凉血大黄丸治疗支气管扩张反复咯血临床研究

目的 :观察凉血大黄丸治疗支气管扩张伴反复咯血的临床疗效。方法 :采用自拟凉血大黄丸治疗支气管扩张伴反复咯血患者 5 0例 ,并与 30例安络血对照组作比较。结果 :治疗组总有效率 96 % ,对照组总有效率 80 % ,两组临床疗效比较 ,差异显著 (P<0 .0 5 ) ,而且该药能降低患者平均止血时间。结论 :凉血大黄丸治疗支气管扩张反复咯血有良好的临床疗效。

高效液相色谱法同时测定九制大黄丸中5组分含量

目的建立同时测定九制大黄丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（77∶23）,流速1.0 m L/min,检测波长254 nm,柱温40℃,进样量20μL。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的进样质量浓度线性范围分别为4.6~92μg/m L,3.8~76μg/m L,4.0~800μg/m L,5.0~100μg/m L和17.6~352μg/m L,平均回收率分别为99.38%,99.04%,99.72%,99.59%和99.52%,RSD分别为0.80%,1.02%,0.50%,0.54%,0.92%（n=6）。结论 HPLC法可同时测定九制大黄丸中5组分的含量,专属性强,分离效果好。

一测多评法同时测定九制大黄丸中5种蒽醌类成分

目的:建立一测多评法进行九制大黄丸中5种蒽醌类成分的含量测定。方法:以大黄素为内参物,建立了芦荟大黄素等4个其他游离型蒽醌与大黄素的相对校正因子和待测成分的色谱峰定位方法,并进行方法学考察。在此基础上,分别采用外标法测定和一测多评法计算10批九制大黄丸中5个成分的含量,比较实测值与计算值的差异,以验证一测多评法的准确性。结果:建立的相对校正因子重现性良好,色谱峰相对保留值可用于待测成分色谱峰的定位,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5个成分采用校正因子计算的含量值与实测值之间差异均无统计学意义。结论:一测多评法进行九制大黄丸中5种蒽醌类成分的含量测定,方法可行。

九制大黄丸的质量鉴别方法研究

目的 :建立九制大黄丸鉴别方法。方法 :设九制大黄丸、大黄素、大黄药材等 5组 ,采用薄层层析法对照鉴别。结果 :建立了九制大黄丸及大黄的薄层层析鉴别方法。结论 :此法可用于九制大黄丸的质量控制。

大黄丸治疗胆道残余结石30例

本文报道用自拟大黄丸治疗胆道残余结石30例,排石22例,未排石8例。作者对本病的病机进行了探讨。指出泻下通腑为治疗本病的大法,并强调了大黄在治疗中的重用作用。

大黄蛰虫丸加减联合奥拉帕利治疗乳腺癌基因突变型卵巢癌

目的研究大黄蛰虫丸加减联合奥拉帕利治疗乳腺癌基因(breast cancergene,BRCA)突变型卵巢癌的疗效及对癌胚抗原(car-cinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖类抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)水平的影响。方法纳入2021年2月至2023年2月在河南中医药大学第三附属医院进行手术治疗的98例卵巢癌患者的临床资料,根据治疗方式将患者分为对照组(n=49)和观察组(n=49),对照组采用奥拉帕利进行干预,观察组采用大黄蛰虫丸加减联合奥拉帕利进行干预,观察两组治疗前后临床疗效、肿瘤标志物CEA、CA125、CA199水平和药物不良反应。结果治疗后观察组CEA、CA125、CA199水平低于对照组(P<0.05);观察组治疗期间的恶心、肝肾功能异常、疼痛发生率均低于对照组(P<0.05);治疗前两组中医症候(小腹胀痛、纳差、面色晦暗)评分差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组小腹胀痛、纳差、面色晦暗评分均降低,且观察组评分低于对照组(P<0.05);观察组西医治疗有效率(83.67%)高于对照组(55.10%)(P<0.05);对照组中医治疗有效率(53.06%)低于观察组(83.67%)(P<0.05)。结论大黄蛰虫丸加减联合奥拉帕利治疗BRCA突变型乳腺癌能够起到提高临床疗效、减少药物不良反应的作用。

