体外循环术中血液灌流降低主动脉夹层术后急性肾损伤发生风险

目的探究急性主动脉夹层体外循环术中应用血液灌流器对患者术后急性肾损伤(AKI)发生风险的影响。方法纳入本院2022年7月至2022年10月被诊断为急性A型主动脉夹层并行孙氏手术治疗的患者,回顾性收集其基线资料、手术情况、各项临床生化数据及预后结果进行分析。结果共有57名患者被纳入研究,其中23名患者接受了血液灌流治疗。血液灌流组的AKI发生率显著低于无血液灌流组(43.5%vs.85.3%,P=0.001),特别是AKI 1~2级的发生(34.8%vs.61.8%,P=0.046)。且血液灌流组术后7 d肌酐最大值[121(82,218)μmol/L vs.174(112,220)μmol/L,P=0.216]和胱抑素C最大值[1.63(1.34,2.85)mg/L vs.2.58(1.68,4.23)mg/L,P<0.05]均低于无血液灌流组。血液灌流组术后3 d降钙素原最大值较无血液灌流组有下降[10.72(7.28,27.00)g/L vs.6.50(2.60,11.0)g/L,P=0.011]。血液灌流组血清中冷诱导RNA结合蛋白的浓度较无血液灌流组未显示出差异[987(664,1335)vs.993(741,1451)ng/L,P=0.733]。结论急性主动脉夹层手术术中联合血液灌流可减少术后AKI发生风险,尤其是1级和2级AKI的风险。

体循环肠灌流法研究红禾麻提取物在类风湿性关节炎大鼠与正常大鼠体内的肠吸收差异

比较红禾麻提取物在AA大鼠与正常大鼠体内的肠吸收差异。实验采用体循环肠灌流法,建立大鼠RA模型,应用UPLC-MS/MS检测肠灌流液中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、木犀草苷的含量,探究各成分在不同因素(pH值、药物浓度、肠段、胆汁和P-gp抑制剂)下的肠吸收特性。结果表明,槲皮苷的吸收方式为主动转运,其余7个成分的吸收方式为被动扩散。除绿原酸、隐绿原酸外,正常状态下各成分以回肠吸收最好,病理状态下以十二指肠吸收最好,推测药物吸收的特定部位会受疾病状态的影响而发生改变。各成分的吸收均受pH、胆汁和P-gp的影响,其中,槲皮苷可能是P-gp的底物。RA能影响红禾麻提取物在大鼠体内的肠吸收,其作用机制尚需进一步研究。

对大鼠在体肠单向灌流技术中重量法的评价

目的:评价重量法在大鼠在体肠单向灌流技术中的应用。方法:以长春西汀为模型药物,采用大鼠在体肠单向灌流技术,对重量法和酚红法计算的净水流量值(NWF)、药物吸收速率常数(Ka)和药物表观吸收系数(Papp)进行比较,并对重量法中收集液在密度修正前后的NWF和Papp值进行比较。结果:重量法计算所得的NWF值显著高于酚红法(P<0.05),前者计算所得的Ka和Papp值略高于后者(P>0.05);重量法能显著减少实验误差;对收集液密度进行修正可以进一步提高实验数据的准确性。结论:重量法可以作为大鼠单向灌流在体肠吸收实验中校正灌流液体积的有效方法,它避免了加入“标示物”给实验带来的一系列问题。

蒙脱石对大鼠肠、血管循环灌流液中肌酐的吸附作用

目的研究蒙脱石对血管灌流液中的肌酐向肠道扩散的促进作用和阻止肠灌流液中肌酐的吸收作用。方法大鼠肠道、血管分别用含80mg/L肌酐的血管灌流液和肠灌流液循环灌流,碱性苦味酸法测定肌酐水平。结果当血管用含肌酐的血管灌流液循环灌流、肠道用不含肌酐的肠道灌流液循环灌流时,血管灌流液中的肌酐水平逐渐下降,而肠道灌流液中的肌酐水平逐渐升高;同时在肠道中加入蒙脱石时,蒙脱石0.5g/kg和1.0g/kg组的血管灌流液和肠道灌流液中的肌酐水平均明显低于对照组(P<0.01)。当肠道用含肌酐的肠道灌流液循环灌流、血管用不含肌酐的血管灌流液循环灌流时,肠道灌流液中的肌酐水平逐渐下降,而血管灌流液中的肌酐水平逐渐升高;同时肠道中加入蒙脱石后,蒙脱石0.5g/kg和1.0g/kg组肠道灌流液和血管灌流液中肌酐水平明显低于对照组(P<0.01)。结论肌酐可从血管向肠道扩散,并可在肠道再吸收;蒙脱石能加速肌酐向肠道的扩散,减少肌酐在肠道的吸收。

