大黄灵仙颗粒调控IL-6、EGR-1表达治疗胆石症的实验研究

目的:明确大黄灵仙颗粒对慢性肝损伤胆石病兔模型的疗效,研究中药复方对关键致石因素IL-6、EGR-1表达的调控作用。方法:(1)将50只雄性新西兰大白兔随机分为3组:正常对照组、肝纤维化胆石病组、肝硬化胆石病组,其中正常对照组10只,其余两组各20只,在金博的慢性肝损伤兔模型构建方法的基础上,同时予高热量、高胆固醇致石饲料,建立慢性肝损伤胆石病兔模型。(2)造模12周后,病理明确诊断肝损伤形成后,将各组剩余实验兔分别分为对照组、治疗组,其中治疗组每天灌胃中药制剂大黄灵仙颗粒0.4 g/(kg·d),其余各组灌胃等量生理盐水,各组大白兔均正常饲料饲养。用药第13周,麻醉后取肝脏组织,分别使用实时荧光定量PCR、免疫组化等方法进行检测。结果:(1)常规病理:与对照组相比,用药各组光镜下可见遭到破坏的肝小叶逐渐修复,部分肝细胞形态恢复正常,炎性细胞及纤维组织减少,区域呈点状、片状坏死明显减少;(2)免疫组化:与对照组相比,喂食大黄灵仙颗粒剂的各组肝窦、汇管区的肝细胞胞浆或胞膜上棕褐色颗粒沉积表达明显减少,小胆管胆汁淤积减少,说明用药后肝损伤得到改善;(3)q PCR检测结果:与对照各组相比,用药各组的IL-6、EGR-1 mRNA的表达量均有不同程度降低(P<0.05),说明该药可有效减轻肝损伤。结论:本研究结果表明大黄灵仙颗粒对慢性肝损伤性胆石病动物模型具有较明显的改善和防治作用。

大黄灵仙颗粒对慢性肝纤维化胆石病兔干预作用

目的:建立兔慢性肝纤维化胆石病模型,研究大黄灵仙颗粒对慢性肝纤维化胆石病兔模型的干预作用。方法:参考既往造模方法进行动物模型构建并进行中药制剂大黄灵仙颗粒干预,用药12周后,麻醉后耳缘静脉采血并取肝脏组织,测定肝组织羟脯氨酸含量,HE染色观察肝脏组织病理变化及检测肝功能相关生化指标ALT、AST、TBIL、DBIL、IBIL、TC、TG。结果:与对照组相比,各大黄灵仙颗粒组,治疗组血清ALT、AST、TBIL、DBIL、IBIL、TC、TG等生化指标均较前明显改变(均为P<0.05);与对照组相比,各大黄灵仙颗粒组,治疗组肝组织羟脯氨酸含量均明显下降(P<0.01);病理显示各大黄灵仙颗粒组光镜下可见遭到破坏的肝组织逐渐修复,肝细胞排列略变规则,水肿肝细胞明显减少,炎性细胞及纤维组织减少,区域呈点状、片状坏死明显减少。结论:大黄灵仙颗粒能防治慢性肝纤维化胆石病,具体效应机制有待探索。

大黄灵仙颗粒基于NF-κB信号通路干预肝内胆管结石形成的作用机制

目的在SD雄性大鼠建立肝胆管炎症模型的基础上,探究大黄灵仙颗粒干预肝内胆管结石形成的作用机制。方法将48只SD雄性大鼠随机分为正常组、脂多糖模型组、熊去氧胆酸对照组、大黄灵仙颗粒实验组,每组12只。正常组予常规饲养,模型组、对照组、实验组在胆总管一次性注射1.25mg/kg脂多糖诱导胆管炎症形成,同时对照组和实验组分别连续进行药物干预7天。取血液进行ELISA检测,取肝脏标本进行HE染色和RT-PCR检测。结果与其他三组相比,模型组肝脏组织病理形态提示炎症浸润程度明显;各组大鼠IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB蛋白及mRNA表达总体差异有统计学意义(P<0.01);与正常组相比较,模型组和对照组IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB蛋白及mRNA表达差异均明显增高(P<0.01);与正常组相比较,实验组IL-6、TNF-α蛋白表达无明显差异(P>0.05);与正常组相比较,实验组IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB的mRNA表达无明显差异(P>0.05)。结论 LPS胆管注射可以诱导大鼠胆管细胞细胞释放炎症因子引起急性胆管炎,大黄灵仙颗粒具有减少炎症因子释放,从而达到阻断肝内胆管结石形成。