卵巢组织异体移植对去势模型大鼠骨质疏松的治疗作用

目的:研究卵巢组织异体移植对去势模型大鼠骨质疏松的治疗作用及其机制。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢模型组,雌激素组和卵巢组织块移植组。采用背部定位切除双侧卵巢,建立去势大鼠模型。造模的同时,将同种异体卵巢组织块植入去卵巢大鼠背部肌肉层以建立卵巢移植模型。雌激素组大鼠按雌激素0.06 mg/kg灌胃进行替代治疗3个月,其他各组均给予等量生理盐水。实验结束后,称量体重和子宫湿重,计算子宫重量指数;HE染色光镜观察大鼠阴道上皮细胞和股骨细胞形态;骨密度仪法检测大鼠全身、股骨和胫骨近端的骨密度;放射免疫法检测血清雌激素(E2)水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠子宫重量指数明显下降(P<0.01);血清雌激素水平显著降低(P<0.01);阴道上皮细胞较小,无角质化;股骨中的骨小梁数目显著减少,骨吸收明显,呈典型的"岛屿状",骨髓腔增大,髓腔中基质细胞极少;双能X线显示,模型大鼠全身、股骨和胫骨的骨密度均显著减少(P均<0.01);与模型组相比,雌激素组和移植组大鼠的子宫重量指数增加明显(P<0.01,P<0.01);两组大鼠的血清雌激素水平上升显著(P<0.01,P<0.01);病理切片显示,雌激素组和移植组大鼠的阴道上皮细胞大多呈角质化;雌激素组大鼠皮质骨增厚,骨小梁粗壮,数量多,排列较整齐,骨小梁间距较小,且骨髓腔缩小,骨基质细胞明显增多;移植组大鼠皮质骨面积较大,骨小梁数量和面积增加明显,骨小梁间距小,排列规则,连接增多,骨基质细胞分布均匀。结论:卵巢组织移植可能是通过与靶肌肉组织产生新生血管连接,不断分泌内源性雌激素,后者通过结合子宫、阴道和股骨组织中靶受体-雌激素受体,进而维持子宫和阴道等靶组织的形态与功能,并抑制骨质组织矿物质的丢失,从而达到改善或促进雌性大鼠内分泌功能的目的。

氨基酸螯合钙对去势大鼠骨质疏松症模型的影响

目的对本课题组合成的氨基酸螯合钙进行药效学评价,为进一步研发奠定基础。方法不同剂量的氨基酸螯合钙对去势大鼠进行30 d的治疗并使用阳性药复方氨基酸螯合胶囊和空白制剂作为对照。通过大鼠骨代谢生化指标和骨力学指标评价氨基酸螯合钙药效学。结果去势组大鼠子宫系数显著下降(P<0.01)。氨基酸螯合钙能够显著降低去势大鼠血中的碱性磷酸酶水平,提高血钙水平(P<0.05)。与模型对照组比较,氨基酸螯合钙组在增加股骨体积、股骨灰重、干重、股骨极限压应力和极限剪力方面存在显著性的差异(P<0.05)。结论本课题组合成的氨基酸螫合钙在改善去势大鼠骨质疏松方面具有一定的作用,为该制剂进一步研究和优化提供了实验依据。

祛膜颗粒在去势大鼠模型激素样活性的实验研究

目的初步研究祛膜颗粒在去势大鼠模型的激素样活性作用。方法制备去势大鼠动物模型,灌胃给予祛膜颗粒(5.5,11,22 g生药/kg)连续10 d后,观察各组大鼠阴道上皮角化细胞、子宫壁厚度、子宫水分摄取增加百分率的变化;采用化学发光法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平;采用免疫组化法观察子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的变化。结果祛膜颗粒能使去势大鼠阴道涂片出现角化细胞;祛膜颗粒(5.5,11 g生药/kg)子宫水分摄取增加百分率升高,其中祛膜颗粒(11 g生药/kg)明显升高(P<0.05);祛膜颗粒(5.5,11,22 g生药/kg)子宫壁厚度升高,其中祛膜颗粒(11 g生药/kg)明显升高(P<0.05)。祛膜颗粒(5.5和11 g生药/kg)能升高血清E2水平(P>0.05),祛膜颗粒(5.5,11和22 g生药/kg)能降低血清P水平(P>0.05);祛膜颗粒能增加子宫组织ER、PR的表达量。结论祛膜颗粒在一定剂量下可表现出较弱的雌激素样活性。

