三种大鼠动脉粥样硬化模型复制方法的比较

为研究动脉粥样硬化的发病机制 ,比较了三种大鼠动脉粥样硬化斑块模型建立的方法。分别予单纯高脂、高脂 +维生素D、高脂 +维生素D +内皮损伤三种不同方法处理大鼠 ,90天后比较血脂、血钙、胸主动脉的形态学改变、巨噬细胞和α 平滑肌肌动蛋白含量。结果发现 ,三组实验组与正常对照组相比 ,总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇均明显升高 (P <0 .0 1) ;高脂 +维生素D组、高脂 +维生素D +内皮损伤组与正常对照组和高脂组相比 ,血钙均明显升高 (P <0 .0 1) ;高脂 +维生素D组、高脂 +维生素D +内皮损伤与正常对照组相比 ,内膜增厚、中膜萎缩 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;单纯高脂组、高脂 +维生素D组CD6 8为弱阳性 ,高脂 +维生素D +内皮损伤组为强阳性 ;高脂 +维生素D组内膜有较厚的α 平滑肌肌动蛋白阳性 ,高脂 +维生素D +内皮损伤组斑块表面只有很薄的α 平滑肌肌动蛋白阳性 ;单纯高脂组只可形成高脂血症 ,无法形成动脉粥样硬化病变 ;高脂 +维生素D组可形成纤维斑块 ;高脂 +维生素D +内皮损伤组可形成较成熟的动脉粥样硬化斑块。证明了大鼠可作为研究动脉粥样硬化的良好动物模型 ,高脂 +维生素D +内皮损伤组可形成较成熟的动脉粥样硬化斑块。

四妙勇安汤对动脉粥样硬化大鼠氧化损伤的保护作用

目的:探讨四妙勇安汤对AS大鼠脂质代谢的影响,为临床用药提供依据;方法:将SD雄性大白鼠40只随机分为假手术组、空白模型组、四妙勇安汤组、普罗布考组,每组10只。制备AS模型,四妙勇安汤按15.22g/kg给药,普罗布考组按0.16g普罗布考/kg体重给药,假手术组、空白模型组给予同体积的生理盐水。于实验16周末禁食16h后,麻醉动物,腹主动脉取血5ml留置2管,分别分离血清,观察血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、抗总氧化物能力(AOC)、黄嘌呤氧化酶(XOD)的变化;腹主动脉取血后,分离颈总动脉,在主动脉弓起始段取0.5cm主动脉标本做病理切片,观察动脉管壁形态学变化。结果:四妙勇安汤组可以显著降低AS大鼠血清TC和LDL-C水平(P<0.01);可以有效地保护血管内皮,防止AS的形成;升高AS大鼠血清GSH、NOS、T-AOC和SOD水平(P<0.05,P<0.01),降低XOD水平(P<0.01);结论:四妙勇安汤可以舒张血管,清除氧自由基,保护血管内皮,防止AS的发生,其机制与升高GSH、NOS、T-AOC和SOD水平、降低XOD水平有关。

补肾法对绝经后动脉粥样硬化模型大鼠心肌能量代谢的影响

目的观察补肾中药对绝经后动脉粥样硬化模型大鼠心肌能量代谢的影响。方法 SD雌性大鼠,采用卵巢切除术+高脂饮食+免疫反应性损伤法造模,同时补肾中药灌胃,12 w后处死,检测血清雌二醇(E2)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(LDL);取左心室匀浆,检测ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、ATP含量。结果与对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL升高,血清E2及心肌ATP酶、SDH活性、ATP含量降低(P均<0.05)。与模型组比较,治中药组大鼠血清TC、TG、LDL降低,血清E2及心肌ATP酶、SDH活性、ATP含量升高(P均<0.05)。结论补肾法可通过调节绝经后动脉粥样硬化模型大鼠心肌能量代谢,改善血脂水平,防治绝经后女性动脉粥样硬化性疾病。

