醋制降低京大戟对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6毒性研究

目的:比较京大戟醋制前后对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6的毒性差异,初步探讨京大戟醋制减毒机制。方法:以大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,采用MTT法检测京大戟醋制前后对IEC-6细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察醋制前后对细胞形态的影响;采用高内涵细胞成像系统(HCS)分析醋制降低肠细胞线粒体凋亡通路。结果:与阴性对照组比较,增殖抑制实验显示京大戟生品具有较强的肠细胞毒性(P<0.01),HCS分析结果显示京大戟可显著降低细胞核Hoechst荧光强度、线粒体膜电位荧光强度(P<0.05,P<0.01),并显著增加Annexin V-FITC和PI荧光强度、细胞膜通透性荧光强度(P<0.01,P<0.01,P<0.01);醋制后与京大戟生品各剂量组比较,京大戟醋品可显著降低京大戟生品对肠细胞的增殖抑制作用,增加细胞核Hoechst荧光强度、线粒体膜电位荧光强度(P<0.05,P<0.05),降低Annexin V-FITC和PI荧光强度、细胞膜通透性荧光强度(P<0.01,P<0.01,P<0.05),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低京大戟对肠细胞的毒性,其可能机制为通过降低京大戟对IEC-6细胞膜通透性,从而为进一步阐明京大戟醋制减毒机制提供了一定的依据。

放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究

研究目的：9402号是以烟酰胺为母体化合物合成的烟酰氨基酸类化合物，其放射增敏作用比母体化合物烟酰胺效果更好，而且毒性更低。为了观察9402号对正常组织是否有增敏作用，我们研究了9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏作用。材料与方法：实验动物：昆明种小鼠，由中国医学科学院实验动物研究所提供，体重18-22g。许可证号：SCXK京2004—0001。药物：9402号药（N-烟酰基-L-天门冬氨酸），为白色块状晶体，含量大于99％，熔点182～191℃。由中国医学科学院放射医学研究所药物室合成。照射条件：60Coγ射线，全身照射，剂量率81．79cGy／min。给药及实验分组：实验分为单纯照射组，加药照射组和正常对照组。

