论阿昔莫司对来曲唑诱发大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)伴胰岛素抵抗的改善作用机制研究

探究阿昔莫司对大鼠多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)的改善作用及机制。方法:通过来曲唑合并高脂饲喂建立SD大鼠PCOS-IR模型。分为3组,每组5只。对照组:给予0.9%生理盐水,常规喂养。PCOS-IR组:大鼠予0.9%生理盐水和高脂饮食。阿昔莫司组:建模后的每只大鼠给予阿昔莫司32mg/kg/d灌胃给药,期间给予等量0.9%生理盐水和高脂饮食,均连续四周。结果:模型组(PCOS-IR)较对照组体重升高且差异显著,阿昔莫司组较模型组体重有所下降但无明显差异而相对于对照组体重仍显著升高。对照组卵泡大小形态正常,PCOS-IR组大鼠卵巢存在多囊样变,卵泡数减少,内膜腺体和腺上皮细胞数目增多,阿昔莫司组则有所缓解且趋于正常。血清T值PCOS-IR组较对照组明显升高且差异十分显著;阿昔莫司组相较另外两组均有下降且均值居于二者之间,差异显著。血清LH值PCOS-IR组较对照组明显升高且差异显著;阿昔莫司组较PCOS-IR组下降不明显,与对照组相比下降显著差异。PCOS-IR组FSH值较对照组明显下降显著差异,阿昔莫司组相较PCOS-IR组有所回升显著差异趋于正常。LH/FSH比值 PCOS-IR组较对照组上升显著,而阿昔莫司组则下降差异明显。结论:阿昔莫司对来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗有较好改善作用。

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达

背景:有研究表明,卵泡发育、成熟、排卵和黄体形成以及退化等卵巢的生理过程都涉及细胞外基质的形成,而基质金属蛋白酶9和结缔组织生长因子与细胞外基质的形成有着密切的关系。目的:探讨卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达与多囊卵巢综合征的关系。方法:将有规律动情周期的SD雌性大鼠随机分为2组,模型组大鼠采用来曲唑灌胃建立多囊卵巢综合征模型,对照组灌胃等量的羧甲基纤维素。当模型组大鼠动情周期固有规律不存在,连续出现间期时采集大鼠的血清和卵巢组织,对照组在其间期采集标本进行检测。结果与结论:放射免疫分析法和免疫组织化学染色法检测显示,与对照组相比,模型组的血清促黄体生成激素、血清垂体泌乳素、窦前卵泡卵泡膜胞浆中的结缔组织生长因子、卵泡基底膜胞浆结缔组织生长因子、白膜结缔组织生长因子以及黄体中基质金属蛋白酶9表达量明显升高(P<0.05),促卵泡激素、血清雌二醇和卵泡基底膜中的基质金属蛋白酶9表达量则明显降低(P<0.05)。结果证实,结缔组织生长因子可能与多囊卵巢综合征中可能与小卵泡的过多生长和排卵障碍有关,基质金属蛋白酶9可能与多囊卵巢综合征中的排卵障碍有关。

补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢形态及性激素的影响

目的通过观察补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征模型大鼠的性激素、抗苗勒氏管激素(antiMüllerian hormone,AMH)、卵巢形态的影响,探讨补肾促排卵汤治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的作用机制。方法应用补肾促排卵汤作用于以脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,对卵巢进行形态学分析并检测血清性激素、AMH。结果与正常组相比,模型组大鼠卵巢弥漫性囊性重度扩张,可见大小不等的囊腔,粒层细胞被挤压呈扁平或立方形,黄体及各种发育阶段卵泡稀少。补肾促排卵汤能明显改善PCOS模型大鼠成熟卵泡个数、黄体个数、性激素及AMH水平,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补肾促排卵汤能改善PCOS模型大鼠血清性激素水平、降低血清AMH及恢复卵巢排卵功能,从而达到治疗多囊卵巢综合征的作用。

