大黄素衍生物的合成及细胞毒性研究

以天然大黄素为母体,经化学修饰得到一系列新的含氮衍生物6～14.通过1HNMR,IR,MS和元素分析确定了结构.选择口腔底癌(KB)和乳腺癌(MFC-7)两种人癌细胞株,采用标准MTT法测定了这类大黄素衍生物的细胞毒性.研究表明大多数衍生物都有较强的抗癌活性,其中位置异构体7a和7b的混合物表现出最强的活性,与母体大黄素相比较,活性分别提高了174倍(KB)和133倍(MFC-7).

大黄素衍生物的合成及抗癌活性

通过对大黄素的C6位进行化学修饰,设计合成了7个含氮杂环的大黄素衍生物和3个含季铵盐基团的大黄素衍生物.通过红外光谱、1H NMR和质谱表征了所制备化合物的结构,并测试了它们对白血病细胞Molt-4和淋巴瘤细胞CA46的体外抑制活性.其中化合物8,9a+9b,20a,20b和20c均显示出比大黄素更高的抗癌活性,表明苯并咪唑基团和季铵盐基团是大黄素提高抗癌活性的有效药效团.

大黄素衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

以中草药有效成分大黄素为原料,合成了4种含脂肪胺侧链的大黄素衍生物。所有化合物的结构经元素分析、IR、1HNMR和MS测试确证,并对3种人体癌细胞株进行了初步体外抗肿瘤活性评价。结果表明以上4种化合物均具有抑制肿瘤细胞生长作用,与大黄素相比4种衍生物的抑制作用均有所提高。

大黄素衍生物的合成及其抑制白血病细胞增殖作用的研究

本研究探讨新合成的大黄素衍生物对白血病细胞增殖的抑制作用,希望从中筛选出具有抗白血病活性的药物,以备后续进行更深入的研究。通过对大黄素一系列的结构修饰合成10种大黄素衍生物,采用MTT比色法检测大黄素衍生物对多种白血病细胞株的增殖抑制作用。结果表明:大黄素衍生物E10-E19作用于K562细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为0.84-12.01μmol/L,其中大黄素衍生物E19的抑制增殖作用最强,E16、17对K562细胞没有抑制增殖作用。从中筛选出的E19作用于U937、NB4、Molt-4和CA-46细胞,其48 h IC50分别为0.85、0.9、0.76、0.8μmol/L。E19作用于LQ2细胞48 h的IC50为3.6μmol/L。E19作用于3例正常人外周血单个核细胞48 h的IC50为4.01-4.78μmol/L。结论:大黄素衍生物E19对白血病细胞增殖有显著的抑制作用,且具有一定特异性,对其抗白血病机的制值得进一步的研究。

大黄素衍生物的化学合成与抗肿瘤活性

目的设计合成一系列大黄素衍生物,以研究其构效关系。方法以天然产物大黄素为原料,通过不同的方法合成一系列大黄素的衍生物,并且通过MTT法测试它们对KLE细胞株的抗肿瘤活性。结果合成了11个大黄素衍生物并通过元素分析、IR1、H-NMR1、3C-NMR和MS确证了它们的结构。活性试验显示某些化合物的活性强于大黄素。结论大黄素类化合物是一类很有希望的肿瘤抑制剂,值得进一步开发研究。

大黄素衍生物A对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响

目的研究大黄素衍生物A对具有不同淋巴结转移潜能的卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力的抑制作用,并且探讨其可能的作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度大黄素衍生物A处理人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞(SKOV3)和具有淋巴结定向高转移能力的亚克隆细胞(SKOV3-pm4)24 h后细胞的增殖作用。免疫荧光法观察细胞中Rac1蛋白的分布情况。不同浓度药物作用两种细胞后,Western blot检测细胞Rac1蛋白的表达量,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验测定细胞的侵袭能力。结果在一定浓度范围内大黄素衍生物A对SKOV3和SKOV3-pm4细胞的增殖均有抑制作用,24 h的半数抑制浓度(IC50)分别为23.21和34.46 mg/L。免疫荧光观察到两种细胞中Rac1蛋白均广泛分布于细胞质中,Western blot结果显示SKOV3-pm4细胞Rac1蛋白表达量高于SKOV3(P<0.05)。4和8 mg/L处理组中Rac1蛋白表达较空白组明显降低。细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验结果显示,大黄素衍生物A处理后两种细胞的迁移和侵袭能力均受到抑制。结论大黄素衍生物A能抑制具有高淋巴结转移潜能的卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力,其作用机制可能与下调Rac1蛋白的表达有关。