角质细胞生长因子联合低氧诱导因子1α对低氧应激大鼠小肠隐窝上皮细胞的保护作用及其机制

目的探讨角质细胞生长因子(KGF)联合低氧诱导因子1α(HIF-1α)对低氧应激大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)的保护作用及其机制。方法(1)取常规培养大鼠IEC-6细胞,根据随机数字表法分为常氧空白组、常氧KGF组、常氧HIF-1α组和常氧联合组,分别更换DMEM培养基、含0.5ng/mLKGF培养基、含10.0ng/mLHIF-1α培养基及同时含0.5ng/mLKGF和30.0ng/mLHIF-1α培养基,放入氧气体积分数为21%的细胞培养箱培养24h。(2)另取常规培养大鼠IEC-6细胞,根据随机数字表法分为常氧对照组、低氧对照组、低氧KGF组、低氧HIF-1α组及低氧联合组。常氧对照组细胞更换DMEM培养基,并常规培养24h;低氧对照组、低氧KGF组、低氧HIF-1α组及低氧联合组细胞分别更换DMEM培养基、含0.5ng/mLKGF培养基、含10.0ng/mLHIF-1α培养基及同时含0.5ng/mLKGF和30.0ng/mLHIF-1α培养基,并置于氧气体积分数为5%的三气培养箱中低氧培养24h。取常氧及低氧处理各组细胞,样本数为3,光学显微镜下观察细胞形态学变化。取常氧及低氧处理各组细胞,样本数为3,细胞计数试剂盒8检测细胞存活率。取常氧对照及低氧处理各组细胞,样本数为3,流式细胞仪检测细胞周期变化及凋亡水平,紫外分光光度计和蛋白质印迹法分别检测细胞ATP含量和p53蛋白表达水平。对数据行单因素方差分析及LSD检验。结果(1)培养24h后,常氧处理各组细胞均生长良好,细胞呈圆形或椭圆形,胞质清晰;低氧处理各组细胞均出现梭形、星形等不规则形态,胞质有黑色颗粒沉着。(2)培养24h后,常氧空白组、常氧KGF组、常氧HIF-1α组及常氧联合组细胞存活率分别为(107.4±8.7)%、(109.8±2.9)%、(115.8±7.4)%、(112.8±10.6)%,组间总体比较,差异无统计学意义(F=0.685,P=0.586)。培养24h后,低氧对照组、低氧KGF组、低氧HIF-1α组及低氧联合组细胞存活率分别为(35.1±4.6)%、(52.9±6.8)%、(56.2±3.1)%、(71.2±9.6)%,均显著低于常氧对照组的(106.3±12.3)%,P<0.001。低氧KGF组、低氧HIF-1α组及低氧联合组细胞存活率均明显高于低氧对照组(P=0.023、0.009、<0.001),低氧联合组细胞存活率明显高于低氧KGF组和低氧HIF-1α组(P=0.017、0.045)。(3)培养24h后,低氧对照组G1期细胞百分比显著高于常氧对照组(P=0.030),低氧对照组、低氧KGF组、低氧HIF-1α组S期细胞百分比显著低于常氧对照组(P=0.020、0.031、0.026),其余各组各期细胞百分比与常氧对照组相近(P=0.516、0.107、0.052、0.985、0.637、0.465、0.314、0.591)。培养24h后,低氧对照组、低氧KGF组及低氧HIF-1α组G1期细胞百分比明显高于低氧联合组(P=0.001、0.030、0.014),且S期细胞百分比显著低于低氧联合组(P=0.001、0.012、0.010)。(4)培养24h后,与常氧对照组比较,低氧对照组细胞凋亡率明显升高(P=0.018),低氧联合组细胞凋亡率明显降低(P=0.008)。培养24h后,与低氧对照组比较,低氧KGF组和低氧联合组细胞凋亡率明显降低(P=0.004、0.001);低氧联合组细胞凋亡率明显低于低氧KGF组和低氧HIF-1α组(P=0.032、0.002)。(5)培养24h后,与常氧对照组比较,低氧联合组细胞ATP含量无明显变化(P=0.209),其余各组细胞ATP含量均明显降低(P=<0.001、0.001、0.002);与低氧对照组比较,低氧HIF-1α组和低氧联合组细胞ATP含量明显升高(P=0.044、0.001);低氧联合组细胞ATP含量明显高于低氧KGF组和低氧HIF-1α组(P=0.011、0.020)。(6)培养24h后,与常氧对照组比较,低氧对照组、低氧KGF组、低氧HIF-1α组细胞p53蛋白表达量明显升高(P<0.001),低氧联合组细胞p53蛋白表达量显著低于低氧对照组、低氧KGF组和低氧HIF-1α组(P=0.001、0.001、0.002)。结论KGF联合HIF-1α对低氧应激大鼠IEC-6细胞具有显著的保护作用,可通过降低其细胞周期阻滞程度及凋亡水平,提高细胞的能量代谢水平,从而促进低氧环境下细胞的存活。

生长因子TGFβ3对小鼠小肠隐窝细胞增殖的抑制

转移生长因子ＴＧＦβ３是一种多功能调节剂，不同的给药剂量、给药次数及其间隔时间以及给药后的测定时间等均影响它对细胞增殖调控的能力。当重复给予ＴＧＦβ３，它对正常小鼠及８Ｇｙγ射线全身照射小鼠小肠隐窝底部的上皮细胞的增殖均起抑制作用，且随着给药次数的增多，ＴＧＦβ３对肠隐窝干细胞的抑制作用逐渐增强，提示它是干细胞生长的负调节因子。

发酵奶对二甲基肼诱发小鼠大肠隐窝上皮细胞微核和凋谢的影响

近交系C_(57)BL小鼠分别饮用发酵奶、牛奶和自来水。7天后给各组小鼠腹腔注射二甲基肼。24h后处死动物,取大肠固定,按卷帘法石蜡包埋,切片油镜观察20个纵切完整的隐窝,计数上皮细胞中出现微核和凋谢率。经统计学处理,发酵奶组的微核和凋谢率明显低于饮水和饮牛奶组。结果提示Shahani菌株发酵奶能明显抑制二甲基肼对小鼠大肠隐窝上皮细胞的诱变作用。