制何首乌3种成分在动脉粥样硬化大鼠血浆中的测定

目的测定制何首乌Polygoni multiflori Radix Praeparata 3种成分在动脉粥样硬化大鼠血浆中的含有量。方法大鼠灌胃制何首乌CMC-Na溶液后,采集血浆。HPLC分析采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.03%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.9 m L/min;检测波长280 nm,柱温30℃。DAS2.0软件绘制血药浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚分别在61.25~6 125μg/L(r=0.999 8)、12.6~3 150μg/L(r=0.999 3)、24.1~6 030μg/L(r=0.999 5)范围内线性关系良好,方法回收率99.5%~105.8%,RSD 1.3%~3.3%;提取回收率87.2%~96.3%,RSD 3.2%~5.9%。3种成分的药动学行为均符合二室模型,但其在血浆中的含有量远低于在药材中。结论二苯乙烯苷、大黄素和大黄素甲醚在动脉粥样硬化大鼠血浆中生物利用率较低,可能与灌胃制何首乌后成分的肠道吸收有关。

不同方法建立动脉粥样硬化大鼠模型的比较

目的:比较3种不同方法建立的动物模型,探索建立造型简便且重复性好的大鼠动脉粥样硬化模型。方法健康雄性SD大鼠(体质量150～170g)24只,按3种方法建立模型:①高脂造模组,高脂饲料9周;②维生素D3造模组,维生素D340万单位灌胃3d,标准饲料9周;③高脂维生素D3造模组,维生素D320万单位灌胃3d,高脂饲料9周。采用HE染色鉴定各组的动脉粥样硬化病变形成情况。结果:光镜下高脂组血管各层结构基本正常;维生素D3造模组出现典型动脉粥样病变的斑块结构;高脂维生素D3造模组血管壁钙化和平滑肌细胞增生,程度较维生素D3组减轻,未出现典型斑块结构。结论:40万单位维生素D3的造模方法能在较短时间内建立典型成熟的动脉粥样硬化斑块模型。

鳖甲煎丸对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠血脂、血管内皮功能以及基质金属蛋白酶9的影响

目的:观察鳖甲煎丸对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠血脂、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响。方法:将造模成功后雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸高剂量组、血脂康组。灌胃8周后,观察不同组别大鼠血脂、血清ET-1、血清NO、MMP-9的变化。结果:与空白组比较,模型组血清NO水平显著降低(P<0.05),ET-1水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,鳖甲煎丸高、低剂量组、血脂康均能显著降低血清ET-1含量(P<0.05或P<0.01)、升高NO含量(P<0.05或P<0.01)、MMP-9表达明显下降(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸可能通过调脂、保护血管内皮细胞、稳定斑块等作用起到抗动脉粥样硬化的作用。

益脑康对动脉粥样硬化性缺血中风大鼠脑组织MMP-9、TIMP-1活性的影响

目的探讨益脑康对动脉粥样硬化性缺血中风大鼠脑组织MMP-9、TIMP-1活性的影响。方法采用一次性腹腔注射维生素D3与高脂饲料诱导相结合的方法,建立AS大鼠模型。在此模型基础上采用ET-1注射法诱导急性脑缺血模型。然后对大鼠进行脑组织含水量计算,同时采用明胶酶谱法和逆明胶酶谱检测各治疗组大鼠脑组织MMP-9与TIMP-1的活性,并与模型组进行比较。结果模型组大鼠脑组织含水量明显高于各治疗组;同时,与模型组比较,各治疗组大鼠脑组织MMP-9的活性降低,TIMP-1的活性升高。结论益脑康可能通过恢复大鼠脑组织MMP-9和TIMP-1活性的动态平衡从而达到减轻脑水肿的目的 。

动脉粥样硬化大鼠动脉组织中组织蛋白酶D的表达

目的用基因芯片技术研究动脉粥样硬化大鼠动脉组织中差异表达的基因,以分析组织蛋白酶D基因表达变化。方法以高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射建立大鼠动脉粥样硬化模型,测定血清总胆固醇及甘油三酯;病理学观察HE及油红O染色的冠状动脉及主动脉;提取主动脉RNA作基因芯片检查,用免疫荧光及免疫印迹法检测组织蛋白酶D在动脉中表达的分布情况及表达水平。结果14周时模型组总胆固醇和甘油三酯较对照组明显升高(P均<0.01);病理学观察发现模型组形成纤维增生性动脉粥样硬化病变;基因芯片结果显示与对照组比较,模型组组织蛋白酶基因表达上调,组织蛋白酶D表达上调,R值(Cy3/Cy5)为2.14(P<0.01);免疫荧光检测发现模型组中组织蛋白酶D表达主要分布在动脉内膜、中膜;免疫印迹法检测动脉中组织蛋白酶D蛋白显示模型组表达较对照组增加(P<0.05)。结论组织蛋白酶及其内源性抑制剂的失衡可能是导致动脉粥样硬化的因素之一,组织蛋白酶D可能参与了血管重塑及细胞凋亡从而促进动脉粥样硬化的发展。

