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大黄欧文氏菌蔗糖异构酶控制产物特异性基序的定点突变
被引量:
2
1
作者
周兴
韦星明
+4 位作者
杨祥开
郑元涛
庞浩
许黎明
黄日波
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期556-563,共8页
大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)蔗糖异构酶催化蔗糖异构为异麦芽酮糖和海藻酮糖,具有一个可能控制产物特异性的325RLDRD329基序。本研究以定点突变方法对该基序的带电荷氨基酸进行突变,共构建R325D、R328A、R328D、R328Q和D329N5个...
大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)蔗糖异构酶催化蔗糖异构为异麦芽酮糖和海藻酮糖,具有一个可能控制产物特异性的325RLDRD329基序。本研究以定点突变方法对该基序的带电荷氨基酸进行突变,共构建R325D、R328A、R328D、R328Q和D329N5个突变体。通过对突变体的酶学特性及突变体转化蔗糖的产物组成分析,结果显示所构建突变体的Km值上升约2~5倍,比活力下降至野生型SI比活力的11.8%~25.3%。HPLC分析显示Arg325和Arg328分别突变为Asp,导致产物中异麦芽酮糖/海藻酮糖的比例从6.93分别降至0.96和2.92,并伴随一个未知寡糖出现。Arg328突变为Ala和Gln同样导致反应产物中海藻酮糖比例上升,异麦芽酮糖比例下降。但是突变体D329N反应产物比例没有变化。以上结果表明325RLDRD329基序对大黄欧文氏菌蔗糖异构酶的酶活具有重要作用,并对酶的产物特异性产生影响。本研究结果将为该酶的作用机理研究奠定基础。
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关键词
蔗糖异构酶
定点突变
产物特异性
大黄欧文氏菌
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职称材料
大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因克隆表达及其酶学特性研究
被引量:
1
2
作者
周兴
韦星明
+3 位作者
杨祥开
郑元涛
许黎明
黄日波
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011年第4期10-15,共6页
通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109~1803bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体。通过降低诱导剂IPTG至10μmol/L,28℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性。重组S...
通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109~1803bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体。通过降低诱导剂IPTG至10μmol/L,28℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性。重组SI的最适pH为6.0,最适反应温度为30℃。测定的Km为46.8mmol/L,Vmax为152.2U/mg。重组SI对麦芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,只利用蔗糖为底物转糖苷,也可以水解对硝基苯酚-α-葡萄糖苷。同时发现重组SI具有转化异麦芽酮糖生成海藻酮糖的活性。
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关键词
大黄欧文氏菌
蔗糖异构酶
酶学特性
异麦芽酮糖
海藻酮糖
下载PDF
职称材料
一种重要的植物病原细菌——大黄欧文氏菌
被引量:
1
3
作者
冯建军
李一农
+2 位作者
王飞
郑耘
章桂明
《植物检疫》
北大核心
2013年第1期61-63,共3页
大黄欧文氏菌是一种重要的种传植物病原细菌,影响豌豆的品质而降低其商业价值。本文介绍了大黄欧文氏菌的地理分布、寄主范围、生理生化特性、危害症状、发病规律以及防治等内容。该病菌寄主范围广、中国未见分布报道,深入了解该病菌对...
大黄欧文氏菌是一种重要的种传植物病原细菌,影响豌豆的品质而降低其商业价值。本文介绍了大黄欧文氏菌的地理分布、寄主范围、生理生化特性、危害症状、发病规律以及防治等内容。该病菌寄主范围广、中国未见分布报道,深入了解该病菌对防治和植物检疫具有重要意义。
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关键词
大黄欧文氏菌
粉红色种子
腐烂
分布
寄主
生理生化持性
防治
原文传递
海藻糖酶产生菌的选育、鉴定及其酶学特性初探
4
作者
董哲卿
张新爽
+5 位作者
肖光焰
董琦
郭鸿飞
龚劲松
史劲松
许正宏
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2020年第5期51-57,共7页
海藻糖酶可特异性将1分子海藻糖分解为2分子葡萄糖,在乙醇工业、食品等行业中具有广阔的应用前景。从环境土壤中筛选到1株海藻糖酶产生菌C2,根据形态学分析和分子生物学鉴定将其命名为大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)。该菌株产海藻...