大黄[庶虫]虫丸临床应用及实验研究进展

大黄[庶虫]虫丸为张仲景治疗虚劳干血的有效方剂。该方是在抵挡汤的基础上加苦杏仁、黄芩、地黄、白芍等8味中药组成,具有活血破瘀、缓中补虚之功,即峻药丸服,以缓攻瘀血,瘀血去则新血生,最终达扶正不留瘀、祛瘀不伤正的目的。适用于虚劳后期、因虚致瘀之证,故此方兼具扶正与祛邪双重功效。临床运用方面,单用大黄[庶虫]虫丸治疗相关疾病的报道偏少,多以其加减方或联合其他方剂或联合西药,治疗肝、心、肺、肾、妇科、男科等各类疾病。实验研究方面,大黄[庶虫]虫丸具有抗炎、抗纤维化,改善血糖、改善血脂、改善血管功能,改善微循环等作用,多针对某一具体疾病探讨其作用、机制,故其物质基础研究相对薄弱。通过查阅近10年大黄[庶虫]虫丸临床应用及实验研究情况,对其临床应用及实验研究进展进行归纳总结,为大黄[庶虫]虫丸深入研究、运用提供参考。

大黄䗪虫丸联合戈舍瑞林治疗子宫内膜异位症临床观察

目的探讨大黄䗪虫丸联合戈舍瑞林治疗子宫内膜异位症的临床效果及对患者生活质量的影响。方法选择在江西省妇幼保健院住院行腹腔镜手术的子宫内膜异位症患者随机分为两组,各60例。对照组予醋酸戈舍瑞林缓释植入剂,研究组在此基础上予大黄䗪虫丸,观察两组性激素水平、视觉模拟量表(VAS)评分、生存质量评价量表(SF-36)评分。结果治疗后,两组性激素水平及VAS评分均降低、SF-36评分均提高,且相对于对照组,研究组各指标改善情况更明显(P<0.05),患者生活质量得到明显改善。结论大黄䗪虫丸联合戈舍瑞林应用于子宫内膜异位症患者,存在相互补充作用,能够明显改善其疼痛症状,提高生活质量,彰显了中西医药结合的综合治疗优势,临床取得了较为满意的效果,值得推广应用。

大黄蛰虫丸调节IL-1β/NF-κB/NLRP3信号通路对动脉粥样硬化大鼠主动脉炎性损伤的影响

目的 探讨大黄蛰虫丸调节IL-1β/NF-κB/NLRP3信号通路对动脉粥样硬化(AS)大鼠主动脉炎性损伤的影响。方法 将40只大鼠分为正常对照组(NS)、模型组、地奥心血康干预组(阳性组)及大黄蛰虫丸干预组(大黄蛰虫丸组),每组各10只。除正常组外,余下3组小鼠均构建AS模型。应用油红染色对主动脉病理切片情况进行观察,采用EILSA法检测血清脂质水平[甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血清炎症指标(IL-6、IL-1β、TNF-α水平);应用流式细胞术对外周血Th17/Treg细胞水平进行检测,并通过RT-qPCR法和Western blot分别检测IL-1β/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达水平,并计算AI指数。结果 除NC组大鼠以外,其他各组大鼠动脉组织中均出现内膜增厚、斑块沉积和不连续、大量炎症细胞浸润等现象;其中模型组动脉组织损伤现象最为显著,阳性组和大黄蛰虫丸组较模型组明显改善,动脉组织结构情况与NC组相近。模型组血清TC[(9.82±1.46)mmol/L]、TG[(9.82±1.46)mmol/L]、LDL-C[(2.93±0.22)mmol/L]、IL-6[(97.65±9.11)ng/L]、TNF-α[(93.21±11.17)ng/L]水平及外周血Th17[(3.56±0.34)%]、Treg细胞[(4.41±0.38)%]水平高于NC组[分别为(3.71±0.57)mmol/L、(6.47±0.92)mmol/L、(0.94±0.15)mmol/L、(16.52±2.76)ng/L、(5.45±0.84)ng/L、(1.83±0.16)%、(7.72±0.73)%](均P<0.05),HDL-C水平[(2.92±0.31)mmol/L]低于NC组[(0.95±0.08)mmol/L](P<0.05);与模型组相比,大黄蜇虫丸组和阳性组血清TC[分别为(3.92±0.72)mmol/L、(3.71±0.65)mmol/L]、TG[分别为(6.71±0.83)mmol/L、(6.83±0.72)mmol/L]、LDL-C[分别为(1.15±0.11)mmol/L、(1.11±0.13)mmol/L]、IL-6[分别为(19.83±2.55)ng/L、(18.51±3.72)ng/L]、TNF-α[分别为(17.08±1.72)ng/L、(15.92±1.56)ng/L]水平及外周血Th17[分别为(2.11±0.25)%、(2.06±0.22)%]、Treg细胞[分别为(7.45±0.76)%、(7.31±0.72)%]水平偏低,HDL-C偏高[分别为(2.18±0.72)mmol/L、(2.23±0.61)mmol/L],趋近于NC组(均P<0.05)。与NC组AI指数(0.35±0.08)比较,模型组、阳性组和大黄蛰虫丸组(分别为9.71±2.04、1.21±0.15、0.83±0.17)均明显升高(均P<0.05),其中阳性组和大黄蛰虫丸组AI指数低于模型组(均P<0.05)。模型组大鼠的IL-6、TNF-α水平和外周血IL-1β、NF-κB、NLRP3 mRNA和信号通路蛋白表达水平均较NC组、阳性组和大黄蛰虫组明显偏高(均P<0.05)。结论 大黄蛰虫丸对动脉粥样硬化大鼠主动脉的炎性损伤可能具有明显的改善作用,可能是通过抑制IL-1β/NF-κB/NLRP3信号通路来实现治疗效果。