心脑通络液对动脉粥样硬化大鼠血清学指标及IL-6与TNF-α影响的研究

目的:探讨心脑通络液对动脉粥样硬化大鼠血清学指标及IL-6与TNF-α的影响。方法:将40只健康SD大鼠随机分成5组:血脂康对照组(称为对照组)8只、假手术组8只、心脑通络液高剂量组(称为高剂量组)8只、模型组8只和心脑通络液低剂量组(称为低剂量组)8只;除假手术组以外,其他4组使用球囊的受损方法结合高脂饲料的喂养方法来制作大鼠AS的模型;观察大鼠血清TNF-α、IL-6水平变化情况、血浆黏度、红细胞的变形、聚集指数红细胞压积水平。结果:模型组大鼠血清内TNF-α、IL-6水平及红细胞的变形、聚集指数均显著上升,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组、高剂量组和低剂量组大鼠血清TNF-α与IL-6水平均显著下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组下降效果更佳,与对照组、低剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠血浆黏度和红细胞压积明显上升,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组、高剂量组和低剂量组大鼠血浆黏度和红细胞压积明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:心脑通络液可通过抑制血清中炎症因子IL-6和TNF-α的水平来延缓AS的形成。

大黄蛰虫丸对动脉粥样硬化大鼠模型NO和ET-1表达影响随机对照研究

[目的]观察大黄蛰虫丸对动脉粥样硬化大鼠模型腹主动脉壁中NO及ET-1含量的影响。[方法]采用大鼠腹主动脉机械损伤联合高脂饮食的方法复制动脉粥样硬化大鼠模型,然后采取经口灌胃的方式给予大黄蛰虫丸口服,连续给药4周,治疗4周后,处死各组大鼠,检测各组大鼠腹主动脉中NO及ET-1的含量。[结果]与模型组比较,大黄蛰虫丸组大鼠腹主动脉中NO含量显著升高(P<0.05),而ET-1含量显著下降(P<0.01)。[结论]大黄蛰虫丸治疗动脉粥样硬化效果明显,其机理可能与其能够提高动脉血管中NO的含量,降低ET-1含量有直接关系。

丹参煎剂对高脂血症动脉粥样硬化大鼠血脂影响随机平行对照研究

[目的]观察丹参煎剂对高脂血症动脉粥样硬化大鼠血脂的影响。[方法]使用随机平行对照方法,将50只SD大鼠用随机数字表法随机分为空白对照组、AS模型组、丹参煎剂(低、中、高)剂量组,每组10只。采取高脂联合腹主动脉内膜机械性损伤方法连续4周复制动脉粥样硬化模型。第5周开始用传统方法将丹参制成0.2g/mL、0.4g/mL、0.8g/mL煎剂进行灌胃干预。第10周检测甘油三酯、总胆固醇。[结果]甘油三酯、总胆固醇含量AS模型组均显著升高(P<0.01);与AS模型组比较,丹参煎剂低、中、高剂量组均明显降低(P<0.01)。[结论]丹参煎剂低、中、高剂量均可降低动脉粥样硬化大鼠模型的甘油三酯、总胆固醇含量。

重组人脑利钠肽对动脉硬化大鼠血管内皮功能的影响

目的探讨rhBNP对动脉粥样硬化(AS)大鼠模型血管内皮功能的影响。方法 40只健康wistar大鼠,随机分为对照组、模型组、处理组各8只。处理组分别给予硝酸酯类、阿魏酸钠、重组人脑利钠肽皮下注射。采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定各组大鼠处理前后血清中血栓素B2(TXB2)和6-酮前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)的含量,并且光镜下观察各组处理前后大鼠的主动脉内膜细胞的变化。结果 1)处理组药物治疗后,血清中TXB2均下降、6-Keto-PGF1a均升高,与治疗前比较有统计学差异(P<0.05);2)各处理组间药物应用后二者无差别(P>0.05);3)光镜的观察结果提示:模型组血管管腔内有附壁斑块;平滑肌细胞排列紊乱;处理组内膜较光滑,局部有MC粘附,偶可见EC缺失,但好于模型组,各处理组之间未见明显差别。结论 rhBNP通过保护血管内皮功能具有抗动脉粥样硬化的作用。