海藻糖酶可特异性将1分子海藻糖分解为2分子葡萄糖,在乙醇工业、食品等行业中具有广阔的应用前景。从环境土壤中筛选到1株海藻糖酶产生菌C2,根据形态学分析和分子生物学鉴定将其命名为大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)。该菌株产海藻糖酶的最适温度为40℃,最适pH为5.0,在酸性及低于35℃条件下,该酶具有较高的稳定性,Ca^2+、Zn^2+、Ni^2+、Mn^2+、Cu^2+、K^+、Na^+和Fe^2+对海藻糖酶酶活具有促进作用,DMSO和DTT对酶活具有一定的提升作用,而Triton X-114、SDS和PMSF则对酶活具有抑制作用。
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关键词
大黄欧文氏菌
海藻糖酶
酶学性质
发酵
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职称材料
固定化细胞生物催化合成异麦芽酮糖
被引量:
7
5
作者
林璐
李莎
+2 位作者
朱宏阳
环民霞
徐虹
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期29-32,共4页
采用海藻酸钠固定化大黄欧文氏菌细胞生物催化蔗糖合成异麦芽酮糖,考察了固定化条件对转化过程的影响,确定了固定化优化条件为:海藻酸钠浓度为2%,细胞包埋量为20%,CaCl_2浓度为2%,固定化时间为12 h;利用该条件下的固定化菌体细胞催化初...
采用海藻酸钠固定化大黄欧文氏菌细胞生物催化蔗糖合成异麦芽酮糖,考察了固定化条件对转化过程的影响,确定了固定化优化条件为:海藻酸钠浓度为2%,细胞包埋量为20%,CaCl_2浓度为2%,固定化时间为12 h;利用该条件下的固定化菌体细胞催化初始浓度为550 g/L的蔗糖溶液,异麦芽酮糖平均转化率在80%以上,半衰期为40 d。
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关键词
蔗糖
异麦芽酮糖
固定化
海藻酸钠
大黄欧文氏菌
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职称材料
题名
大黄欧文氏菌蔗糖异构酶控制产物特异性基序的定点突变
被引量:
2
1
作者
周兴
韦星明
杨祥开
郑元涛
庞浩
许黎明
黄日波
机构
广西大学生命科学与技术学院
广西科学院生物研究所
生物质能源酶解技术国家重点实验室
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期556-563,共8页
基金
国家科技支撑项目(2007BAD75D06)
广西科技攻关项目(桂科攻0895003-4-1)共同资助
文摘
大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)蔗糖异构酶催化蔗糖异构为异麦芽酮糖和海藻酮糖,具有一个可能控制产物特异性的325RLDRD329基序。本研究以定点突变方法对该基序的带电荷氨基酸进行突变,共构建R325D、R328A、R328D、R328Q和D329N5个突变体。通过对突变体的酶学特性及突变体转化蔗糖的产物组成分析,结果显示所构建突变体的Km值上升约2~5倍,比活力下降至野生型SI比活力的11.8%~25.3%。HPLC分析显示Arg325和Arg328分别突变为Asp,导致产物中异麦芽酮糖/海藻酮糖的比例从6.93分别降至0.96和2.92,并伴随一个未知寡糖出现。Arg328突变为Ala和Gln同样导致反应产物中海藻酮糖比例上升,异麦芽酮糖比例下降。但是突变体D329N反应产物比例没有变化。以上结果表明325RLDRD329基序对大黄欧文氏菌蔗糖异构酶的酶活具有重要作用,并对酶的产物特异性产生影响。本研究结果将为该酶的作用机理研究奠定基础。
关键词
蔗糖异构酶
定点突变
产物特异性
大黄欧文氏菌
Keywords
Sucrose isomerase
Site-directed mutation
Product specificity
Erwinia rhapontici
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因克隆表达及其酶学特性研究
被引量:
1
2
作者
周兴
韦星明
杨祥开
郑元涛
许黎明
黄日波
机构
广西大学生命科学与技术学院
广西科学院生物研究所
生物质能源酶解技术国家重点实验室广西科学院
出处
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011年第4期10-15,共6页
基金
科技部科技支撑项目"木薯淀粉细菌发酵法生产L-乳酸新技术研究"(2007BAD75B06)
广西青年基金项目"应用基因工程菌制备新型功能性甜味剂-果葡海藻糖"
文摘
通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109~1803bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体。通过降低诱导剂IPTG至10μmol/L,28℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性。重组SI的最适pH为6.0,最适反应温度为30℃。测定的Km为46.8mmol/L,Vmax为152.2U/mg。重组SI对麦芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,只利用蔗糖为底物转糖苷,也可以水解对硝基苯酚-α-葡萄糖苷。同时发现重组SI具有转化异麦芽酮糖生成海藻酮糖的活性。