CpG-ODN对辐射所致人小肠隐窝上皮细胞微核形成的影响

研究了CpG-ODN(CpG oligonucleotides)对非免疫细胞人小肠隐窝上皮细胞(HIEC)照射后微核变化的影响。采用MTT法检测不同浓度的CpG-ODN对HIEC的细胞毒性,检测CpG-ODN预处理后的HIEC细胞在不同剂量辐射后微核率和微核细胞率的变化。结果表明,CpG-ODN在0.00-1.25μmol/L浓度范围内对细胞的存活率没有显著影响,CpG-ODN能显著降低微核率和微核细胞率。实验结果提示CpG-ODN对HIEC有较小的毒性且能减少细胞辐照后的微核形成,具有一定的辐射保护作用。

大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响

分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究了 0、0 1、0 5、1和 5μg·mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响, 并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化。结果显示: 100ng·mL-1的大豆异黄酮 (大豆黄酮、染料木素 ) 能够提高该细胞3H TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性, 提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性; 0 1和 0 5ng·mL-1的大豆黄酮和 0 5和 1 0ng·mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用, 而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响。

大鼠小肠上皮细胞培养体系的建立及其影响因素的探讨

作者引进并建立了大鼠小肠上皮细胞（ＩＥＣ－６）的培养传代和活性检测的实验方法，且对几种影响因素进行了探讨，实验发现，ＩＥＣ－６在一定密度范围内与＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量呈正相关变化；培养７２ｈ以内，参入量随时间延长而增加，＾３Ｈ－ＴｄＲ，５５．５Ｋｂｑ／孔内，计数值与剂量间呈线性关系，胎牛血清浓度以１０％为宜，但不加胰岛素组显著降低，ｐＨ值以７．２６最好，ＩＥＣ－６在４～２６Ｇｙ照射范围内。

七味白术散对人类轮状病毒感染乳鼠小肠黏膜上皮细胞的保护作用

目的探讨七味白术散对人类轮状病毒(HRV)感染乳鼠小肠黏膜上皮细胞的保护作用。方法 5日龄NIH乳鼠经口感染HRV建立乳鼠腹泻模型,随机分为4组:正常组、模型组、七味白术散组、病毒唑组,各组乳鼠分别经口滴入相对应的治疗药物,3次/d(正常化与模型组给生理盐水)。分别于治疗后5d处死乳鼠,取乳鼠小肠粪便检测HRV,HE染色观察小肠黏膜病理变化。结果七味白术散治疗5d乳鼠肠粪便中HRV清除率明显优于模型组(P<0.05);七味白术散组乳鼠小肠黏膜上皮细胞病变明显减轻,与模型组、病毒唑组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论七味白术散能清除感染乳鼠肠道中的HRV,明显改善HRV感染乳鼠小肠黏膜上皮细胞病变。

延迟复苏对烫伤大鼠小肠上皮细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 :探讨延迟复苏对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡百分率 (ap % )及凋亡相关基因表达的影响。方法 :Wistar大鼠 30只 ,随机分为立即复苏组 (ER)和延迟复苏组 (DR) ;30 %体表面积Ш度烫伤 ,采用DNA片段百分率测定、电泳和RT -PCR法观察伤后小肠粘膜上皮细胞ap %和ICE、bcl- 2基因表达。结果 :大鼠烫伤后小肠上皮ap %显著高于伤前 (P <0 .0 1) ;DR组肠上皮ap %显著高于ER组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。DNA电泳可见明确梯形条带。烫伤后肠上皮ICE基因表达明显增强 ,DR组ICE基因表达显著高于ER组 (P <0 .0 1)。Bcl- 2基因伤前在肠粘膜不表达 ,伤后极弱表达 ,两组比较无显著性差异。结论 :烫伤延迟复苏后小肠上皮凋亡显著增加 ;促凋亡基因ICE和抑凋亡基因bcl-