大黄虫丸联合普乐安片治疗肾虚血瘀型慢性前列腺炎临床研究

目的:观察大黄?虫丸联合普乐安片治疗肾虚血瘀型慢性前列腺炎(CP)的临床疗效及对患者卵磷脂小体、性生活质量的影响。方法:选取141例肾虚血瘀型CP患者,采用随机数字表法分为观察组71例和对照组70例。观察组采用大黄?虫丸联合普乐安片治疗,对照组仅口服普乐安片治疗。比较2组临床疗效、中医证候评分、尿常规指标、卵磷脂小体数目及性生活质量[勃起功能国际指数问卷-5 (IIEF-5)]评分。结果:治疗后,观察组总有效率为85.92%,对照组为70.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组畏寒肢冷、腰膝酸软、会阴疼痛、小腹疼痛、腰骶疼痛、股内侧疼痛、尿后滴沥、精神萎靡、阳痿早泄等中医证候评分及总分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组上述各项评分均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组尿红细胞、尿白细胞、尿酸碱度及尿比重均较治疗前改善(P<0.05),且观察组上述各项指标改善较对照组更显著(P<0.05)。治疗后,观察组卵磷脂小体数目较治疗前及对照组明显增加(P<0.05);对照组卵磷脂小体数目治疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组IIEF-5量表中各维度评分及总分均较治疗前升高(P<0.05),且观察组上述各维度评分及总分均高于对照组(P<0.05)。结论:大黄?虫丸联合普乐安片治疗肾虚血瘀型CP,可改善患者中医证候及尿常规指标,有效提高卵磷脂小体数目及性生活质量,临床疗效显著。

大黄糖络丸通过调控PI3K-Akt/NF-κB信号通路减轻糖尿病大鼠大血管炎症反应

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(PKB/Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路,探讨大黄糖络丸(RSP)防治Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠大血管炎症反应的作用机制。方法:15只雄性ZDF(fa/+)大鼠作为对照组;高脂饲料诱导成模的75只雄性ZDF(fa/fa)大鼠随机分为模型组,高、中、低剂量RSP组,以及二甲双胍组,每组15只。药物干预12周后,处死大鼠,分离血清,检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平;ELISA法检测大鼠血清CD4、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察大鼠腹主动脉组织病理改变;免疫组化染色检测腹主动脉中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)蛋白表达;RT-qPCR检测大鼠腹主动脉中PI3K、Akt和NF-κB p65的mRNA表达;Western blot观察腹主动脉组织中PI3K、Akt、p-Akt、p-IκB和NF-κB p65蛋白水平。结果:与模型组相比,RSP显著降低糖尿病大鼠空腹血糖及LDL-C、TG和TC水平(P<0.05),升高HDL-C水平(P<0.05或P<0.01),显著降低血清炎症介质表达,IL-6、TNF-α和CD4水平显著下降(P<0.05或P<0.01),腹主动脉组织病理学损伤程度显著减轻,腹主动脉中PI3K、Akt和NF-κB p65的mRNA及蛋白水平,以及MCP-1、p-Akt和p-IκB蛋白水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:RSP可降糖调脂并减轻糖尿病大鼠大血管炎症损伤,其机制可能与抑制PI3K-Akt/NF-κB信号通路活化、减轻炎症反应有关。

