加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾结构改变的干预作用

目的:探讨实验性精索静脉曲张大鼠附睾管精子发育成熟的改变及加味大黄蟅虫颗粒对附睾精子成熟的影响。方法:60只SD雄性大鼠随机分为模型组、假手术组、迈之灵组及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组,每组10只。除假手术组外,各组按Turner方法制作左侧精索静脉曲张大鼠模型。造模完成后,假手术组及模型组大鼠均给予生理盐水;迈之灵组给予迈之灵片54 mg/kg体重药量溶于生理盐水中;加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组分别予以含生药0.6、1.2、2.4 g/ml加味大黄蟅虫颗粒水冲剂。各组皆按1 ml/100 g体重灌胃,每日1次,连续8周。给药8周后全部处死各组实验大鼠,取出左侧附睾,检测附睾精子质量及局部显微超微结构的改变,并行组间对比。结果:模型组大鼠附睾管局部上皮细胞退化变性,部分主细胞及基细胞空泡变性,管腔内见各级未成熟精子细胞。与模型组[(12.77±6.25)%]比较,加味大黄蟅虫颗粒中[(32.23±6.55)%]、高[(39.39±8.53)%]剂量组和迈之灵组[(31.10±7.77)%]大鼠附睾精子活率升高(P<0.01)。与迈之灵组比较,加味大黄蟅虫颗粒高剂量组附睾精子活率[(31.10±7.77)%vs(39.39±8.53)%]及浓度[(10.69±4.92)×10~6/ml vs(36.37±7.09)×10~6/ml]明显增高(P<0.05)。结论:实验性精索静脉曲张大鼠附睾管局部细胞凋亡明显、间质水肿、微血管扩张,加味大黄蟅虫颗粒能提高附睾培育精子成熟的稳定性,为精子的发生发育创造有利的条件。

加味大黄蟅虫颗粒对实验性精索静脉曲张模型大鼠精子质量的影响

目的:观察加味大黄蟅虫颗粒对实验性精索静脉曲张模型大鼠精子质量的影响。方法:按照随机数字表法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、左卡尼汀组、加味大黄蟅虫颗粒组,每组10只。建立左侧精索静脉曲张(ELV)大鼠模型,正常组、模型组每天给予生理盐水灌胃;左卡尼汀组大鼠每天给予左卡尼汀口服溶液100mg/(kg·d);加味大黄蟅虫颗粒组每天给予加味大黄蟅虫颗粒(10g/kg)灌胃。4周后检测大鼠附睾精子活力,睾丸组织Johnson评分,以及大鼠附睾组织乳酸脱氢酶(LDH)、α-葡糖苷酶、果糖浓度。结果:与正常组比较,模型组大鼠附睾精子活动率明显下降,大鼠睾丸组织病理Johnson评分明显低于正常组(P<0.05);与模型组比较,左卡尼汀组和加味大黄蟅虫颗粒组精子浓度、活动率明显高于模型组,左卡尼汀组和加味大黄蟅虫颗粒组乳酸脱氢酶(LDH)、α-葡糖苷酶、果糖浓度与模型组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:加味大黄蟅虫颗粒可能通过参与精子的能量代谢,促进精子的成熟,提高精子质量,达到"活血生精"之效。

基于Nrf2/HO-1通路的加味大黄虫庶虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的保护作用及与核因子NF-E2相关性因子(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的关系。方法:60只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分成假手术组、模型组、迈之灵组及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组。采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型。造模完成后,加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组分别给予浓度为0.6、1.2、2.4 g/ml的大黄蟅虫丸生药水冲剂灌胃,假手术组和模型组予以等量的生理盐水灌胃,迈之灵组则予54 mg/kg迈之灵片,以上各组灌胃体积均为1 ml/100 g,1次/d,持续8周。给药8周后全部处死以上各组大鼠,取出左侧附睾检测精子质量及观察局部显微超微结构的变化;Annexin V-FITC法检测左侧附睾生精细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测左侧附睾组织中Nrf2、HO-1的表达。结果:模型组中左侧附睾组织内发生明显病理损伤,各级生精细胞和精子数量重度减少,细胞结构部分破坏,溶酶体、线粒体、内质网、细胞核、细胞膜等部分亚细胞结构消失,而加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组中左侧附睾组织的病理损伤具有一定程度的改善。与模型组相比,加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组大鼠左侧附睾的精子浓度及活率显著增高(P<0.05)。与迈之灵组比较,加味大黄蟅虫颗粒高剂量组精子浓度及活率显著升高(P<0.05)。模型组中左侧附睾生精细胞凋亡率显著高于假手术组(P<0.05),加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组中生精细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05)。免疫组织化学法显示,模型组大鼠左侧附睾组织中Nrf2/HO-1棕黄色阳性表达呈散在排列,且细胞辉度低;而加味大黄蟅虫颗粒高剂量组、迈之灵组中棕黄色阳性表达的细胞辉度明显提升。结论:加味大黄蟅虫颗粒可以有效修复精索静脉曲张大鼠附睾组织的病理损伤,提高Nrf2/HO-1的蛋白表达,进而拮抗生精细胞的凋亡,为精子的发育成熟提供有利条件。