四妙勇安汤对动脉粥样硬化大鼠SOCS1和SOCS3的影响

目的:通过研究四妙勇安汤对动脉粥样硬化(AS)大鼠SOCS1和SOCS3的影响,探讨其抗炎机制。方法:将体质量为200～230 g的纯种SD雄性大白鼠40只按数字表法随机分为假手术组、空白模型组、四妙勇安汤组、普罗布考组,每组10只。制备AS模型,各组于造模后第3天开始给药,四妙勇安汤按15.22 g.kg-1给药,普罗布考按0.16 g.kg-1给药,假手术组、空白模型组给予同体积的生理盐水。于实验16周末禁食16 h后,麻醉动物,腹主动脉取血,分离血清,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-10(interleukin-10,IL-10);取大鼠胸腹主动脉段,采用HE染色法观察其病理改变,采用Westen-blot法观察SOCS1和SOCS3蛋白的表达,采用RT-PCR法观察SOCS1和SOCS3mRNA的表达。结果:病理结果提示,本实验成功制备了AS大鼠模型,四妙勇安汤升高IL-10的作用优于普罗布考(P<0.01),而对TNF-α的影响两者则没有显著差异(P>0.05);普罗布考降低SOCS1蛋白的作用优于四妙勇安汤(P<0.01),四妙勇安汤组降低SOCS3蛋白的作用优于普罗布考组(P<0.05);四妙勇安汤和普罗布考均可以降低SOCS1mRNA和SOCS3mRNA的表达,组间无显著差异(P>0.05)。结论:四妙勇安汤的抗炎机制与调节SOCS1和SOCS3表达有关。

银杏叶片对动脉粥样硬化性大鼠主动脉壁清道夫受体A表达的影响

目的观察银杏叶片对动脉粥样硬化性大鼠主动脉壁清道夫受体A的表达及血清炎性因子变化的影响,探讨银杏叶片抗动脉粥样硬化斑块形成的新机制。方法 Wistar雄性大鼠45只,随机分成对照组、模型组及银杏叶片组。测定各组大鼠血糖、血脂、血钙、血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)水平,免疫组化法观察清道夫受体A在动脉壁表达的情况,并观察清道夫受体A表达与炎症因子水平的相关性。结果与对照组比较,模型组血糖、血钙明显升高(P<0.05),甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.01);新生内膜面积显著增厚,内膜增生百分比显著变大,管腔狭窄指数显著变小,差异均有统计学意义(P<0.01);CRP、sICAM-1、sVCAM-1水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,银杏叶片组血糖、血钙明显降低(P<0.05),TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.01)。模型组主动脉管腔比银杏叶片组明显狭窄(P<0.05)。清道夫受体A在动脉壁有表达,而银杏叶片组较模型组3项指标显著改善,差异均有统计学意义(P<0.01)。银杏叶片组较模型组可显著降低动脉粥样硬化大鼠血清CRP、sICAM-1、sVCAM-1水平(P<0.01)。血清炎症因子(CRP、sICAM-1、sVCAM-1)水平与动脉壁清道夫受体A阳性表达面积百分比呈正相关(r分别为0.701、0.604、0.581,均P<0.01)。结论动脉粥样硬化大鼠血清中炎症因子水平增高、动脉壁清道夫受体A表达增强,且清道夫受体A表达与炎症因子水平密切相关。银杏叶片可降低炎症因子水平、抑制清道夫受体A表达。

更正

发表于本刊2020年第51卷第1期103~108页的《多肽化合物urantide抑制动脉粥样硬化大鼠心脏Ⅰ型胶原的表达》一文中,第106页彩图3作者提出文中提供的图片有误,以下图为准。特此更正!