰。结论 建立的标准汤剂鸟苷含量测定及指纹图谱分析方法稳定,重复性良好,可为后续质量标准的研究及建立提供参考。

不同板蓝根品种在金昌地区的引种对比及大青叶采收茬数试验研究

为了筛选适宜金昌地区大面积推广种植的板蓝根品种,解决板蓝根生产中品种混杂、产量低的问题,本文引进了小叶板蓝根(安国)、四倍体板蓝根(安国)、小叶板蓝根(国药)3个板蓝根品种,以当地栽培品种(JC-1)为对照,开展了引种对比及大青叶采收茬数试验研究。结果表明:3个品种在金昌地区种植的植物学及经济学性状表现不同,其中四倍体板蓝根(安国)产量高、抗病性强,适宜在金昌地区推广种植;板蓝根大青叶采收试验表明,过早采收叶片(8月1日)并采收2次会导致板蓝根产量显著下降,在根部采收前15~20 d时割大青叶有利于干物质在根部积累,可显著提高板蓝根产量。

大青叶蝉防治效果试验

大青叶蝉是核桃重要害虫,以成虫晚秋产卵在核桃枝干上,受害枝条逐渐干枯死亡。试验采用不同方法进行大青叶蝉的防治,均取得了较好防效。

Analysis on Therapeutic Potential and Action Mechanism of Folium Pyrrosiae Based on Biolabel Pattern

[Objectives]The therapeutic potential and action mechanism of Folium Pyrrosiae were analyzed based on the biolabel pattern.[Methods]The chemical components of Folium Pyrrosiae were analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry(LC-MS).Ten databases,including Pubchem,CTD,BindingDB,HERB,TCMIP,ETCM,SwissTargetPrediction,SuperPred webserver,TargetNet and SEA,were used in turn to retrieve the targets of related components,and key components were obtained according to the enrichment degree of targets.The obtained targets were imported into the STRING database to obtain PPI information and screen out core targets.The DAVID database was employed to analyze KEGG pathways of core targets and obtain key pathways.A key component-core target-key pathway network of Folium Pyrrosiae was constructed by Cytoscape3.10.1 software.The obtained KEGG pathways were input into the CTD database to predict corresponding diseases,and discussion and analysis were carried out.[Results]Ten key components,30 potential targets and 10 key pathways were screened out,and they participated in many diseases,of which five diseases were mainly analyzed.[Conclusions]Folium Pyrrosiae had the characteristic of multi-component,multi-target and multi-pathway synergistic effect in the treatment of lung cancer,type 2 diabetes,atherosclerosis,liver cancer,prostate cancer and other diseases,and the therapeutic potential and action mechanism of Folium Pyrrosiae were analyzed through the biolabel pattern.This study provides a research basis for further developing new functions of Folium Pyrrosiae.

大青叶、大青叶提取物及大青叶组方在猪病防治中的应用

大青叶,是由菘蓝(一种十字花科植物的叶子)干制而成。最早记载于汉末的《名医别录》,距今已有近1800年的药用历史。本品性苦寒,有清热解毒,凉血消斑之功效。善解心胃经实火热毒,主治热毒发斑,丹毒,咽喉肿痛,口舌生疮,疮痈肿毒等症。近些年,由于抗生素的不正确使用,微生物的耐药性日益增强,中药资源的开发与应用越来越受重视。在猪病治疗过程中,大青叶被证明有极高的药用价值,在抗肿瘤,解热,抗炎,提高免疫力,抗内毒素,抗病原微生物等领域中均发挥出理想的功效,且兼具有价格低廉,毒副作用小的优势,成为了非常有潜力的中药资源。