黄芪多糖调控Sirt1/FoxO1通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的研究

目的探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1(Sirt1/FoxO1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的影响。方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,且CCK8检测APS对卵巢颗粒细胞增殖的影响。10-5mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞24 h诱导PCOS大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中Sirt1、Fox O1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示,FSHR蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量93.18%>90%,可进行接下来实验。0、100、200、400μg/mL APS处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁0、24 h比较,细胞OD450差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100μg/mL APS组与模型组细胞结构类似,随着APS剂量的升高,自噬小体数量减少,在400μg/m L APS组时细胞正常。正常组、模型组、100、200、400μg/mL APS组在细胞贴壁0 h时,细胞OD450差异无统计学意义(P>0.05)。细胞贴壁24 h,与正常组相比,模型组细胞OD450降低(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平升高(P<0.05);与模型组相比,100、200、400μg/mL APS组细胞OD450升高(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平降低(P<0.05)。结论APS可以抑制PCOS大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路Sirt1/FoxO1实现的。

益肾导痰调冲汤对多囊卵巢综合征大鼠性激素影响的实验研究

目的:观察益肾导痰调冲汤对多囊卵巢大鼠性激素的影响,并探讨其作用机制。方法:采用丙酸睾丸酮(T)+人绒毛膜促性腺激素(HCG),建立多囊卵巢综合征的动物模型。通过阴道涂片观察发情周期,并测体重,放射免疫法测血睾酮(T)、雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)。结果:本方能维持动情周期、降低PCOS大鼠体重、降低PCOS大鼠T、LH及LH/FSH。结论:采用丙酸睾丸酮+人绒毛膜促性腺激素(T+HCG)联合造模,能够成功制作多囊卵巢大鼠模型,更符合人PCOS典型改变;益肾导痰调冲汤能够改善PCOS大鼠性激素水平,并减轻体重,对多囊卵巢大鼠一定程度上具有恢复排卵作用。

滋肾化瘀祛痰汤对多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗相关性的影响研究

目的:观察滋肾化瘀祛痰汤对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗相关性的影响并分析其可能的作用机制。方法:规律发情周期SD雌性大鼠50只,应用人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合胰岛素(INS)造模法制作动物模型,随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、滋肾化瘀祛痰汤组和益肾导痰调冲汤组。运用放免法测定血清性激素水平的变化,光镜观察卵巢组织形态学改变,免疫组化法检测卵巢组织INR和IGF-1R表达水平。结果:滋肾化瘀祛痰汤能使PCOS大鼠卵巢囊状卵泡减少,颗粒细胞形态恢复完整、排列整齐,卵泡膜细胞层变厚,黄体组织增多;血清T、FSH、LH、INS水平明显下降(P<0.05),并下调卵巢组织IGF-1R,增高INR表达。结论:滋肾化瘀祛痰汤通过调整内分泌及影响IGF-1R及INR的表达,改善PCOS大鼠的高胰岛素血症和胰岛素抵抗,促进卵泡的发育成熟及排卵。

胰岛素增敏剂对PCOS大鼠子宫内膜胰岛素受体底物表达的影响

目的探讨胰岛素增敏剂二甲双胍对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜胰岛素受体底物(IRS)1、2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响。方法 Poretsky法建立PCOS大鼠模型,随机分为二甲双胍组和模型对照组,每组20只。空白对照组清洁级SD大鼠10只。采用免疫组织化学方法测定IRS-1和IRS-2蛋白在子宫内膜的表达及酪氨酸磷酸化程度。结果 3组大鼠子宫内膜腺上皮细胞均见IRS-1、IRS-2及酪氨酸磷酸化的表达。模型对照组子宫内膜腺上皮IRS-1、IRS-2、P-tyr(IRS-1)、P-tyr(IRS-2)表达水平明显低于空白对照组(P<0.01),二甲双胍组IRS-1、IRS-2、P-tyr(IRS-1)、P-tyr(IRS-2)表达水平显著高于模型对照组(P<0.01),低于空白对照组(P<0.05)。结论IRS-1和IRS-2蛋白在PCOS大鼠子宫内膜表达及酪氨酸磷酸化异常与胰岛素抵抗有关;胰岛素增敏剂二甲双胍可通过增加IRS-1和IRS-2蛋白的表达水平,提高酪氨酸磷酸化程度,部分改善PCOS大鼠子宫内膜胰岛素抵抗。