加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠的影响

目的探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠睾丸局部微环境及生精细胞凋亡基因表达的影响。方法采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型,按随机数字表法将60只SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、迈之灵组(迈之灵片54 mg/kg)及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组(生药水冲剂5.4、10.8、21.6 g/kg),每组10只,造模完成后4周开始给药,连续8周。运用精子计数板和彩色精子质量分析系统检测大鼠精液质量;透射电镜观察各组大鼠睾丸局部超微结构病理变化;Annexin V-FITC检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况;荧光定量PCR检测各组大鼠睾丸组织中凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9的表达。结果模型组睾丸组织多见未成熟的生精细胞,出现空泡变性,而加味大黄蟅虫颗粒组管腔内见大量成熟生精细胞,浆内可见大量的线粒体、高尔基体及精子。相较于模型组,加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组大鼠精子密度、活率增高(P<0.01),凋亡率降低(P<0.05,P<0.01),凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型诱导的大鼠睾丸组织损伤具有保护作用,从而改善睾丸局部微环境,为精子的发育成熟提供有利条件,这可能与其有效调控生精细胞凋亡基因表达有关。

加味大黄■虫颗粒对精索静脉曲张大鼠附睾区段结构性“微环境”的干预

目的:通过观察实验性精索静脉曲张大鼠附睾区段结构性"微环境"主要构件的改变,探讨加味大黄■虫颗粒对实验性精索静脉曲张大鼠附睾精子发育成熟的保护机制。方法:按Turner方法制作模型组、假手术组、迈之灵组及不同剂量加味大黄■虫颗粒组左精索静脉曲张大鼠模型。造模完成后,模型组及假手术组每日予1次等量生理盐水灌胃;迈之灵组每日予1次迈之灵片等量水溶液灌胃;不同剂量加味大黄■虫颗粒组每日各予1次不同浓度加味大黄■虫颗粒等量水溶液灌胃。给药8周后,检测附睾局部"微环境"主要构件的改变。结果:相较于模型组,迈之灵组和加味大黄■虫颗粒高、中剂量组大鼠附睾精子活率升高(P<0.01)。相较于迈之灵组,加味大黄■虫颗粒高剂量组附睾精子活率和浓度增高明显(P<0.05),附睾SOD活性明显增高(P<0.05)。结论:加味大黄■虫颗粒改善精索静脉曲张的附睾区段"微环境"的物理支撑,提高附睾培育精子成熟"微环境"稳定性,创造精子发育成熟的有利条件。

加味大黄[庶虫]虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠精子线粒体结构的影响

目的:探索加味大黄[庶虫]虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠精子线粒体结构的影响。方法:40只雄性大鼠随机选出10只作为假手术组,剩余30按照Turner方法制造左侧精索静脉曲张模型大鼠,造模完成后,按照随机数字表法分为加味大黄[庶虫]虫颗粒组、模型组、迈之灵组,每组各10只。加味大黄[庶虫]虫颗粒组给予加味大黄[庶虫]虫颗粒灌胃;迈之灵组予迈之灵片,假手术组和模型组分别予等剂量0.9%生理盐水灌胃。8周后处死所有大鼠,取出左侧睾丸组织,完成精液质量分析、睾丸组织病理检测。结果:灌胃8周后,加味大黄[庶虫]虫颗粒组精子浓度、总活率、前向运动精子、精子直线速度(VSL)、精子曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、精子头侧摆幅度(ALH),明显高于模型组(P<0.05)。模型组睾丸组织病理报告生精小管管腔空化,各级生精细胞破坏严重,精子膜结构破坏,精子线粒体肿胀、溶解。而加味大黄[庶虫]虫颗粒组中睾丸组织的病理损伤得到不同程度的改善,精子线粒体结构完整,形态大小规则。结论:加味大黄[庶虫]虫颗粒在一定程度上修复精索静脉曲张大鼠睾丸组织的病理损伤,进而起到保护精子线粒体结构与功能的作用,为精子的发育、活动提供稳定的能量代谢环境,有助提高精子活力及增加受精能力。

