液质联用法定性检测熟大黄配方颗粒中的土大黄苷和番泻苷A

目的:应用液质联用法定性检测熟大黄配方颗粒中土大黄苷和番泻苷A。方法:采用HPLC-MS/MS法同时检测土大黄苷和番泻苷A,使用Welch UHPLC XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm),采用0.1%甲酸水-甲醇梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min^(-1),采用ESI离子源,多反应模式(MRM)模式。结果:该方法对土大黄苷和番泻苷A的检出浓度分别为:2.0 ng·mL^(-1)、8.0 ng·mL^(-1),用该方法检测了山东省内市售的8批熟大黄配方颗粒,均未检出土大黄苷和番泻苷A。结论:该方法专属性强,灵敏度好,能快速定性检查熟大黄配方颗粒中是否含有土大黄苷和番泻苷A,可用于熟大黄(药用大黄)配方颗粒的质量控制。

大黄配方颗粒对急性胰腺炎患者炎症因子水平影响的临床观察

目的观察大黄配方颗粒对急性胰腺炎(AP)患者炎症指标[白细胞介素-5(IL-5)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-12P70(IL-12P70)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平的影响。方法回顾性分析2021年8月至2022年8月安徽医科大学第二附属医院急诊外科诊治的61例AP患者的临床资料,将未使用大黄配方颗粒者分为对照组(31例)、使用大黄配方颗粒者分为观察组(30例),动态监测两组患者使用大黄配方颗粒治疗前后炎症指标水平的变化,对比分析大黄对两组患者炎症指标水平的影响。结果对照组入院后72 h的IL-5、IFN-γ、IL-12P70、TNF-α水平均高于入院时(P<0.01),而观察组入院后72 h的IL-5、IFN-γ、IL-12P70、TNF-α水平均低于入院时。结论大黄配方颗粒可明显降低AP患者炎症指标IL-5、IFN-γ、IL-12P70、TNF-α水平,从而改善AP患者的炎症反应。

HPLC法测定大黄配方颗粒中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量

目的建立大黄配方颗粒中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量测定方法.方法采用反相高效液相色谱法测定,用Kromasil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15)为流动相,检测波长254 nm.结果大黄酸、大黄素、大黄酚的线性范围分别为0.010 9～0.218 0 μg、0.011 2～0.224 0 μg和0.011 9～0.238 0 μg;大黄酸平均回收率为100.6%,RSD＝0.92%(n=9);大黄素平均回收率为100.5%,RSD＝0.85%(n=9);大黄酚平均回收率为100.6%,RSD＝1.15%(n=9).结论所用方法测定样品分离效果佳,灵敏度高、重复性好,能有效地控制大黄配方颗粒的质量.

大黄配方颗粒质量分析及标准建议

目的:比较目前市场上不同厂家的大黄配方颗粒企业标准和全检结果,对质量差异进行分析,并对质量标准和市场监管提出建议。方法:对比各企业间大黄配方颗粒质量标准的差异,采用企业标准,对9家企业109批大黄及炮制品配方颗粒进行全检。结果与结论:各企业大黄配方颗粒批间质量稳定,但不同企业间质量差异较大;建议在全国范围内,统一中药配方颗粒质量标准,加强监管。

大黄配方颗粒蒽醌成分的HPLC指纹图谱研究

目的:建立大黄配方颗粒中蒽醌成分为特征的HPLC指纹图谱。方法:以大黄酸为参照物,利用高效液相色谱梯度洗脱,测定了11批大黄配方颗粒样品;色谱柱为Waters SunFire C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B),检测波长:254 nm,柱温:30℃,流速:1.0 ml·min-1。结果:通过HPLC指纹图谱分析,标示出大黄配方颗粒8个共有的蒽醌成分色谱峰,11批样品指纹图谱的相似度均大于0.93,并确认4个已知峰为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚。结论:建立的大黄配方颗粒蒽醌成分的HPLC指纹图谱稳定可靠,操作简便,可为大黄配方颗粒质量控制提供科学依据。

大黄配方颗粒对庆大霉素诱导的肾损伤小鼠JAK2/STAT3信号通路的调节作用研究

目的:研究大黄配方颗粒(DHPK)对庆大霉素诱导的肾损伤小鼠JAK2/STAT3信号通路的调节作用。方法:90只小鼠随机分为对照组、模型组、DHPK低、中、高剂量组及阳性对照组,15只/组,采用腹腔注射庆大霉素建立肾损伤小鼠模型,DHPK低、中、高剂量组按照1、2、4 g/kg灌胃给予大黄配方颗粒,阳性对照组按照21.43 mg/kg灌胃给予小鼠维拉帕米,1次/d,连续28 d,检测小鼠24 h尿蛋白量及尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷(NAG)酶水平,血清尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr)水平、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,苏木精-伊红(HE)染色法检查肾组织病理学变化,Western blot检测小鼠肾组织p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3水平。结果:与模型组比较,DHPK各剂量组小鼠24 h尿蛋白量及尿NAG酶水平,血清BUN、Scr水平、肾组织MDA水平及p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3水平均显著降低(P<0.05),肾组织SOD活性显著升高(P<0.05),小鼠肾组织病理学变化明显改善。结论:大黄配方颗粒能够恢复庆大霉素诱导的肾损伤小鼠肾功能,降低氧化应激损伤,其机制可能与调节JAK2/STAT3信号通路有关。

大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱研究

目的:建立大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱,为配方颗粒的快速质量评价提供方法。方法:采用超高效液相色谱法,以Agilent poroshell 120 EC C18柱(4.6mm×100mm,2.7μm)为色谱柱;以甲醇∶0.4%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱;检测波长254nm;流速0.8mL/min;柱温25℃。结果:建立了大黄配方颗粒的UHPLC指纹图谱,确定了17个共有峰,各大黄配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.9以上,可以用于大黄配方颗粒的快速定性鉴别。结论:该方法简单、准确、快速、重复性好,能有效地对大黄配方颗粒的质量进行评价。