大黄素衍生物抗肿瘤活性的定量构效关系

目的建立大黄素衍生物抗肿瘤活性的构效关系模型。方法采用量子化学的AM1算法计算了12个大黄素衍生物的分子结构参数,利用逐步回归分析建立构效关系模型。结果成功建立了大黄素衍生物抗肿瘤活性的构效关系模型。结论大黄素衍生物抗肿瘤活性与分子体积V、极化率α及C环上净电荷QC相关。

大黄素衍生物E11的筛选及对多发性骨髓瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的:筛选抑制多发性骨髓瘤细胞增殖作用最强的衍生物,研究大黄素衍生物对两种多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226及U266细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用。方法:以大黄素为母体合成16种大黄素衍生物,从中筛选出大黄素衍生物E-11进行实验。应用MTT比色法及细胞集落形成实验观察大黄素衍生物E11对RPMI8226、U266细胞增殖的影响;应用DAPI染色法在荧光显微镜下观察大黄素衍生物作用后的细胞形态变化;应用DNA片段化检测大黄素衍生物E11诱导细胞凋亡的作用。结果:MTT结果显示,16种大黄素衍生物作用于RPMI8226细胞48 h后,除了E10、E15无法计算外,其余14种半数抑制浓度(IC50)在0. 83-34. 68μmol/L之间。MTT结果显示,大黄素衍生物E11作用于RPMI8226、U266细胞48 h的IC50分别为0. 831±0. 045μmol/L和1. 039±0. 093μmol/L。细胞集落形成实验均显示,大黄素衍生物E11能抑制2种细胞集落的形成,在一定范围内呈浓度及时间依赖性(r=0. 72)。DAPI染色后在荧光显微镜下能看到大黄素衍生物E11作用后的RPMI8226、U266细胞出现典型的凋亡形态学改变;应用DNA片段化可观察到典型的DNA凋亡梯带。结论:在合成的16种大黄素衍生物中,E11对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的抑制增殖作用最强。大黄素衍生物E11对RPMI8226、U266细胞有明显的抑制增殖、诱导凋亡的作用。

大黄素衍生物对口腔底癌细胞活性的构效关系研究

目的探索建立大黄素衍生物抗口腔底癌细胞活性的构效关系模型。方法采用量子化学的AM1半经验算法,计算10个大黄素衍生物分子结构参数,并用逐步回归分析方法,拟定大黄素衍生物抗口腔底癌细胞活性的构效关系模型。结果建立了大黄素衍生物抗口腔底癌细胞活性的构效关系模型。结论大黄素衍生物抗口腔底癌细胞活性与此类化合物分子的疏水性参数、A环上的负电荷及第二条最低空轨道能量有关。

大黄素衍生物A抑制卵巢癌淋巴结定向高转移细胞的增殖、迁移及对Rac1、CDC42表达的调控作用

目的：研究大黄素衍生物A对卵巢癌淋巴结定向高转移细胞SKOV3-pm4的增殖、迁移作用及对Rac1、CDC42基因及蛋白表达的影响。方法实验分为空白对照组、不同浓度药物组（大黄素衍生物A）、Rac1抑制剂组、Rac1激活剂组。以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定大黄素衍生物A对SKOV3-pm4细胞增殖的抑制作用。免疫荧光法观察SKOV3-pm4细胞中Rac1和CDC42蛋白的分布情况。用细胞划痕实验观察SKOV3-pm4细胞迁移情况，分别采用实时荧光定量PCR （RT-PCR）技术和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中Rac1、CDC42基因和蛋白的表达水平。结果 MTT法检测显示大黄素衍生物A（5～50 mg/L）能抑制SKOV3-pm4细胞的增殖，24 h的半数抑制浓度（IC50）为34.46 mg/L。细胞划痕实验显示4 mg/L的大黄素衍生物A能抑制SKOV3-pm4细胞迁移，且呈时间±赖性。免疫荧光观察到细胞中Rac1和CDC42蛋白均广泛分布于细胞质中，Rac1蛋白在细胞核周围较为密集。RT-PCR和Western blot法检测结果显示随着大黄素衍生物A药物浓度的梯度增加，Rac1基因和蛋白的表达水平均降低，与空白对照组比较，差异均有统计学意义（P均＜0.05），而CDC42基因和蛋白的表达变化不明显。结论大黄素衍生物A能抑制SKOV3-pm4细胞增殖和迁移能力，其作用途径可能是通过调控Rac1信号传导通路而实现；Rac1可能是大黄素衍生物A潜在的作用靶点。

大黄素衍生物的合成研究

本文通过甲基化反应和NBS反应,对大黄素的6位进行了化学修饰工作,共合成得到了4个大黄素衍生物,并测试了它们对白血病细胞K562和Jurkat的毒性实验。虽然这些衍生物的活性没有明显高于大黄素本身,但对大黄素进行化学修饰仍然是一个有益的研究。