逍遥散合大黄[庶虫]虫丸治疗原发性肝癌经肝动脉化疗栓塞术后气滞血瘀型疗效研究

目的:研究逍遥散合大黄[庶虫]虫丸对经肝动脉化疗栓塞(TACE)术后的原发性肝癌(PLC)患者气滞血瘀型的治疗效果。方法:将80例肝癌气滞血瘀型患者采用随机数字表法分为观察组和对照组各40例。对照组肝癌患者TACE术后予对症治疗,观察组肝癌患者在对症治疗的基础上联合逍遥散合大黄[庶虫]虫丸进行治疗。经治疗1个月后复查肝功能、凝血功能、肿瘤指标及上腹部影像学检查的变化情况。结果:观察组血清甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)等肿瘤指标,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等肝功能指标,凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)、国际标准化比值(INR)、纤维蛋白原(FIB)等凝血功能指标低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),观察组总有效率75.00%,获益率90.00%,对照组总有效率32.50%,获益率57.50%,观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:肝癌气滞血瘀型患者在经过TACE术后,在对症治疗的基础上加用中药内服方逍遥散合大黄[庶虫]虫丸具有更好的疗效,逍遥散合大黄[庶虫]虫丸可以加强对肝功能的保护,有效地改善凝血功能,降低肝癌的转移程度。

大黄[庶虫]虫丸治疗肝癌的研究进展

大黄[庶虫]虫丸出自《金匮要略》,是治疗“虚劳干血”类疾病的经典名方,近年来广泛用于多种恶性肿瘤尤其是肝癌的综合治疗中。检索整理近20年文献,从中医组方特色、临床应用、分子机制三方面总结大黄[庶虫]虫丸治疗肝癌的相关研究,发现大黄[庶虫]虫丸在中医组方上具有虫类逐瘀、草本养虚,肝脾同调、两脏兼顾,蜜丸为剂、峻药缓图等特色,配伍严谨,用药精当。在临床上无论是联合经动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)还是联合静脉化疗,均可减轻治疗不良反应,提高临床有效率,延长患者生存时间;此外,对于晚期原发性肝癌患者以及肝转移癌患者,单药应用也可明显改善症状,提高生活质量,延长终末期患者带瘤生存时间,临床疗效确切,且可长期应用,安全性较高。机制研究中发现大黄[庶虫]虫丸具有抗肝癌前病变、保护肝细胞,调节肝功能,抗肝癌细胞转移、抑制肿瘤血管新生,促进血管正常化、调节免疫等相关机制,分子机制明确。通过以上三方面,全面详细阐述了大黄[庶虫]虫丸治疗肝癌的研究现状,并对目前的临床和实验研究提出不足与改进,以期为后续深入研究及抗肿瘤新药的研发提供思路和依据。

大黄廑虫丸联合抗病毒治疗乙型肝炎肝硬化对凝血功能紊乱、肝硬化程度及门静脉系统相关参数的影响

目的探讨大黄廑虫丸联合抗病毒治疗乙型肝炎(HBV)肝硬化对病人凝血功能紊乱、肝硬化程度及门静脉系统相关参数的影响。方法选择2020年6月至2022年6月于无锡市中医医院接受治疗的100例HBV肝硬化病人,运用随机数字表法将其分为观察组与对照组,各50例。对照组采用常规抗病毒疗法,观察组基于对照组联合大黄廑虫丸,评估两组疗效并进行比较,对比两组凝血功能、HBV-DNA值、肝硬化程度、门静脉系统相关参数变化。结果观察组治疗显效病人占50.00%高于对照组26.00%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前两组病人的血小板计数(PLT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、HBVDNA水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后PLT[(125.42±24.57)×10^(9)/L比(116.12±21.38)×10^(9)/L]、FIB水平[(2.76±0.56)g/L比(1.80±0.63)g/L]高于对照组,TT[(14.18±4.28)s比(16.61±5.34)s]、HBV-DNA[(2.72±0.43)×10^(5) IU/L比(3.38±0.68)×10^(5) IU/L]小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前后的肝硬化程度和门静脉内径比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组肝脏硬度数值(LSM)(15.32±2.27)kPa比(17.94±2.34)kPa、肝门静脉内径[(12.29±1.98)mm比(13.80±2.15)mm]低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酰氨基转移酶(ALT)水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后ALT、AST水平均下降,观察组下降幅度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相较于单独抗病毒治疗,联合大黄廑虫丸治疗,疗效较好,改善肝功能,有助于凝血功能的恢复,缩小肝门静脉内径。