基于Nrf2/ARE通路的加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠的生精效应观察

目的观察加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张性不育模型大鼠的生精效应。方法按照随机数字表法将40只大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、迈之灵组、加味大黄蟅虫颗粒组,每组10只。建立精索静脉曲张性不育大鼠模型,给药干预方法:假手术组、模型组每天给予生理盐水灌胃;迈之灵组大鼠每天给予迈之灵片54mg/kg;加味大黄蟅虫颗粒组每天给予加味大黄蟅虫颗粒(10g/kg)灌胃。4周后检测大鼠附睾精子的质量,检测大鼠睾丸组织生化酶学的活性,比较大鼠睾丸上皮显微超微结构的改变,免疫组化检测模型大鼠睾丸组织中Nrf2蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠附睾精子浓度低,睾丸病理改变明显,睾丸曲细精管层次紊乱,成熟精子数量减少或缺如;透射电镜下睾丸各级生精细胞坏死,线粒体空泡化,内质网扩张,细胞核染色质固缩、核崩解;免疫组化睾丸组织中Nrf2的棕黄色阳性表达的细胞辉度低。与模型组相比,迈之灵组和加味大黄蟅虫颗粒组精子浓度显著高于模型组,成熟精子数量和生精细胞形态结构明显恢复;免疫组化睾丸组织中Nrf2的棕黄色阳性表达的细胞辉度明显升高;迈之灵组和加味大黄蟅虫颗粒组超氧化物歧化酶(SOD)、α-葡萄糖苷酶的活性、果糖浓度与模型组比较有差异性(P<0.05)。结论加味大黄蟅虫颗粒能改善精索静脉曲张大鼠睾丸的病理损伤,提升睾丸组织中Nrf2的蛋白表达,对睾丸的精子发生发育具有一定的保护作用。

加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾上皮细胞凋亡的影响

目的探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾精子发生发育环境与凋亡因子Bcl-2/Bax/Cycs的影响。方法采用部分结扎左肾静脉从而制作左侧精索静脉曲张模型。将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、迈之灵组、加味大黄蟅虫颗粒组,每组10只。模型建立后,0.9%氯化钠溶液予以假手术组、模型对照组灌胃,加味大黄蟅虫颗粒组予以浓度为(10.8g/kg)生药加纯水溶解后灌胃,迈之灵予以浓度(54mg/kg)加纯水溶解后进行灌胃,以上各组灌胃剂量均以1ml/100g进行计算,1次/天,持续灌胃8周。通过HE染色观察附睾的组织结构;Annexin V-FITC法检测附睾上皮细胞凋亡情况;荧光定量PCR检测附睾组织中Bax、Bcl-2、Cycs因子的表达情况。结果模型组中附睾组织存在明显的病理损伤,经干预后加味大黄蟅虫颗粒组与迈之灵片组中附睾的病理损伤存在不同程度的改善。假手术组的附睾上皮细胞的凋亡率明显低于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);加味大黄蟅虫颗粒组与迈之灵组的附睾上皮细胞凋亡率明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR提示VC模型组与假手术比较组Bax/Cycs表达量上升、Bcl-2表达量降低,治疗组与模型组比较:Bax/Cycs表达量降低、Bcl-2表达量增加。结论加味大黄蟅虫颗粒可以部分修复模型组大鼠附睾的病理损伤,其机理可能通过调控细胞凋亡途径,下调Bax/Cycs、上调Bcl-2凋亡因子以维护附睾精子微环境的稳态,进而有效提高精子质量。

王权胜从肾虚血瘀论治精索静脉曲张性不育经验

王权胜教授认为男性精索静脉曲张性不育病位在肾,与肝脾有关,肾虚为本,血瘀、湿热为标。运用大黄虫颗粒治疗精索静脉曲张性不育重视补肾祛瘀并重,以通为补,缓中补虚。并强调在治疗过程中对患者进行积极的心理治疗和生活指导。