大黄素衍生物E11对T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4的作用及其机制研究

目的:探讨新大黄素(emodin)衍生物E11对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4的增殖、凋亡影响及其相应的可能作用机制。方法:应用MTT法绘制细胞生长曲线,集落培养法观察大黄素衍生物E11对Molt-4克隆形成的影响,DAPI染色法荧光显微镜检观察衍生物作用后的细胞形态变化,DNA片段化检测大黄素衍生物E11诱导细胞凋亡的作用,Western blot检测凋亡相关蛋白procaspase-9、procaspase-3、PARP、及PI3K/AKT、MAPK通路蛋白表达的变化。结果:大黄素衍生物E11对Molt-4细胞增殖具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性(r=0.907),作用于Molt-4细胞48 h的半数抑制浓度(IC_(50))为1.381±0.15523μmol/L。0.1μmol/L的E11即可抑制Molt-4细胞集落形成。DAPI染色后在荧光显微镜下能看到衍生物组Molt-4细胞出现典型的凋亡形态学改变。应用DNA片段化检测可观察到典型的DNA凋亡梯带。不同浓度大黄素衍生物E11作用于Molt-4细胞48 h,procaspase-9、procaspase-3、p-MAPK、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p-4BEP1、p-P70表达均下调,MAPK、AKT、4EBP1、P70的表达变化不明显。结论:大黄素衍生物Ell能够有效抑制细胞Molt-4增殖,并诱导其凋亡,大黄素衍生物E11抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡可能与PI3K/AKT、MAPK信号通路被抑制有关。

设计合成新的大黄素衍生物对慢性髓系白血病细胞株K562及K562/G01的作用

目的:研究设计合成新的大黄素衍生物E19对慢性髓系白血病细胞株K562及耐伊马替尼的K562细胞株K562/G01的增殖、凋亡的影响,探讨其作用的机制。方法:采用MTT比色法、细胞集落形成实验观察E19对K562、K562/G01细胞增殖的影响;应用DAPI染色法和DNA片段化检E19诱导细胞凋亡的作用;Western blot检测E19作用后不同时间段p210^(Ber-Abl)和p-P210^(Bcr-Abl)蛋白的变化。结果:大黄素衍生物E19对K562和K562/G01细胞有明显的抑制增殖、诱导凋亡的作用,K562细胞48 h半数抑制浓度(IC_(50))为(1.20±0.19)μmol/L,K562/G01细胞48 h IC_(50)为(1.22±0.16)μmol/L;DNA片段化检测证实,E19对细胞抑制作用呈量效关系;E19作用于细胞后,P210^(Bcr-Abl)和p-P210^(Bcr-Abl)表达水平均有不同程度下调,并呈量效和时效关系。结论:大黄素衍生物E19能有效抑制K562和K562/G01细胞的增殖并诱导它们凋亡,而P210^(Bcr-Abl)和p-P210^(Bcr-Abl)的活化受抑制在其中发挥重要的作用。

大黄素衍生物对伯基特淋巴瘤细胞株周期、凋亡、NF-κB通路的作用研究

目的:探讨新型大黄素衍生物YX-18对伯基特淋巴瘤(BL)细胞的作用和机制。方法:不同浓度YX-18分别作用BL细胞株CA46和Raji细胞,MTT法检测YX-18对BL细胞株CA46和Raji增殖的影响,Annexin V-PE/7-AAD双染法检测YX-18对CA46和Raji细胞凋亡的影响,PI/RNase染色法检测YX-18对CA46和Raji细胞周期的影响,JC-1法检测YX-18作用后细胞线粒体膜电位的变化及DAPI染色检测细胞凋亡形态,Western blot检测YX-18对NF-κB通路蛋白(P65、P-P65、IκB、P-IκB)在胞浆和胞细胞核中的分布变化,细胞周期相关蛋白P21、CDK2、P-CDK2、Cycling D1、Cycling E1以及凋亡、增殖相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、C-MYC、BCL-2的表达变化,实时荧光定量PCR技术检测YX-18对CA46、Raji细胞的C-MYC、Ki-67的m RNA和Raji(EBV^(+))细胞EBV的EBEA-1、EBER的m RNA表达的影响。结果:大黄素衍生物YX-18能有效抑制BL细胞株CA46和Raji的增殖并呈时间依赖效应(24,48和72 h分别r_(CA46)=0.89、0.75和0.75,r_(Raji)=0.87、0.73和0.64)。作用两种细胞24 h的IC50分别为1.77±0.04和1.97±0.22μmol/L。YX-182.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h均出现明显凋亡,与药物浓度呈正相关(r_(CA46)=0.99,r_(Raji)=0.92),且两种细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9不同程度被活化。YX-181.0、2.0μmol/L作用CA46细胞24 h及0.5、1μmol/L作用Raji细胞24 h后,两种细胞均明显阻滞在G0/G1期(P<0.01);经过不同浓度YX-18处理两种细胞的周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、CDK2、P-CDK2表达水平均下降,p21^(Waf1)/Cip1与对照组相比,表达水平上升。以YX-182.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h后,线粒体膜电位下降(r_(CA46)=-0.96,r_(Raji)=-0.99);且DAPI染色可见经YX-18处理后的CA46细胞核固缩、裂解。YX-181.0、2.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h后,随着该药物作用浓度的增高,2株细胞内胞浆和胞核P65均明显降低,细胞内IκB升高,P-IκB、P-P65均明显降低,肿瘤增殖蛋白C-MYC、BCL-2表达水平明显降低。YX-181.0、2.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h,细胞内C-MYC、Ki-67基因m RNA表达水平均明显降低,Raji(EBV^(+))细胞EBNA-1基因m RNA表达水平也明显降低。结论:新型大黄素衍生物YX-18可以显著抑制BL细胞的增殖,同时诱导细胞凋亡并引起细胞周期阻滞。YX-18的作用可能与影响Caspase-分子和C-MYC、Ki-67等增殖凋亡相关分子,抑制NF-κB通路等有关。