电针对去势大鼠雌激素及子宫内膜影响的研究

目的:从生殖内分泌的角度探讨电针治疗围绝经期综合征的作用机制。方法:以去势大鼠模型为实验对象,观察电针对去势大鼠子宫内膜厚度以及血清雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)的影响。结果:电针可使去势大鼠血清E2明显升高,LH及FSH有下降趋势,子宫内膜厚度明显升高,与模型组比较有显著性差异。结论:电针对去势大鼠的调节作用与性腺轴有关。

雌激素水平对大鼠实验性牙周炎模型的影响

目的研究雌激素水平对雌性大鼠实验性牙周炎模型牙周组织的影响。方法取雌性未孕SD大鼠33只,并随机分为假手术组(Sham组)、去势组(OVX组)和去势加雌激素组(OVX+E组),适应性喂养后对各组雌性大鼠行双侧卵巢切除术或假手术。OVX+E组术后每3天注射1次雌二醇(E2)。利用钢丝结扎右侧上颌磨牙的方法复制慢性牙周炎动物模型,左侧大鼠牙齿留作对照,不做处理。通过检测血清E2水平,观察临床表现和HE切片,比较牙周结扎术后第2、4、6周各组大鼠牙周炎的进展情况。结果随着时间的延长,OVX组的E2水平逐渐降低,Sham组和OVX+E组的E2水平基本维持不变。各组牙周探诊程度逐渐加深,OVX组较Sham组和OVX+E组牙周炎较重。结论雌激素水平的高低会影响牙周炎的病理发展过程,内源性雌激素的缺乏会加重大鼠牙周炎的程度。

电针对去势大鼠雌激素及子宫内膜影响的研究

目的:从生殖内分泌的角度探讨电针治疗围绝经期综合征的作用机制。方法:以去势大鼠模型为实验对象,观察电针对去势大鼠子宫内膜厚度以及血清雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)的影响。结果:电针可使去势大鼠血清E2明显升高,LH及FSH有下降趋势,子宫内膜厚度明显升高,与模型组比较有显著性差异。结论:电针对去势大鼠的调节作用与性腺轴有关。

补肾活血方对去势大鼠IL-6以及骨密度的影响

目的:观察补肾活血方对去势大鼠血清中IL-6和股骨近端骨密度的影响,为临床治疗绝经后骨质疏松症提供相关实验依据。方法:选取32只成年雌性SD大鼠按称重分层,并采用随机数字表法分为模型组、空白组、雌激素组、中药组4组,每组8只。采用摘除双侧卵巢(空白组不摘除)进行造模。于造模2个月后开始给药,中药组、雌激素组每天灌服配比好的药液1.5 mL(每1 mL分别含中药2.5 g、雌激素0.0112 mg)每日1次,模型组和空白组分别给予等体积生理盐水灌胃。各组均持续灌胃3个月。3个月后将各组大鼠处死。处死后通过酶联免疫法检测血清IL-6水平,采用双能x线检测大鼠右股骨近端骨密度。结果:与空白组比较,中药组、雌激素组、模型组大鼠的骨密度均有所下降(P﹤0.01),提示造模成功;雌激素组与中药组的大鼠骨密度均明显高于模型组(P﹤0.01);模型组血清IL-6水平与空白组比较,明显升高(P﹤0.01);中药组、雌激素组大鼠血清IL-6水平均明显低于模型组(P﹤0.01)。结论:补肾活血方可以降低去卵巢模型大鼠血清IL-6水平,骨密度的改变与血清IL-6水平的变化呈负相关。