彩色多普勒超声对胎鼠小肠上皮细胞凋亡影响的实验研究

目的 :探讨彩色多普勒超声对胎鼠小肠粘膜上皮细胞是否构成影响。方法 :2 4只孕 14天SD大鼠按彩超辐照时间不同随机等分为四组 :Ⅰ组 (对照组 ) ,Ⅱ组 (照射 10min组 ) ,Ⅲ组 (照射 2 0min组 ) ,Ⅳ组 (照射 30min组 )。仪器采用Accuson公司Sequeoia 5 12型彩色电脑声像仪 ,照射条件 :4V1探头 ,二维频率H3.0MHz ,彩色频率 3.0MHz,Tis=1.8,Micd =1.6。照射后 2 4h取胎鼠小肠标本 ,HE染色光镜观察 ,TUNEL法检测凋亡细胞 ,透射电镜观察超微结构的变化。结果 :各组光镜下观察均未见异常 ,TUNEL法检测结果 ,Ⅰ组及Ⅱ组胎鼠小肠上皮可见散在凋亡细胞 ,Ⅲ组及Ⅳ组凋亡细胞明显增多。Ⅲ组及Ⅳ组荧光强度与Ⅰ组有显著差异 (ⅢvsIP <0 .0 5 ,IVvsIP <0 .0 1) ,荧光强度与照射时间呈正相关 (P <0 0 1) ,(r=0 .5 71)。Ⅳ组标本电镜检查发现核染色质浓缩边集 ,内质网及线粒体肿胀等超微结构变化。结论 :彩色多普勒超声照射孕鼠 2 0min以上可引起胎鼠小肠粘膜上皮细胞凋亡。

硫芥诱导大鼠小肠上皮细胞凋亡的研究

目的 :观察硫芥对大鼠小肠上皮细胞 (IEC- 6 )生长的影响及其引起的细胞死亡方式。 方法 :利用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳定性观察硫芥中毒的 IEC- 6细胞形态变化及 DNA的改变。采用 Cell Death Detection EL ISA试剂盒研究 IEC-6细胞凋亡量与硫芥浓度之间的关系。 结果 :0 .1～ 10 0 0μm ol/ L硫芥对 IEC- 6细胞的毒性作用与硫芥的浓度和作用时间呈正相关。电镜观察到细胞凋亡的形态学改变 :细胞膜完整 ,染色质固缩并聚集于核膜边缘 ,凋亡小体形成 ;DNA电泳有“DNAL adder”出现。 0 .1～ 10 0μmol/ L硫芥处理的细胞的凋亡量随硫芥浓度的升高而增加 ,超过 10 0μmol/ L测凋亡量反降低。 结论 :硫芥可诱导大鼠小肠上皮 IEC- 6细胞凋亡 ,在低浓度时以凋亡为主 ,高浓度时则出现坏死。

不同发育阶段大鼠小肠上皮细胞c-jun、p38基因表达的特征及其与肠损伤修复的关系

目的 :研究原癌基因 c jun及其相关基因 p38在不同发育阶段大鼠小肠上皮细胞的表达分布特征 ,探讨 c jun和 p38基因在小肠创伤修复时可能发挥的生理学作用。方法 :利用超敏的链霉卵白素 (SP)免疫组织化学方法 ,观察 c jun和 p38基因在胚胎、新生及成年各时间段 Wistar大鼠小肠上皮细胞的阳性表达与分布特征。同时以细胞增殖活性的标志增殖细胞核抗原 (PCNA )表达为参照 ,对不同时期细胞的增殖分化状况作对比研究。结果 :在胚胎第 17d(E17d)、E19d及新生期第 1d(P1d)、P2 d、P7d、P14 d和 P2 8d,小肠上皮细胞c jun基因的阳性表达范围广泛 ,并且随着肠绒毛细胞的发育成熟 ,其分布从绒毛及间隙转移至绒毛上部细胞 ;在此期间 ,PCNA阳性细胞主要分布于新生绒毛底部、绒毛间隙、隐窝内的细胞 ;到成年期大鼠 ,c jun基因的表达主要在小肠绒毛顶部 ,而 PCNA阳性细胞也只局限在小肠隐窝。从 E17d至成年期 ,p38的阳性表达主要集中在绒毛间隙和陷窝内核分裂细胞。结论 :在小肠发育的早期 ,原癌基因 c jun在特定位置的高度表达 ,可能与细胞的快速分化有关 ;而其相关基因 p38的表达可能与细胞有丝分裂存在着一定的内在联系。

去卵巢大鼠第四脑室外侧隐窝室管膜细胞的形态学变化

目的：观察卵巢切除后雌性大鼠第四脑室外侧隐窝室管膜的形态学变化。方法：雌性大鼠随机分为正常对照组、假手术组和卵巢切除后15d组，用H-E染色和扫描电镜观察第四脑室外侧隐窝室管膜细胞的形态学变化。结果：H-E染色显示雌性大鼠第四脑室外侧隐窝腹侧部室管膜细胞数目在卵巢切除后15d组高于正常对照组和假手术组，差异有统计学意义。在卵巢切除后15d组的室管膜细胞表面可见一层淡染的絮状结构，其他两组不明显。扫描电镜观察显示，正常对照组和假手术组第四脑室外侧隐窝部位可见散在的分泌颗粒，卵巢切除后15d组在该处观察到大量分泌颗粒和淤泥样分泌物。结论：卵巢切除后大鼠第四脑室外侧隐窝室管细胞数目增多，分泌功能增强，这些改变可能与雌激素水平降低有关。