一测多评法同时测定新复方大青叶片中4种成分含量

目的建立同时测定新复方大青叶片中维生素C、对乙酰氨基酚、咖啡因和异戊巴比妥含量的一测多评(QAMS)法。方法色谱柱为Welch Ultimate LP-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 3.0)、梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为215 nm(对乙酰氨基酚、咖啡因和异戊巴比妥)和245 nm(维生素C),柱温为40℃,进样量为10μL。以对乙酰氨基酚为参照物,测定维生素C、咖啡因和异戊巴比妥的相对校正因子,以计算维生素C、咖啡因和异戊巴比妥的含量。比较采用外标法与QAMS法时结果的差异。结果维生素C、对乙酰氨基酚、咖啡因和异戊巴比妥进样量分别在0.0643~0.6432μg(r=0.9998)、0.3737~3.7375μg(r=0.9997)、0.0373~0.3732μg(r=0.9999)、0.0379~0.3789μg(r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好;检测限分别为0.03,0.15,0.07,0.24μg/mL,定量限分别为0.09,0.51,0.23,0.79μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为101.07%,101.83%,98.04%,98.80%,RSD分别为1.20%,1.73%,1.13%,1.58%(n=6);维生素C、咖啡因和异戊巴比妥的相对校正因子分别为0.5761,0.3732和0.8438,QAMS法与外标法测定结果无显著差异(P>0.05)。结论所建立的方法环保(以乙醇代替甲醇)、经济(只需1种对照品),结果准确且可快速获得,适用于新复方大青叶片的质量评价。

蒙药大青叶-10味散联合阿奇霉素治疗支原体肺炎的临床疗效

目的:探讨蒙药大青叶-10味散联合阿奇霉素治疗支原体肺炎患儿的临床疗效。方法:选取支原体肺炎患儿156例,随机分为观察组和对照组。对照组采用阿奇霉素治疗;观察组采用蒙药大青叶-10味散联合阿奇霉素治疗。结果:观察组总有效率(98.72%,77/78)明显高于对照组(89.74%,70/78)(P<0.05)。结论:蒙药大青叶-10味散联合阿奇霉素治疗支原体肺炎疗效显著,可缩短病程,与单用西药治疗相比具有优势,值得推广。

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS技术结合化学计量学方法的不同干燥处理杜仲叶成分分析

采用基于液质联用的非靶向代谢组学技术结合化学计量学数据自动解析软件AntDAS-LCHRMS分析了4种不同干燥处理(冻干、热泵烘干、电热烘干、晒干)杜仲叶样本中的化合物。杜仲叶样本数据由超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)分别在正、负离子模式下进行采集,经AntDAS-LCHRMS软件解析,共鉴定出71种差异性化合物,经标准品验证确定40种化合物,包括环烯醚萜类、有机酸类、黄酮类、氨基酸类、核苷类、维生素类等9类物质。其中,正、负离子模式下均可识别并验证的化合物有车叶草苷、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、车叶草苷酸、京尼平苷等25种化合物。层次聚类分析(HCA)及主成分分析(PCA)结果均显示,相同处理的杜仲叶样本各自聚成一类,不同处理的杜仲叶样本可明显区分。热图分析进一步揭示了不同干燥处理杜仲叶样本中差异性化合物的含量变化。晒干处理样本中苯丙氨酸及色氨酸等氨基酸类物质的水平较高;冻干及热泵烘干处理样本中有机酸类、环烯醚萜类、糖类等含量较高;电热烘干样本中核苷类、黄酮类物质的含量较高;黄酮类物质在冻干、热泵烘干及晒干样本中差异较小。研究结果为不同干燥处理杜仲叶的成分分析、品质评价及其开发应用提供了科学依据,也可为其他复杂药用植物体系的化学成分分析提供参考。

不同采收期枇杷叶中氨基酸的组成与分析

目的 对12个月份采收期枇杷叶的氨基酸成分组成及含量变化进行分析,为确定枇杷叶采收期及资源利用提供理论依据。方法 采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化高效液相色谱法测定不同月份枇杷叶氨基酸组成及含量;采用SPSS22.0版软件进行数据统计学差异及相关性分析;根据世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)提出的理想模式及朱圣陶提出的氨基酸比值系数法,对不同采收期的枇杷叶氨基酸进行评分。结果 不同采收期枇杷叶中均含有17种氨基酸,7种人体必需氨基酸(EAA)、9种儿童必需氨基酸(CEAA)及9种药用氨基酸。17种氨基酸分别是天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸,它们的平均含量分别为3.41~7.23、4.64~9.66、2.05~3.75、2.99~4.95、0.01~1.56、2.33~4.85、2.10~4.03、2.67~5.48、5.37~7.64、1.45~3.49、2.70~5.53、0.01~0.48、3.64~4.78、1.91~4.15、3.96~7.83、2.39~4.60、1.85~3.65 mg·g^(-1)。不同采收期枇杷叶中17种氨基酸、总氨基酸(TFAA)、EAA总量、CEAA总量、药用氨基酸、苦味氨基酸的含量间差异有统计学意义(P<0.05);苦味氨基酸在总氨基酸中的百分含量较稳定。不同采收期枇杷叶的EAA含量为44.26%~50.33%,明显高于WHO/FAO模式值(35.00%);EAA/非必需氨基酸(NEAA)均值(55.67%)和EAA/TFAA均值(35.74%)分别接近WHO/FAO模式值的60%、40%;不同采收期枇杷叶的17种氨基酸含量峰值前2位是7月和11月;氨基酸比值系数分(SRC)值为62.53~76.17,前3位为11月、8月及7月。赖氨酸为枇杷叶的第一限制氨基酸。苦味氨基酸与药用氨基酸、TFAA呈正相关(P<0.01)。结论 枇杷叶中氨基酸种类齐全,组成合理,具有较佳开发利用价值;不同月份氨基酸的含量差异大,7月和11月是枇杷叶氨基酸合理开发利用的较佳时期。