壮骨胶囊抑制去势大鼠骨密度降低的作用

目的 探讨壮骨胶囊抑制去势雌性大鼠骨密度降低的效应及其作用机制.方法 分别以0.17、0.33和1.00 g/kg体重三种剂量的壮骨胶囊喂养去势雌性大鼠3个月,测定大鼠体重、股骨重量、股骨钙含量及骨密度等指标;同时以相同剂量的该壮骨胶囊对离乳大鼠进行钙吸收实验,测定大鼠体重、身长、粪钙和摄食量等指标,计算钙表观吸收率.结果 剂量为0.33和1.00g/kg组大鼠的股骨远心端和中点骨密度、股骨骨钙含量显著高于对照组大鼠;三种剂量的壮骨胶囊对离乳大鼠粪钙、摄入钙和钙表观吸收率与碳酸钙对照组相比亦均无显著性差异（P〉0.05）.结论 该壮骨胶囊可能通过补钙和调节骨代谢等途径抑制去势雌性大鼠的骨密度降低.

定坤丹口服液与传统工艺水蜜丸对雌性去势大鼠的作用及药效对比研究

目的:探讨定坤丹口服液与定坤丹水蜜丸对雌性去势大鼠模型的性激素调节作用,并对两种剂型的药效进行对比。方法:将雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(给予补佳乐0.12 mg/kg)、定坤丹水蜜丸组(给药剂量为1.75 g/kg)以及定坤丹口服液高、中、低剂量组(给药剂量分别为10、5、2.5 mL/kg)。除空白组外,其余大鼠采用手术去除双侧卵巢的方法建立去势大鼠模型,术后1周开始灌胃给药,每天灌胃1次,连续灌胃4周。给药期间观察大鼠一般状态;ELISA法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、孕酮(P)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))及前列腺素F2α(PGF2α)水平的变化情况;取全血放入促凝管中测定凝血功能;摘取子宫计算脏器系数,并通过HE染色法检测大鼠子宫的病理变化。结果:给药期间,与模型组相比,定坤丹口服液中剂量组大鼠体质量明显增加(P<0.01),与定坤丹水蜜丸组相比差异无统计学意义(P>0.05);子宫指数结果显示,与模型组相比,定坤丹口服液各剂量组、定坤丹水蜜丸组及阳性对照组大鼠子宫指数均较模型组显著升高(P<0.01);凝血功能结果显示,与模型组相比,定坤丹口服液高剂量组大鼠的PT值显著降低(P<0.05),定坤丹口服液高、中剂量组及定坤丹水蜜丸组大鼠的TT值较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05),定坤丹口服液与定坤丹水蜜丸组大鼠PT及TT值相比差异无统计学意义(P>0.05);ELISA结果显示,与模型组相比,定坤丹口服液各剂量组、定坤丹水蜜丸组大鼠血清P、E_(2)、PGE_(2)水平均不同程度升高,LH、FSH、PGF2α水平均不同程度降低(P<0.05或P<0.01),其中定坤丹口服液高剂量组大鼠PGE_(2)水平、中剂量组大鼠FSH的水平优于定坤丹水蜜丸组(P<0.01,P<0.05);病理检查结果显示,与模型组相比,各给药组大鼠子宫均有不同程度的萎缩,水蜜丸组及定坤丹口服液高剂量组大鼠子宫萎缩情况减轻,间质细胞排列密集,两者相比无统计学意义。结论:定坤丹口服液与定坤丹水蜜丸对去势大鼠模型均有显著的治疗作用,能升高大鼠血清P、E_(2)、PGE_(2)水平,降低LH、FSH、FGF2α水平,二者药效无明显差异。