附子理中丸对脾阳虚大鼠小肠上皮细胞CREB、Sirt1、UCP2表达和ATP合成的影响

目的探讨附子理中丸对脾阳虚证大鼠小肠上皮细胞CREB、Sirt1、UCP2表达和ATP合成的影响。方法取SPF级SD雄性大鼠40只,按体质量分层随机分为4组,空白组、模型组、中药组、自愈组,每组10只。采用"饮食失节+劳倦"等复合因素方法复制脾气虚动物模型。在此基础上,采用"苦寒泻下"法复制脾阳虚动物模型。动物模型复制成功后,中药组给予附子理中丸1∶1水溶液灌胃治疗。在造模结束和中药治疗干预后,分别采用Western blotting法和RT-PCR法检测大鼠小肠黏膜上皮细胞中CREB、Sirt1及线粒体中UCP2蛋白和mRNA表达。采用免疫荧光法检测小肠上皮组织中ATP含量。结果与空白组相比,模型组大鼠小肠上皮组织中CREB与Sirt1蛋白和mRNA表达降低(P均<0. 01),UCP2蛋白和mRNA表达增加(P均<0. 01);与模型组相比,中药组大鼠小肠上皮组织中CREB与Sirt1蛋白和mRNA表达升高(P均<0. 05),UCP2蛋白和mRNA表达降低(P均<0. 01)。与空白组相比,模型组大鼠小肠组织中ATP含量降低(P <0. 01);与模型组相比,中药组大鼠小肠组织中ATP含量升高(P <0. 01)。结论附子理中丸可使脾阳虚大鼠小肠上皮细胞CREB、SIRT1表达升高,线粒体UCP2蛋白表达上调、肠上皮组织中ATP合成减少。

幼年大鼠内毒素血症对小肠上皮细胞凋亡及PCNA表达的影响

目的:探讨幼年大鼠内毒素血症对小肠细胞凋亡与增生的影响,为抗凋亡或促增生治疗提供理论依据方法:用内毒素(4 mg/kg大肠杆菌脂多糖)ip制备幼年大鼠内毒素血症模型,同等量生理盐水ip为对照组,分别在注射后0 h(只限于对照组)或死后10 min(只限于内毒素组),2,4,6,24,72 h取4 cm远端回肠, HE染色观察小肠绒毛的病理变化,原位末端标记法(TUNEL)检测小肠上皮的细胞凋亡,免疫组织化学方法测定增生细胞核抗原(PCNA)的表达. 结果:内毒素组各时间点小肠绒毛上皮细胞凋亡指数均明显高于对照组(分别为37.4±7.1,44.1±9.3,46.6±8.2, 54.7±9.0,45.3±7.2,33.9±6.1 vs 0.02±0.01, P<0.01),PCNA表达均明显低于对照组(P<0.05).注内毒素后2 h上皮细胞凋亡指数明显增加,随着时间延长, 逐渐增加,于24 h达高峰,72 h恢复到6 h的水平;PCNA 的表达于2 h(30.2±8.3 vs 74.6±16.2,t=6.874, P<0.01)明显降低,4 h(21.4±6.7 vs 74.6±18.7, t=7.566,P<0.01)和6 h(23.9±14.7 vs 73.6±13.7, t=6.999,P<0.01)达最低水平,24 h(35.8±11.4 vs 76.3±11.8,t=7.010,P<0.01)恢复到2 h的水平, 72 h(59.6±18.0 vs 78.7±16.9,t=2.185,P= 0.046<0.05)仍未达到正常.死亡组细胞凋亡指数(33.9±6.1)和PCNA表达(20.2±9.2)分别与注内毒素后2 h 和4 h的接近.将同一时间点的PCNA表达与细胞凋亡指数的比值进行比较发现,内毒素组的比值(分别为0.8±0.3,0.5±0.1,0.5±0.3,0.6±0.2,1.3±0.3,和0.6±0.2)明显低于正常[(3.2±0.8)×103- (3.7±0.7)×103](P<0.01),死亡组比值与注内毒素后4,6,24 h的接近,近于最低点. 结论:幼年大鼠内毒素血症时小肠上皮细胞凋亡增加, PCNA表达降低,细胞凋亡与细胞增生之间的平衡破坏是严重感染时肠屏障破坏的病理机制之一.