大鼠在体单向肠灌流模型研究肉桂酸肠道吸收特性

目的研究肉桂酸在大鼠肠道的吸收部位和吸收机制,以及转运蛋白对肉桂酸肠道吸收的影响。方法建立在体单向肠灌流模型,采用HPLC法测定肉桂酸在肠道中的浓度变化,通过吸收速度常数(Ka)和表观吸收系数(Peff)来研究肉桂酸的吸收动力学特征。结果肉桂酸在各个肠段的Ka和Peff结果为十二指肠>空肠>回肠,十二指肠和空肠的Ka和Peff值显著性高于回肠(P<0.05),不同浓度肉桂酸在同一肠段的Ka和Peff值差异无统计学意义,加入MRP2抑制剂(吲哚美辛)后Ka和Peff值差异亦无统计学意义,但加入Pgp抑制剂(盐酸维拉帕米)后其值则显著性增加。结论十二指肠、空肠是肉桂酸吸收的主要部位,吸收机制为被动转运,肠道转运受Pgp转运蛋白的影响,但不受MRP2转运蛋白的影响。

离体大鼠肾脏灌流技术在发现和评价促尿酸排泄药物中的初步应用

目的为建立发现和评价促尿酸排泄药物作用的离体模型,采用离体大鼠肾脏灌流技术,观察尿酸在离体肾脏中排泄特点和丙磺舒对尿酸排泄影响。方法制备离体大鼠肾脏灌流模型,随机分为对照组和丙磺舒处理组,以含复方氨基酸和65g.L-1牛血清白蛋白的K-H灌流液循环灌流90min,定时收集导尿管流出液和灌流液,测定其中菊粉、钠、葡萄糖及尿酸含量,计算肾功能参数和尿酸排泄情况。结果离体灌流肾脏的肾小球滤过率,尿量,肾小管重吸收水、钠、葡萄糖百分率等肾功能参数在灌流的90min期间处于稳定的生理范围内;对照组灌流肾脏尿酸排泄分数、尿酸清除率及90min内总尿酸排泄量分别为30%、0.30ml.L-1和15μmol,与对照组比较,丙磺舒使离体肾脏尿酸排泄分别提高36%、54%和99%。结论离体大鼠肾脏灌流技术可用于发现和评价促尿酸排泄药物作用。

高渗盐液灌流对大鼠离体心脏功能的影响

目的 探讨不同浓度高渗盐液对心脏功能的影响。方法 采用大鼠离体灌流模型 ,用不同钠离子浓度的灌流液进行顺性灌注 2 0min ,随后再用等渗灌流液灌注 5min ,连续观察冠状动脉血流量、心率、心输出量 (CO)、动脉压及左心室功能等指标的变化 ,并测心脏含水率。结果 含 16 5mmol LNa+ 的灌流液可明显增加CO、改善心脏的收缩舒张功能 ;而用高于 2 15mmol LNa+ 的灌流液灌流时 ,最初有短暂但十分明显的心脏收缩舒张功能障碍 ,但 5～ 10min后恢复到正常水平以上 ;各组在由高渗灌流液换为等渗时心脏收缩舒张功能都非常显著的增强。结论 高渗盐液能直接作用于心脏 。

养阴清热活血中药对大鼠离体灌流颌下腺唾液分泌的作用

目的:中草药能通过增加唾液的分泌而缓解口腔干燥症状。本试验研究临床常用养阴清热中药促唾液分泌功能。方法:成年wistar大鼠用苯巴比妥钠麻醉后,外科分离颌下腺,转移至37℃恒温浴槽。使用蠕动泵(Cole-Palmer)进行灌流。氯化氨甲酰胆碱(CCh)对照灌流后,用缓冲液洗脱,后单独用含中药的缓冲液灌流及中药与CCh联合灌流,观察中药对颌下腺唾液分泌的影响。结果:养阴清热活血中药单独灌流,大多不能或仅能促进唾液少量分泌,而其灌流时加入CCh,则能明显促进唾液的分泌(唾液分泌曲线呈持续升高平台)。只有丹参在在不加入CCh的情况下也能促进唾液分泌。结论:养阴清热中药对离体颌下腺具有促分泌作用。中药促唾液分泌实验研究将为中药治疗口干症状及相关疾病的临床应用提供理论依据。

适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立

目的建立适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。方法选用Sprague-Dawley(SD)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1/3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendorff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只SD大鼠作为对照组。结果造模成功率为62.50%(10/16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30 min后可见病理性Q波;4周后Langendorff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVEDP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。结论通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendorff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。