大黄■虫丸治疗非酒精性脂肪性肝炎痰瘀互结证的临床疗效与安全性

目的:观察大黄■虫丸治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)痰瘀互结证的临床疗效与安全性。方法:选取2020年5月11日至2022年1月20日四川大学华西医院收治的NASH患者,均辨证为痰瘀互结证的患者216例作为研究对象,采用区组随机化方法分为对照组和观察组,每组108例,观察组脱失10例,对照组脱失9例。对照组接受健康宣教,根据病情给予降压、降糖、调脂、保肝降酶等标准化基础治疗;观察组在对照组治疗方法基础上,联用大黄■虫丸。治疗前及治疗后(治疗1年)对比2组肝活检缓解率、肝纤维化扫描仪(FibroScan)测定的肝纤维化评级缓解率、中医证候积分、体质量指数及肝功能指标[血清谷丙转氨酶(GPT)、血清总胆红素(TB)、血清谷草转氨酶(GOT)]、血脂指标[总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、临床疗效及安全性。结果:观察组患者肝活检缓解率高于对照组(χ^(2)=14.512,P=0.002),肝纤维化评级改善率高于对照组(χ^(2)=15.550,P=0.001)。观察组临床中医证候总有效率高于对照组(χ^(2)=21.438,P<0.05)。治疗后,2组患者体质量指数及肝功能、血脂指标均较治疗前改善(P<0.05);治疗后,2组体质量指数及血脂指标比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组肝功能指标(GPT、GOT、TB)低于对照组(P<0.05)。共发生不良事件37例次,均为轻微不良反应,未经处理或对症治疗后缓解,2组不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大黄■虫丸可改善NASH痰瘀互结证患者的肝纤维化、中医证候与肝功能,安全性良好。

大黄糖络丸通过AMPK/mTOR/ULK1通路调控糖尿病肾病小鼠足细胞自噬的作用机制研究

目的:探究大黄糖络丸(DHT)基于腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/unc-51样激酶1(AMPK/mTOR/ULK1)信号通路对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的干预作用。方法:40只造模成功的C57BL/KSJ-db/db(以下简称db/db)小鼠随机分为模型组,达格列净组(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)),DHT高、中、低剂量组(3.6、1.8、0.9 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只;另取10只C57BL/KSJ-db/dm(以下简称db/m)小鼠为正常组,正常组和模型组给予生理盐水,治疗组小鼠分别给予相应药物,连续给药10周,1次/d。于给药0、4、8、10周固定时间,禁食不禁水12 h,取尾静脉血检测空腹血糖(FBG);于给药0、5、10周末收集尿液检测尿中白蛋白、肌酐含量,计算尿白蛋白肌酐比值(ACR);给药10周后,检测各组小鼠24 h尿总蛋白,血肌酐(Scr),尿素氮(BUN)含量;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织p-AMPK、p-mTOR及p-ULK1蛋白的表达水平,以及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62蛋白的表达水平;免疫组化法检测肾脏组织足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin、Podocin)的表达水平;采用光学显微镜和透射电镜观察肾脏组织病理形态学变化。结果:与模型组比较,达格列净组和DHT组小鼠FBG、ACR、24 h尿总蛋白均降低,Scr、BUN无统计学差异;肾组织中p-AMPK、p-ULK1表达水平升高,p-mTOR表达水平降低及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1表达水平升高,P62表达水平降低(P<0.01,P<0.05);肾小球的足细胞裂孔膜蛋白Nephrin、Podocin表达水平升高(P<0.01,P<0.05);肾脏病理损害减轻;透射电镜显示自噬小体、自噬溶酶体数量增加。结论:DHT可能通过调控AMPK/mTOR/ULK1信号通路,增强足细胞自噬,保护肾小球,延缓DN发展进程。