全球银杏叶开发相关发明专利研究分析

目的:系统梳理全球银杏叶相关发明专利数据,挖掘专利信息,为其深入开发利用提供参考。方法:基于incoPat数据库对全球范围内银杏叶相关发明专利进行计量学统计,并从专利数量趋势、国际布局、国内布局、应用领域、专利价值及技术市场等方面展开分析。结果与结论:银杏叶相关发明专利申请整体较为活跃,申请量呈增长态势;全球专利主要分布在中韩日等国家,其中中国占据绝对优势地位;全球技术研发方向从传统的中医药、食品类,扩展到农业肥料、生物化学、日化品等广泛领域,热点主题仍以中医药和食品为主;我国银杏叶专利市场化有较大空间,应持续推进深度合作,促进科研成果产业化健康发展。

银杏叶胶囊辅助降血脂功能人体试食研究

目的观察银杏叶胶囊在推荐剂量下辅助降血脂作用的安全性和有效性。方法筛选出符合标准的高脂血症患者110人,随机分为试食组(55例)和对照组(55例)。试食组每天2次,每次1粒,服用银杏叶胶囊,对照组服用安慰剂。结果试食前后各项安全检测指标,如血压、血象、心率、排泄物、血糖浓度、肝脏和肾脏功能等平均数值均处于正常范围,试食过程中未出现过敏情况及不良反应。试食组服用银杏叶胶囊60 d后血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)的水平明显降低,自身试食前后及组间对比差异均具有统计学意义(P<0.05);试食组临床观察的总有效率(84.9%)明显高于对照组(44.2%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶胶囊对受试者健康无明显损害,且在试验剂量下具有辅助降血脂功效。

3种中药配方颗粒全生产链的污染微生物考察

目的:对郁金、桑叶、蝉蜕中药配方颗粒生产全过程污染微生物进行考察,建立数据库,探索中药配方颗粒生产过程微生物关键控制点及控制措施,为企业提供示范性研究,为制定标准、改进生产工艺提供依据,填补质量全过程控制的空白。方法:对3种中药配方颗粒的原材料、中间产品、成品按照《中国药典》2020年版进行分析检测,采用质谱技术对负载微生物进行鉴定,分析研究从药材原料到中药配方颗粒成品的外源性污染微生物的程度及容易污染微生物的种类。结果:3种中药配方颗粒的原材料(中药饮片)微生物污染较严重,原材料的耐热芽孢杆菌即使经过工艺处理后,仍能在中间产品、成品中检出,并造成部分批次需氧菌总数结果超出限度规定;中间产品、成品中还检出来源于人和动物肠道中的屎肠球菌。结论:①加强中药饮片的微生物污染控制,有利于降低终端产品的微生物负载;②3种中药配方颗粒的生产工艺存在芽孢类微生物污染的风险,需优化生产工艺参数来降低微生物负载;③药品生产企业需加强对产品全过程控制,降低微生物污染风险。

超声波辅助提取大青叶中总黄酮及其抗氧化性研究

以大青叶(Folium Isatidis)为原料,采用单因素试验法,研究了乙醇浓度、超声时间、料液比和提取次数等因素对大青叶中总黄酮提取率的影响,得到大青叶中总黄酮的最适提取工艺条件为乙醇浓度70%,超声时间30 min,料液比(g/mL)1∶25和提取次数2次。该试验结果可为大青叶资源的进一步开发利用提供参考。