wtp53基因在不同发育阶段大鼠小肠上皮细胞的表达及修复作用

目的 :研究抑癌基因 wtp5 3在不同发育时期 Wistar大鼠小肠上皮细胞的表达、分布特征以及与细胞增殖分化的关系 ,探讨 wtp5 3基因在小肠创伤修复时可能发挥的生物学作用。方法 :利用 wtp5 3单克隆抗体 ,以超敏的链酶卵白素 (SP)免疫组织化学方法 ,观察 wtp5 3基因在胚胎期、新生期各时间段 Wistar大鼠小肠上皮细胞的阳性表达与分布特征 ;同时以细胞增殖活性的标志增殖细胞核抗原 (PCNA)表达为参照 ,对不同时期细胞的增殖分化状况作对比性研究。结果 :在胚胎期第 14日 (E14日 )、E17日、E19日、新生期第 1日 (P1日 ) ,小肠上皮细胞 wtp5 3基因的阳性表达范围较广 ,染色强度较深。到 P2日 ,wtp5 3基因表达不仅范围扩大且染色强度明显增强 ;到 P2 8日 ,wtp5 3基因在小肠上皮细胞的表达为阴性 ;从 E14日至 P2日 ,PCNA的表达趋势与wtp5 3类似 ,而 P2 8日 PCNA阳性细胞仅局限于小肠绒毛隐窝。结论 :在小肠发育的早期 ,上皮细胞的快速增殖分化期伴随着 wtp5 3基因的高度表达 ,提示在小肠创伤修复期抑癌基因 wtp5

热暴露对大鼠小肠上皮细胞膜微粒分布的影响

本实验研究采用冷冻蚀刻技术定量分析了热暴露及游泳对ＳＤ大鼠小肠上皮细胞膜内微粒分布的影响。结果表明热暴露能显著影响小肠上皮细胞膜内微粒的分布特性，降低细胞膜和核膜膜内微粒的数量，游泳能加重其改变。停止受热后这些改变略有恢复，但停止受热后２４ｈ膜内微粒数量仍低于对照组水平。文中还讨论了这些改变的生物学意义。

健脾益气中药的小肠隐窝细胞药理靶点探讨

综述近年来开展IEC-6小肠隐窝细胞药理研究的成果。研究工作以隐窝细胞生理学研究进展作为基础,建立IEC-6细胞药理实验模型,开展健脾益气中药的肠上皮干细胞药理研究。实验采用噻唑蓝比色法(MTF)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、高效液相色谱、免疫荧光标记等方法,观察健脾益气中药对IEC-6细胞增殖、迁移及分化的影响并观察其对绒毛蛋白、二价金属转运蛋白、白细胞介素6(IL-6)和鸟氨酸脱羧酶(ODC)的表达及对ODC活性及腐胺含量的影响,结果表明党参、白术、黄芪、甘草化学提取组分通过调节细胞内ODC活性和多胺生成,对IEC-6细胞增殖、迁移、分化、吸收功能起到促进或抑制作用。提示小肠隐窝细胞是健脾益气中药的主要药理作用靶点。

黄连素对大鼠结肠隐窝细胞钾通道的影响

目的:探讨黄连素对结肠上皮隐窝细胞基底膜cAMP依赖的钾通道[IK(cAMP)]的影响,以研究其治疗分泌性腹泻的机制.方法:用EDTA溶液分离结肠上皮隐窝细胞,以-60mV为钳制电压钳制细胞,20mV为阶跃,用EPC10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L的黄连素对结肠上皮细胞基底膜IK(cAMP)的影响.结果:50、100、500μmol/L的黄连素可显著抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜IK(cAMP)(P<0.05),且抑制效应具有浓度依赖性.当阶跃刺激为+80mV时,其IK(cAMP)分别为生理盐水对照组的78.55%±5.72%,60.42%±6.33%,43.78%±6.47%(P<0.05).结论:黄连素能抑制大鼠结肠隐窝细胞基底膜cAMP依赖的钾通道开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一.