两种仙灵骨葆提取液对肝脏线粒体的作用

目的通过考察仙灵骨葆对肝脏细胞线粒体功能来评价其是否有肝脏损伤作用。方法通过检测仙灵骨葆醇提液和水提液对大鼠原代肝脏细胞ATP含量,线粒体膜电位和线粒体特异荧光染料在线粒体内富集程度等线粒体功能和形态指标的影响,比较两种不同提取方法对肝脏线粒体的作用。结果仙灵骨葆醇提液在10~104倍稀释的情况下肝细胞线粒体状态均有显著变化,而水提液则仅在稀释10倍和100倍时线粒体状态才有明显改变。两者只有在稀释10倍（大约是临床剂量的50倍）时显著降低肝细胞ATP含量以及线粒体膜电位。结论仙灵骨葆两种提取方式中水提法与临床使用方式更为接近,这提示目前仙灵骨葆临床使用剂量有较宽的安全范围,而醇提法对肝细胞活力以及线粒体的形态和功能的影响明显强于水提法。

活性氧在微囊藻毒素-LR诱导细胞凋亡效应中的作用探讨

[目的]研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对原代大鼠肝脏细胞的促凋亡效应以及探讨活性氧(ROS)在这一效应中的作用。[方法]采用胶原酶灌注法获取原代大鼠肝脏细胞,用William's E培养液重悬后接种于铺被鼠尾胶原的孔板内,分为1个对照组和4个染毒组,37℃、5%CO_2条件下培养3h后换液并染毒各梯度浓度的MC-LR,使各染毒组毒物终浓度分别为1×10^(-5)、1×10^(-6)、1×10^(-7)、1×10^(-8)mol/L。染毒相应时间后,采用中性红比色实验检测细胞存活率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内ROS含量。[结果]中性红比色实验发现,至染毒期末观察到1×10^(-5)、1×10^(-6)mol/L两个染毒组的肝脏细胞几乎全部死亡(>95%),1×1^(-7)mol/L染毒组部分肝脏细胞死亡(约30%);流式细胞术观察到MC-LR染毒后早期(5min)诱导细胞凋亡,同时观察到肝脏细胞内短时间(15min)快速产生大量的ROS。[结论]MC-LR诱导原代大鼠肝脏细胞快速产生大量的ROS,这可能是MC-LR诱导细胞凋亡并最终导致细胞死亡的毒性作用机制之一。