大黄蛰虫丸治疗甲状腺结节体会

甲状腺结节属于中医瘿病范畴,基本病机为气滞、痰凝、血瘀壅结于颈前,病因可归纳为情志内伤、饮食及水土失宜和体质因素,以理气、活血、化痰为治则。大黄蛰虫丸破血逐瘀,活血以利水,可防止痰湿形成,具有消癥散结、疏通气机等功效。通过探讨大黄蛰虫丸治疗甲状腺结节的作用机制,为临床应用该方提供一定的理论依据。

基于NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路介导的细胞焦亡探讨大黄糖络丸对糖尿病肾脏疾病的干预效应

目的探讨大黄糖络丸(Dahuang Tangluo pills,DHTL)对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)db/db小鼠NOD样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(cystein-asparate protease-1,caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预效应及机制。方法将8只db/m小鼠作为空白对照组,将40只db/db小鼠造模成功后随机分为模型组,DHTL低剂量组、中剂量组、高剂量组,达格列净组,每组各8只。空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,DHTL低、中、高剂量组分别给予DHTL溶液0.9、1.8、3.6 g·kg^(-1),达格列净组给予达格列净片溶液1.5 mg·kg^(-1),6组小鼠均每日灌胃1次,连续给药10周,给药期间每日检测小鼠体质量并调整灌胃剂量。给药结束后分别检测各组小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)及体质量;采用全自动生化分析仪检测小鼠24 h尿总蛋白(24 h urine protein,24h-UTP)、血肌酐(creatinine,Scr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;采用ELISA测定小鼠肾组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平;HE染色观察小鼠肾组织病理改变;TUNEL染色观察小鼠肾组织细胞DNA的损伤情况;采用RT-PCR和Western blot检测小鼠肾组织NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠FBG、体质量、24h-UTP、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α均明显升高(P<0.01);小鼠肾脏组织中NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠FBG、体质量、24h-UTP、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平不同程度降低(P<0.05);小鼠肾脏组织病理形态均不同程度改善,肾脏组织阳性细胞数量明显减少(P<0.05);DHTL高、中剂量组及达格列净组小鼠肾组织NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论DHTL可改善DKD小鼠的肾损伤,其机制可能通过调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制细胞焦亡,缓解DKD小鼠的炎症反应。

基于HIF-1α/VEGF信号通路探讨大黄䗪虫丸抑制KM小鼠肿瘤血管的机制研究

目的 研究大黄䗪虫丸对昆明(KM)小鼠移植瘤的抑瘤率、体积、质量、缺氧诱导因子(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)、肿瘤血管密度(Microvascular density, MVD)的影响,探讨大黄䗪虫丸是否是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤生长的作用。方法 将H22人肝癌细胞注射到KM小鼠进行小鼠皮下移植瘤造模,造模成功后按照随机数字表法分为空白组、模型组、大黄䗪虫丸低剂量组、大黄䗪虫丸中剂量组、大黄䗪虫丸高剂量组和索拉非尼组,每组各15只,实验干预1次/d,连续干预2周。大黄䗪虫丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和索拉非尼组均给予相应药物灌胃,模型组给予生理盐水灌胃。实验干预结束后取瘤体,对各组瘤体长、短径进行测量,计算瘤体的抑瘤率、体积及体质量并记录;采用苏木精-伊红染色法检测各组肿瘤组织形态学的病理变化;实时荧光定量聚合酶链反应法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;蛋白印记法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达水平;采用免疫组织化法检测肿瘤组织检测反映MVD的表达。结果 体积抑瘤率比较,大黄䗪虫丸低、中、高剂量组的抑瘤率分别为17.11%、21.73%和37.09%,索拉非尼组的抑瘤率为46.75%;HE染色结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组可使肿瘤组织出现大面积的坏死区域;PCR和WB结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸各治疗组均可不同程度的显著降低肿瘤组织HIF-1α、VEGF mRNA蛋白水平表达(P<0.05,P<0.01);CD31-MVD结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组MVD明显减少(P<0.05)。结论 大黄䗪虫丸可能是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤的生长。