肾上腺髓质素和肾上腺髓质素原N端20肽对大鼠离体灌流心脏功能的影响

目的 :研究肾上腺髓质素原 (proadrenomedullin ,proADM)的不同肽段 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin ,ADM )和肾上腺髓质素原N端 2 0肽 (proadrenomedullinN terminal 2 0 peptide ,PAMP)的心脏效应及可能机制。方法 :Langendorff装置灌流离体大鼠心脏 ,通过心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab多导生理记录仪 ,观察不同浓度的ADM和PAMP对左心室内压 (leftventricularpressure ,LVP)、左室内压变化速率 (leftventricularpressure(dp/dtmax)、冠状动脉 (冠脉 )流量 (coronaryfluid ,CF)和心率 (heartrate,HR)的影响 ,并检测灌流后心肌组织cAMP含量。结果 :ADM (1 0 -1 1 ～ 1 0 -8mol·L-1 )灌流呈浓度依赖地降低心脏LVP和±dp/dtmax ;PAMP也以浓度依赖的方式降低上述心功能的指标 ,且较相同浓度的ADM作用强。PAMP与ADM依次以不同浓度梯度联合应用 ,较各药单用对上述心功能指标的影响表现为低浓度 (1 0 -1 1 ～ 1 0 -1 0 mol·L-1 )时增强 ,而高浓度 (1 0 -9～ 1 0 -8mol·L-1 )削弱其心功能抑制效应。ADM和PAMP单独或联合应用时 ,冠脉流量均高于对照组水平。灌流液含有NO合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)抑制剂L NAME(Nω nitro L argininemethylester)时 ,ADM、PAMP或ADM联合PAMP灌流 ,其对LVP。

密闭式双联血液透析用体外循环管路在血液透析联合血液灌流治疗中的应用

目的探讨密闭式双联血液透析用体外循环管路在血液透析联合血液灌流治疗中的应用。方法选择解放军总医院2014年1月至2015年12月维持性血液透析患者60例,进行血液透析联合血液灌流治疗,随机分为对照组和试验组各30例,每例均行10次治疗,对照组采用常规的单根直管管路连接血液透析器与血液灌流器,试验组采用密闭式双联血液透析用体外循环管路连接血液透析器与血液灌流器。对比分析管路预冲、结束治疗的操作时间、管路凝血、管口暴露、血液滴洒等指标。结果与对照组比较,试验组管路预冲、结束治疗的操作时间、血液灌流器及透析器凝血发生率等明显较少,管口暴露及血液滴洒等发生明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用密闭式双联血液透析用体外循环管路进行血液透析联合血液灌流治疗优于常规管路,值得临床推广。

灌流流速决定慢性肝损伤大鼠的离体门脉压力

目的:建立灌流流速所决定的慢性各阶段肝损伤大鼠离体门脉压力方程.方法:常规观察CCl4慢性肝损伤第0、28、56、84天的肝脏系数与肝脏病,大鼠肝动脉、门脉和肝静脉插管,经肝动脉冲净残血,门脉灌流状态下游离肝脏;定量蠕动泵调节门脉灌流流速(μL/min),生物机能实验系统监测压力(mmHg),采用Prism-4非线型可变斜率回归由对数流速所决定的压力效能方程式,计算半效对数流速及其95%的可信区间.结果:在连续CCl4慢性肝损伤0、28、56、84天,由灌流数值流速(μL/min)决定的离体大鼠门脉灌流压力(mmHg)效能方程分别为y=-0.1428+1.1423/[1+10(13.805-3.84x)](r2=0.9996)、y=-0.1570+1.419/[1+10(4.666-1.27x)](r2=0.9958)、y=0.05106+0.96594/[1+10(10.877-2.958x)](r2=0.9987)和y=-0.09893+1.406/[1+10(4.3-1.158x)](r2=0.9989);半效对数流速(95%CI)分别为3.595(3.561-3.628)、3.674(3.285-4.064)、3.677(3.614-3.740)和3.713(3.449-3.977).结论:随着慢性肝损伤进展,离体门脉灌流流速所决定的压力方程具有不同系数和相同形式的特征,增高半效灌流流速可建立门脉舒张潜能低下的系统生物学门脉药效干模式.

禁食离体灌流鼠心对去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的反应

目的：研究禁食２４ｈ的离体鼠心对去甲肾上腺素（ＮＥ）和异丙肾上腺素（ＩＳＯ）的反应。方法：用每４ｍｉｎ含不同浓度的ＮＥ或ＩＳＯ的Ｋ－Ｈ液灌流进食和禁食离体鼠心。连续记录了左心室发展压（ＬＶＤＰ）和心率（ＨＲ）。结果：对ＩＳＯ和ＮＥ反应的量效曲线均右移。对ＩＳＯ反应的禁食鼠的ＥＣ５０高于进食鼠（禁食鼠１．００Ｅ－７．７１２±０．０４２６，进食鼠１．００Ｅ－８．２８±０．０５１５ｎ＝４，Ｐ＜０．００１）；对ＮＥ反应的心律失常发生率明显低于进食鼠（禁食鼠４６．８０±６．３４次／３２分，进食鼠８３．８０±１０．１８次／３２分，ｎ＝５，Ｐ＜０．０１）。对ＩＳＯ反应两组心律失常发生率无明显差异。结论：禁食鼠心对ＮＥ和ＩＳＯ的反应均受抑制。这对心肌有保护作用。