关键词
大黄欧文氏菌
蔗糖异构酶
酶学特性
异麦芽酮糖
海藻酮糖
Keywords
Erwinia rhapontici, sucrose isomerase, characterization, isornaltulose, trehalulose
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
一种重要的植物病原细菌——大黄欧文氏菌
被引量:
1
3
作者
冯建军
李一农
王飞
郑耘
章桂明
机构
深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
深圳市检验检疫科学研究院深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室
出处
《植物检疫》
北大核心
2013年第1期61-63,共3页
基金
深圳市科技研发资金项目(CXB201105100088A)
深圳出入境检验检疫局科技项目(SZ2011002)
文摘
大黄欧文氏菌是一种重要的种传植物病原细菌,影响豌豆的品质而降低其商业价值。本文介绍了大黄欧文氏菌的地理分布、寄主范围、生理生化特性、危害症状、发病规律以及防治等内容。该病菌寄主范围广、中国未见分布报道,深入了解该病菌对防治和植物检疫具有重要意义。
关键词
大黄欧文氏菌
粉红色种子
腐烂
分布
寄主
生理生化持性
防治
分类号
S41-30 [农业科学—植物保护]
原文传递
题名
海藻糖酶产生菌的选育、鉴定及其酶学特性初探
4
作者
董哲卿
张新爽
肖光焰
董琦
郭鸿飞
龚劲松
史劲松
许正宏
机构
江南大学生物工程学院粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学药学院糖化学与生物技术教育部重点实验室
江苏博扬生物制品有限公司
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2020年第5期51-57,共7页
基金
江苏省重点研发计划项目(BE2018622)。
文摘
海藻糖酶可特异性将1分子海藻糖分解为2分子葡萄糖,在乙醇工业、食品等行业中具有广阔的应用前景。从环境土壤中筛选到1株海藻糖酶产生菌C2,根据形态学分析和分子生物学鉴定将其命名为大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)。该菌株产海藻糖酶的最适温度为40℃,最适pH为5.0,在酸性及低于35℃条件下,该酶具有较高的稳定性,Ca^2+、Zn^2+、Ni^2+、Mn^2+、Cu^2+、K^+、Na^+和Fe^2+对海藻糖酶酶活具有促进作用,DMSO和DTT对酶活具有一定的提升作用,而Triton X-114、SDS和PMSF则对酶活具有抑制作用。
关键词
大黄欧文氏菌
海藻糖酶
酶学性质
发酵
Keywords
Erwinia rhapontici
trehalase
enzymatic properties
fermentation
分类号
Q93-331 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
固定化细胞生物催化合成异麦芽酮糖
被引量:
7
5
作者
林璐
李莎
朱宏阳
环民霞
徐虹
机构
南京工业大学制药与生命科学学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期29-32,共4页
文摘
采用海藻酸钠固定化大黄欧文氏菌细胞生物催化蔗糖合成异麦芽酮糖,考察了固定化条件对转化过程的影响,确定了固定化优化条件为:海藻酸钠浓度为2%,细胞包埋量为20%,CaCl_2浓度为2%,固定化时间为12 h;利用该条件下的固定化菌体细胞催化初始浓度为550 g/L的蔗糖溶液,异麦芽酮糖平均转化率在80%以上,半衰期为40 d。
关键词
蔗糖
异麦芽酮糖
固定化
海藻酸钠
大黄欧文氏菌
Keywords
sucrose, isomalt ulose, immobilization, Na-alginate, Erwinia rhapontici
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大黄欧文氏菌蔗糖异构酶控制产物特异性基序的定点突变
周兴
韦星明
杨祥开
郑元涛
庞浩
许黎明
黄日波
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
下载PDF
职称材料
2
大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因克隆表达及其酶学特性研究
周兴
韦星明
杨祥开
郑元涛
许黎明
黄日波
《工业微生物》
CAS
CSCD
2011
1
下载PDF
职称材料
3
一种重要的植物病原细菌——大黄欧文氏菌
冯建军
李一农
王飞
郑耘
章桂明
《植物检疫》
北大核心
2013
1
原文传递
4
海藻糖酶产生菌的选育、鉴定及其酶学特性初探
董哲卿
张新爽
肖光焰
董琦
郭鸿飞
龚劲松
史劲松
许正宏
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2020
0
下载PDF
职称材料
5
固定化细胞生物催化合成异麦芽酮糖
林璐
李莎
朱宏阳
环民霞
徐虹
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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