神经干细胞和神经生长因子联合移植对大脑中动脉阻塞大鼠的影响

目的将神经干细胞(NSCs)移植和神经生长因子(NGF)单独及联合应用于大脑中动脉阻塞(MCAo)模型大鼠,观察NGF和NSCs移植对大鼠缺血性脑卒中神经功能恢复的作用及NGF对自体和移植NSCs的影响。方法体外分离、培养新生大鼠海马NSCs,BrdU标记。实验动物随机分为A组(MCAo组)、B组(MCAo+NGF组)、C组(MCAo+NSCs组)及D组(MCAo+NGF+NSCs组),每组16只,移植后进行神经功能损害评分(NSS),用免疫组化行BrdU、槽蛋白检测,分析结果。结果移植后的2周、4周神经功能评分显示D组显著好于其他3组(P<0.05),B组与C组显著好于A组(P<0.05)。B组的槽蛋白及BrdU阳性细胞数显著多于A组(P<0.05),D组的BrdU阳性细胞数显著多于C组(P<0.05)。结论NSCs移植和NGF单独及联合应用对MCAo大鼠的神经功能恢复均有作用,二者联合具有协同作用。NGF对自体NSCs的激活、增殖有促进作用,对移植NSCs的增殖有促进作用。

大鼠永久性大脑中动脉阻塞模型的建立

目的建立稳定可靠的线栓法大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)永久性脑缺血模型。方法对Koizumi和ZeaLonga模型构建方法加以改进。40只雄性SD大鼠随机均分为实验组和假手术组,分别进行模型制作和模型缺血的评价,采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色来计算大鼠脑梗死体积。结果大鼠MCAO模型制作成功率为95%;神经功能缺失评分1～3级百分率为95%。结论实验所采用的改良术式构建大鼠MCAO模型具有稳定性好、可重复率高、操作简便和手术时间短等优点,为基于大鼠永久性脑缺血模型开展的下游相关实验提供了良好的研究平台。

益气活血风静胶囊对大鼠及家兔血液流变学的影响

目的:研究益气活血风静胶囊对大鼠及家兔的血液流变学的影响。方法:采用SD大鼠及家兔分别灌胃给药14 d及10 d,检测SD大鼠及家兔血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)及血小板聚集率。另采用SD大鼠,大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠造模后灌胃给药5 d,检测MCAO大鼠PT、APTT、TT、FIB及脑组织含水量。结果:与空白组比较,益气活血风静胶囊高、中剂量组及阳性对照组,能显著延长大鼠血浆的PT、TT、APTT(P<0.05),并能显著降低FIB的含量(P<0.05或P<0.01),显著降低以二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板聚集率(P<0.05)。与空白组比较,益气活血风静胶囊高、中、低剂量组及阳性对照组能显著延长家兔血浆的PT、TT、APTT(P<0.05或P<0.01),并能显著降低FIB的含量(P<0.01),显著降低以ADP诱导的大鼠血小板聚集率(P<0.05或P<0.01)。MACO大鼠模型组给药后,与假手术组比较,模型组大鼠PT、APTT、TT明显缩短(P<0.05),FIB含量升高(P<0.05),脑组织含水量明显增加(P<0.01);与模型组比较,益气活血风静组和人参有效部位组能延长大鼠血浆PT、APTT、TT时间(P<0.05或P<0.01),降低纤维蛋白原的含量(P<0.01),显著降低模型大鼠脑组织含水量(P<0.05),牡丹皮有效部位组大鼠TT延长(P<0.05),降低纤维蛋白原的含量(P<0.01),显著降低模型大鼠脑组织含水量(P<0.05)。结论:益气活血风静胶囊具有显著的抗凝血以及抑制以ADP诱导的血小板聚集的作用,并对MCAO大鼠有较好的活血作用。

1.5T磁共振成像可有效监测缺血性脑卒中大鼠模型不同时期的颅脑病变动态

目的评估临床医用1.5T磁共振成像技术在不同时间点(6 h、3 d、5 d、7 d、14 d)对急性缺血性脑卒中大鼠模型颅脑病变成像的可行性及其影像学特征变化。方法随机选择健康雄性SD大鼠10只(10~12周龄),通过线拴法建立永久性SD大鼠的大脑中动脉阻塞模型,使用医用1.5T MR成像仪在不同时间点(6 h、3 d、5 d、7 d、14 d)对大脑中动脉阻塞模型大鼠进行T1WI、T2WI、T2 FLAIR、DWI成像扫描,观察不同分期梗死大鼠脑磁共振图像形态及信号强度变化。结果1.5T MR成像仪所作DWI图像可以用于诊断大鼠超急性期脑梗死,并直观表现梗死程度和范围;模型鼠脑梗死病灶在不同分期呈现不同的影像学改变,随着时期进展,常规核磁序列呈现的大鼠梗死病灶信号强度及病灶形态有所改变。结论临床医用1.5T磁共振成像技术能够有效监测不同时间点缺血性脑卒中大鼠模型的颅脑病变动态变化,特别是DWI序列在超急性期梗死诊断中表现出色,为进一步的临床研究和治疗决策提供了有价值的影像学依据。

天麻醇提物减轻不同时间点脑缺血再灌注模型大鼠出血转化的研究

目的:探究天麻醇提物降低短暂性大脑中动脉阻塞(tMCAO)模型大鼠出血转化(HT)的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型tMCAO 3 h-HT组、模型tMCAO 6 h-HT组、天麻tMCAO 3 h-HT组及天麻tMCAO 6 h-HT组,天麻组大鼠于术前连续7 d灌胃天麻醇提物(843.75 mg/kg,10 ml/kg),其余各组给予相同体积溶媒。采用线栓法建立大鼠tMCAO模型,分别于缺血后3 h、6 h拔出线栓建立tMCAO 3 h-HT、tMCAO 6 h-HT模型。术后48 h检测脑组织HT发生率、出血量评分、血红蛋白含量、死亡率及脑组织微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达。结果:(1)与模型组比较,天麻组大鼠的死亡率及HT的发生率有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);(2)与模型组比较,天麻醇提物能显著降低tMCAO 3 h-HT、tMCAO 6 h-HT模型大鼠脑组织的出血量评分(P<0.05,P<0.01),并降低tMCAO 3 h-HT模型大鼠的血红蛋白含量(P<0.05);(3)与模型组比较,天麻醇提物可缩小tMCAO 6 h-HT模型大鼠缺血中心区的面积(P<0.05),并增大缺血半暗带区的面积(P<0.05)。结论:天麻醇提物预防性给药7 d后可减少tMCAO大鼠HT,还可能具有延长溶栓时间窗的潜在作用。