一过性离体大鼠肝脏灌流模型的建立

目的利用UP-100通用灌流仪建立了一过性离体大鼠肝脏灌流模型。方法用Krebs-Henseleit碳酸氢盐缓冲液进行一过性离体大鼠肝脏灌流,在灌流时长90 min内通过检测AST、ALT和LDH的浓度,观察肝脏外观及胆汁流量,测定肝重变化,进行组织切片观察组织病理变化来评估离体灌流肝脏的损伤程度。结果 90 min灌流时长中,肝脏颜色质地正常,胆汁流量均匀,相应转氨酶释放量少,病理切片结果正常。结论离体大鼠肝脏在UP-100通用灌流仪90 min灌流过程中能保持较好的组织结构和肝脏功能,可用于离体肝脏的药物代谢研究。

低浓度胶原酶原位循环灌流法用于原代大鼠肝细胞分离

目的:探索高效的原代大鼠肝细胞分离方法.方法:改进并建立低浓度胶原酶原位循环灌流法,比较肝细胞产量、存活率以及胶原酶用量等.结果:低浓度胶原酶原位循环灌流法肝细胞产量为1.584±0.525×108/100g大鼠体重,存活率达95.2±2.9%,肝细胞纯度＞95%,胶原酶用量减少为4.5 mg/100g大鼠体重.而非循环门脉灌流法肝细胞产量为0.508±0.456×108/100g大鼠体重,存活率为84±8%,胶原酶用量10mg/100g大鼠体重.结论:低浓度胶原酶原位循环灌流法为一经济、高效、实用的原代大鼠肝细胞分离技术.

离体灌流肾技术检测过氧亚硝基阴离子在大鼠缺血再灌注肾血管反应性损伤中的作用

目的探讨过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在大鼠缺血再灌注肾血管反应性损伤中的作用。方法应用离体灌流肾(isolated perfused k idney,IPK)技术观察肾缺血再灌注(ischem ia reperfusion,I-R)后肾血管对去甲肾上腺素(nor-ep inephrine,NE)和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)反应性的改变;观察应用氨基胍(am inoguan id ine,AG)阻断内源性NO生成对肾I-R大鼠IPK肾血管反应性的影响,以及给予外源性ONOO-后大鼠IPK肾血管反应性的改变。结果I-R后IPK肾血管对NE的缩血管反应性和对Ach的舒血管反应性都有明显降低,I-R5h较I-R1h进一步降低(均P<0.01)。ONOO-(40μmol.L-1)与veh ic le相比则显著降低IPK肾血管对NE和Ach的反应性(均P<0.01)。AG+I-R1h组大鼠IPK肾血管对NE和Ach的反应性与NS(生理盐水)+I-R1h组大鼠相比无显著差异(均P>0.05),AG+I-R5h组大鼠肾血管对NE和Ach的反应性较NS+I-R5h组明显增强(均P<0.05)。结论ONOO-在肾I-R所致的肾血管反应性损伤中具有重要的作用。

微循环灌流状态的在体研究

本文介绍采用国内外先进的显微高速动态分析装置,定性和定量地检测了毛细血管前括约肌的舒缩运动;细胞流变特性;细胞与微血管的相互作用和动态耦合关系。提示:微循环灌流状态取决于流质与流场的动态耦合关系,且具有复杂性和多变性。而所谓的“海涛式灌注”是不确切的。

盐酸普萘洛尔单向灌流法大鼠在体肠吸收的研究

目的研究盐酸普萘洛尔(PNH)的肠吸收情况,为制剂合理选择处方和临床药代动力学与药效学的深入研究奠定基础。方法采用大鼠单向灌流模型,引入了重量法来标示灌流液体积。考察药液浓度和pH值对肠吸收的影响。结果 PNH在全肠道均有良好的吸收,且吸收不受药物浓度和pH值的影响。结论可以考虑将PNH制成匀速释放的剂型。

普萘洛尔对映体在离体大鼠灌流肝脏中的药动学研究

临床上应用的普萘洛尔系外消旋体。动物试验表明，S(-)-普萘洛尔对β-受体的阻断作用比R(+)-普萘洛尔大100倍。有资料显示：普萘洛尔主要在肝脏代谢。健康志愿者口服dl-普萘洛尔(80mg)后，其S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值为1．38倍，但t1/120(基本相近。蒙古犬给予40mg的普萘洛尔，S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值仅为0．48，