血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡

背景:研究发现雌激素缺乏骨髓间充质干细胞的活性降低。目的:观察血管内皮祖细胞对去势骨髓间充质干细胞增殖及凋亡特性的影响。方法:1选用6周龄健康雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术,建立骨质疏松症动物模型,假手术组仅切除卵巢周围等量脂肪组织;2采用密度梯度离心结合差速贴壁法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞;采用密度梯度离心法结合差速贴壁法利用促进内皮细胞生长的条件培养基诱导培养血管内皮祖细胞;3利用Transwell小室建立血管内皮祖细胞、去势骨髓间充质干细胞间接共培养体系,另设置正常骨髓间充质干细胞-骨髓间充质干细胞组,去势骨髓间充质干细胞-骨髓间充质干细胞组;4采用流式细胞术检测血管内皮祖细胞对去势骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响。结果与结论:(1)间接共培养第3天,血管内皮祖细胞与去势骨髓间充质干细胞共培养组的S期细胞比例显著大于去势骨髓间充质干细胞组和正常骨髓间充质干细胞组,差异均有显著性意义(P<0.05);(2)间接共培养第10天,血管内皮祖细胞与去势骨髓间充质干细胞共培养组骨髓间充质干细胞凋亡率显著小于去势骨髓间充质干细胞组和正常骨髓间充质干细胞组,差异均有显著性意义(P<0.05);(3)通过血管内皮祖细胞和去势骨髓间充质干细胞间接共培养,发现血管内皮祖细胞可逆转体外去势骨髓间充质干细胞的增殖能力并且抑制其凋亡。

滋阴安神方对实验性更年期模型大鼠的影响

目的：观察滋阴安神方对实验性更年期模型大鼠及正常小鼠的影响,为滋阴安神方的临床应用提供实验依据。方法：采用摘除卵巢的方法建立更年期大鼠模型,随机分为更年期模型组、滋阴安神方高、中、低剂量（10,5,2.5 g·kg（-1））组、戊酸雌二醇（0.09 mg·kg（-1））组、更年安片（0.48 g·kg（-1））组,另设假手术组,每组12只。连续灌胃给药30 d,放射免疫法测定大鼠血浆促卵泡生成素（FSH）,黄体生成素（LH）,雌二醇（E2）,孕酮（P）含量,光镜下测量大鼠子宫内膜厚度。雌性ICR小鼠随机分为正常组、滋阴安神方高、中、低剂量（16.69,8.34,4.17 g·kg（-1））组和地西泮（0.001 g·kg（-1））组,每组12只。灌胃给药7 d,腹腔注射戊巴比妥钠（0.03 g·kg（-1））,记录翻正反射消失的小鼠数及入睡潜伏期。雌性ICR小鼠随机分为正常组、滋阴安神方高、中、低剂量（16.69,8.34,4.17 g·kg-1）组和百忧解（0.03 g·kg（-1））组,每组12只。灌胃给药7 d,进行悬尾实验,记录小鼠后4 min的累计不动时间。结果：与假手术组相比,模型组大鼠血浆FSH显著升高（P〈0.01）,E2明显降低（P〈0.05）,子宫内膜厚度显著下降（P〈0.01）;与模型组相比,滋阴安神方各组、戊酸雌二醇组及更年安片组大鼠血浆中E2水平及子宫内膜厚度都有一定程度升高,且滋阴安神方高、中剂量能降低血浆FSH水平。小鼠行为学实验中,滋阴安神方高剂量及地西泮可显著提高与阈下剂量戊巴比妥钠协同催眠小鼠的入睡率（P〈0.05,P〈0.01）;同时滋阴安神方低剂量及百忧解可显著缩短悬尾试验小鼠累计不动时间（P〈0.05,P〈0.01）。结论：滋阴安神方可提高更年期大鼠血浆E2水平,降低FSH水平,增加子宫内膜厚度,并具有一定的催眠及抗抑郁的作用。