大黄与酒大黄配方颗粒红外光谱研究

目的:建立大黄与酒大黄配方颗粒的红外光谱快速鉴别方法,为中药炮制品配方颗粒在不具备饮片形态的情况下真伪鉴别提供示范性研究。方法:采用一维红外光谱及二阶导数光谱法分别对大黄与酒大黄配方颗粒进行红外光谱分析。结果:大黄与酒大黄配方颗粒的一维红外光谱基本相似,仅在1 447,1 367,1 146,1 079,925,576 cm-1附近吸收峰的位置、强度、形状上存在一定的差异;其二阶导数光谱在1 800～500 cm-1峰位置和峰强度的变化较明显。结论:红外光谱技术快速、准确、简便,可用于大黄与酒大黄配方颗粒的鉴别和质量控制。

基于化学表征和生物效价检测的大黄配方颗粒质量评价研究

该文尝试将多指标成分同时定量分析和生物效价分析方法联合使用的模式应用于中药配方颗粒的质量评价,并以大黄配方颗粒为模式药进行了示范性研究。采用超高效液相色谱法同时测定大黄配方颗粒中芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷等10个蒽醌类化学成分的含量;在复方地芬诺酯片致小鼠便秘模型上,测定不同批次大黄配方颗粒致泻生物效价;在体外抗大鼠血小板聚集模型基础上,测定不同批次大黄配方颗粒的活血生物效价;采用SPSS统计软件对测定的10个蒽醌类化学成分与致泻、活血生物效价之间的相关性进行统计学分析。多指标化学含量测定结果显示10个批次间大黄配方颗粒的化学表征差异较大,与此同时,致泻、活血生物效价均存在一定的差异性;相关性分析结果显示大黄配方颗粒的致泻生物效价强弱和其含有的结合型蒽醌糖苷类成分的含量有显著相关性(P<0.01),活血生物效价的强弱和其含有的游离型蒽醌成分的含量有显著相关性(P<0.01)。综上,采用多组分化学表征和生物效价检测联用的模式可以客观量化、更全面的反映不同批次大黄配方颗粒的整体质量差异。

中药效应近红外谱的构建及应用——以大黄配方颗粒为例

中药配方颗粒的质量一致性是保障其临床疗效稳定性的重要因素。本研究以大黄配方颗粒为示例,结合近红外光谱和生物活性效价探索构建中药效应近红外谱。建立大黄配方颗粒的近红外检测方法,并采集不同批次的近红外光谱信息;基于复方地芬诺酯片致小鼠便秘模型测定不同批次大黄配方颗粒致泻生物效价(动物实验经中国人民解放军第三○二医院动物福利伦理委员会批准,批准号:IACUC-2019-0010);采用超高效液相色谱法同时测定大黄配方颗粒中芦荟大黄素等10种蒽醌类化学成分的含量。对近红外光谱和生物活性效价进行相关性分析,初步筛选出与活性高度相关的5个特征波段:4011~4390 cm^-1、4859~5461 cm^-1、7012~7493 cm^-1、10992~11312 cm^-1、11871~12489 cm^-1。本研究筛选发现的基于近红外光谱的活性波段可实现大黄配方颗粒质量波动的快速、在线检测,提高大黄配方颗粒的质量可控性。本文的研究模式对中药配方颗粒的质量控制亦具有一定的参考价值。

大黄配方颗粒对慢性传输性便秘模型大鼠Cajal间质细胞自噬及胃肠动力调节作用研究

目的研究大黄配方颗粒对慢性传输性便秘模型大鼠Cajal间质细胞自噬及胃肠动力的调节作用。方法将75只大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及低、中、高剂量组,每组15只。除对照组外,其余各组大鼠采用复方地芬诺酯混悬液灌胃法建立慢性传输性便秘大鼠模型。低、中、高剂量组大鼠分别灌胃1、2、4 g/kg大黄配方颗粒,对照组及模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药14 d。测定各组大鼠粪便含水率、肠推动率,采用ELISA法检测血清P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、NO、NOS水平,HE染色观察大鼠结肠组织病理学改变,免疫组化染色检测大鼠结肠组织干细胞生长因子受体(c-kit)水平,PCR法及Western blotting分别检测结肠组织c-kit、自噬蛋白Beclin1 mRNA及蛋白水平。结果与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠粪便含水率、碳末推进距离及肠推动率升高(P<0.05),血清SP水平升高(P<0.05),血清VIP、NO、NOS水平降低(P<0.05),结肠组织c-kit免疫组化平均表达升高(P<0.05),结肠组织c-kit mRNA[(2.33±0.35)、(3.04±0.17)、(3.83±0.23)比(0.61±0.07)]及蛋白[(0.42±0.06)、(0.60±0.07)、(0.79±0.08)比(0.22±0.04)]水平升高(P<0.05),Beclin1 mRNA[(4.17±0.37)、(3.35±0.44)、(1.05±0.28)比(6.04±0.31)]及蛋白[(0.76±0.11)、(0.57±0.08)、(0.43±0.05)比(0.91±0.06)]水平降低(P<0.05)。结论大黄配方颗粒可提高慢性传输性便秘大鼠粪便含水率、肠推动率、血清SP水平及结肠组织c-kit水平,降低大鼠血清VIP、NO、NOS水平及结肠组织Beclin1水平,进而抑制慢性传输性便秘大鼠Cajal间质细胞自噬,调节大鼠胃肠动力。