大黄素衍生物抗肿瘤活性的神经网络模型

目的:建立大黄素衍生物抗肿瘤活性的神经网络模型。方法:采用量子化学的AM1算法,计算了12个大黄素衍生物分子的结构参数,并用逐步回归分析,筛选结构参数。结果:利用筛选后的结构参数,建立大黄素衍生物抗肿瘤活性的神经网络模型。结论:抽一法交叉预报结果表明,本文建立的大黄素衍生物抗肿瘤活性的神经网络模型,预报结果可靠,具有一定的应用价值。

大黄素甲醚衍生物的合成及抗肿瘤活性的研究

以天然大黄素甲醚为母体,经过化学修饰得到两种大黄素甲醚的衍生物。通过1HNMR、IR、MS和元素分析确定其结构。选择血管内皮癌(Ks),口腔底癌(KBv)和乳腺癌(MCF-7/s)3种人癌细胞株,采用标准MTT法测定了大黄素甲醚及其衍生物的细胞毒性。结果表明,6-甲基-1,8-二[[2-(二甲基氨基)乙基]-氨基]-3-甲氧基-9,10-蒽醌对Ks和KBv表现出很强的细胞毒性。

大黄素三甲氧基衍生物合成及体外抗肿瘤活性试验

目的:以天然存在的大黄素为原料合成了甲基化衍生物三甲氧基大黄素,并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法:利用硫酸二甲酯/丙酮甲基化组合合成目标化合物1,3,8-三甲氧基-6-甲基蒽醌;通过常规方法,对其理化性质进行鉴定。采用HPLC及ESI-MS对其结构进行表征;通过MTT比色法与流式细胞术检测其对K562细胞增殖及细胞周期分布的影响。结果:三甲氧基大黄素为淡黄色粉末,mp:226～227℃,溶于氯仿等有机溶剂。其结构经HPLC及ESI-MS检测得到确证;浓度依赖性地抑制K562细胞的增殖,并使G0/G1期的细胞比例增加。结论:以大黄素为原料,成功合成了其新的衍生物。三甲氧基大黄素具有抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期由G0/G1期向S期移行的抗肿瘤活性。

双长链大黄素季铵盐衍生物的合成及抗癌活性研究

为了提高大黄素的抗癌活性和水溶性,通过羟基保护、NBS溴化、然后再和叔胺反应,得到两个双长链季铵盐大黄素衍生物.用红外光谱,核磁共振和元素分析表征了这两个产物的结构.这两个化合物对白血病K562和胃癌AGS、BGC细胞株的半数抑制浓度(IC50)均比大黄素的相应值明显降低,表明在大黄素的6位链接双长链季铵盐可以提高抗癌活性.

大黄素结构修饰的研究进展

大黄素是中草药大黄的主要有效活性成分,广泛存在于蓼科植物中,是分布最广泛的一种蒽醌类物质.由于大黄素本身的生理活性显著,其产品已应用于诸多领域,诸如医疗、保健等,进而对大黄素衍生物及其生物活性的研究也广受关注.文章主要阐述了大黄素结构修饰的过程及其生物活性的最新研究进展,为大黄素的进一步开发利用提供参考.

抗菌抗病毒大黄素型蒽醌类成分提取分离技术的研究与应用

经研究发现大黄素型蒽醌类化合物对细菌和病毒有明显的抑制作用。该类化合物的分离和提纯近年来取得了不少进展,发现了一些新技术、新工艺,使得提取、分离更加快速、有效。对国内外抗病毒大黄素型蒽醌类成分提取分离技术及其应用作一概述,并展望其开发应用前景。