改良法制备、评价大鼠局灶性脑缺血模型的实验研究

目的:对线栓法大鼠局灶性脑缺血模型进行改进,并设计新的改良神经功能缺损评分(NFDS)法,探讨改良的原因和方法的科学性、合理性、简便性。方法:用改良法造模,并用新设计的改良NFDS法评分。于大鼠苏醒后、再灌注24h和72h行NFDS,统计模型组大鼠苏醒后NFDS分值梯度、平均造模时间、模型成功率、死亡率。结果:模型组与假手术组NFDS比较,差异有显著性意义(t=13.79,P<0.01),模型组内3个时间点NFDS两两比较差异均有显著性意义(P<0.01),模型组大鼠苏醒后NFDS分值梯度合理,造模平均所需(13±2)min,模型成功率87.5%,死亡率3%。结论:改良法制备的模型重复性好、手术时间短、模型成功率高、死亡率低,新设计的改良NFDS法简便易行、对场地和器械要求低、分数判断灵敏准确、条目相对全面、分值梯度合理。

线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型研究

目前制备大鼠局灶性脑缺血模型的方法较多，其中线栓法是备受推崇的一种，其具有不开颅、创伤小、易控制条件，可模拟临床脑缺血的各种症状等，成为开展脑缺血指导及治疗的基础。但传统的方法制备模型病死率高、成功率低。本实验通过对传统的Koizumi法进行改进，以期提供方法简单、操作方便、成功率高、模型稳定的方法。

大鼠局灶性脑缺血MAP2表达及毛冬青黄酮的保护作用

目的:探讨大鼠局灶性脑缺血神经细胞MAP2表达,研究毛冬青黄酮对脑缺血的保护作用. 方法:选用颈外动脉插入线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞模型,40只雄性Wistar大鼠,随机分成正常对照组、假手术组、盐水-缺血3 h、6 h、24h组,毛冬青黄酮-缺血3 h、6 h、24h组.本研究以MAP2染色为指标,评价大鼠局灶性脑缺血损伤情况以及毛冬青黄酮对大鼠局灶性脑缺血MAP2表达的影响.MAP2在大鼠神经元中表达丰富,对兴奋性氨基酸、生长因子等反应敏感,是细胞内信号传导的重要环节,参与经元的生长和损伤后修复过程.MAP2对缺血敏感,可显示缺血时神经元损伤情况.

凯力康对大鼠局灶性脑缺血的实验研究

以电烧灼法阻断大鼠大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)造成局灶 性脑缺血模型,观察凯力康(kallidinogenase)对缺血脑组织的保护作用。结果表明,凯力康8．75× 10-3、17．5×10-3 PNAU/kg于术后30 min静脉注射,能显著缩小MCAO 24h造成的脑梗死面积,改 善神经症状,并能减少脑含水量。

静脉注射人骨髓间质干细胞对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的探讨小剂量人骨髓间质干细胞(hMSC)对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响。方法健康SD大鼠,分为假手术组、缺血再灌注组、小剂量hMSC移植组。制作大鼠大脑中动脉(MCAO)模型后24h缺血再灌注组尾静脉注射生理盐水,hMSC移植组尾静脉注射PKH26标记的hMSC,1、3、7、14d后测定神经功能评分,14d后测定脑梗死面积,观察小剂量hMSC静脉注射后能否到达脑缺血周边区。结果缺血再灌注组运动功能、感觉功能损伤最重,hMSC移植组运动功能、感觉功能较缺血再灌注组7d和14d时明显恢复(P<0.01),hMSC移植后脑梗死面积较缺血再灌注组明显缩小(P<0.01),小剂量(1×106)hMSC尾静脉注射后能到达脑缺血周边区。结论尾静脉注射小剂量hMSC后能改善神经功能,缩小梗死面积,小剂量hMSC尾静脉注射后能够到达缺血周边区。

乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血脑组织氧自由基的影响

目的:观察乌龙丹对大鼠局灶性脑缺血脑组织中氧自由基的影响。方法:复制大鼠局灶性脑缺血病理模型,于缺血后24h,取脑组织测定SOD活性及MDA含量。结果:缺血24h后,脑组织SOD活性明显降低而MDA含量明显升高(P<0.05);乌龙丹可使脑组织中SOD活性提高,同时使MDA含量降低(P<0.05)。结论:乌龙丹抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其减轻氧自由基毒性反应有关。

线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型方法的改进

目的:提出一个手术简单,重复性好的大鼠局灶性脑缺血模型的改进方法。方法:SD大鼠45只,随机分为3组(15只/组),除空白对照组外,局灶性脑缺血再灌注组与丁基苯酞治疗组均采用大鼠颈总动脉套管进线和分离翼腭动脉但不结扎的方法复制局灶性脑缺血,观察脑梗死体积,脑组织含水量和神经功能缺陷的改变。结果:局灶性脑缺血再灌注比较假手术对照组,脑梗死体积,脑组织含水量和神经功能评分均有明显的差异。结论:改进线栓法复制的大鼠局灶性脑缺血模型可靠,重复性好。

腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的观察腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及脑保护机制。方法线栓法建立大鼠局灶性脑缺血2 h后再灌注损伤模型;SD大鼠60只,随机分为假手术组(F组),缺血再灌注组(IR组),腺苷预处理组(AP组),每组20只;通过HE染色在光镜下观察神经细胞损伤变化,免疫组化法检测Bax蛋白的阳性表达。结果光镜下,假手术组(F组)神经细胞结构正常,腺苷预处理组(AP组)和缺血再灌注组(IR组)均有不同程度的缺血再灌注损伤,腺苷预处理组较缺血再灌注组损伤轻;假手术组Bax蛋白表达极弱,缺血再灌注组和腺苷预处理组在脑缺血再灌注后2 h接近缺血核心区出现Bax蛋白阳性表达,6 h后表达增多,24 h达到高峰,72 h开始减少。与假手术组相比,腺苷预处理组和缺血再灌注组Bax蛋白阳性细胞数显著增多(P<0.05);与缺血再灌注组相比,腺苷预处理组Bax蛋白阳性细胞数显著减少(P<0.05)。结论腺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,腺苷可通过下调Bax蛋白的表达发挥脑保护作用。

栀子苷、黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血模型缺血脑组织单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的影响

为进一步明确栀子苷、黄芩苷治疗脑内炎症反应的具体途径 ,本实验选择在局灶性脑缺血炎症反应中发挥重要作用的单核细胞趋化蛋白 (MCP -1)作为研究对象 ,观察缺血过程中栀子苷、黄芩苷对不同时间脑组织MCP

骨髓基质细胞治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效评价

目的:观察静脉注射骨髓基质细胞(BMSC)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效。方法:取健康Wistar大鼠45只,雌雄不限,随机分为骨髓基质细胞组(治疗组),生理盐水组(实验对照组)和空白对照组。Fridenshtein方法分离培养骨髓基质细胞,免疫细胞化学法鉴定骨髓基质细胞,改良Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)1h模型。栓塞24h后,治疗组股静脉注射经BrdU标记的终浓度为3×106个/ml骨髓基质细胞1ml,实验对照组股静脉注射1ml生理盐水,空白对照组股静脉不注射。采用免疫组化法检测脑内BrdU阳性细胞的表达,神经功能损伤评分(NSS)检测大鼠神经系统功能,进行疗效评价。结果:免疫细胞化学方法鉴定骨髓基质细胞为CD34(-),CD54(+)、CD106(+)、CD44(+)。栓塞后3,7,14d在缺血侧半球可以发现大量BrdU阳性细胞,对侧半球也可见少量BrdU阳性细胞。治疗组和两个对照组相比各时间点的神经功能评分均偏小,在栓塞14d时有显著性差异(P<0.05)。结论:骨髓基质细胞(BMSC)静脉注射后大鼠的神经功能明显得到了恢复,故认为静脉注射骨髓基质细胞治疗局灶性脑缺血简便易行,并且有效。

大鼠局灶性脑缺血转化生长因子β1表达的研究

目的：探讨大鼠局灶性脑缺血转化生长因子β1（TGF—β1）表达的变化及其意义。方法：采用免疫组化法检测TGF—β1在缺血中心区及半暗区的变化情况。结果：TGF—β1在缺血中心区和半暗区均有TGF—β1免疫组化染色阳性细胞，尤以半暗区最多。TGF—β1表达高峰在缺血1-3d。结论：TGF—β1与脑缺血的病理生理过程密切相关。

蒙药九味沉香胶囊对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的：观察蒙药九味沉香胶囊对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法：采用改良的线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO）。将健康成年大鼠随机分为6组：假手术组、缺血模型组、尼莫地平组、九味沉香胶囊大、中、小剂量组。观察大鼠的神经行为学评分，检测脑梗死范围，测定血清中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：脑缺血大鼠的神经功能评分：与假手术组比较，

蒙药赞旦-3味对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用的研究

目的：研究蒙药制剂赞旦-3味（ZDSW）对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法：将72只大鼠随机分成六组，分别为模型组、假手术组、尼莫地平组、赞旦-3味大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组12只。术前灌胃给药25天，末次给药30min后，采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞缺血模型（MACO）。苏醒后对其神经功能行为学进行评分；缺血24小时后，用TTC染色法检测脑组织梗死面积并进行病理切片观察神经细胞的形态结构的改变，

miR-34c在大鼠局灶性脑缺血模型中的表达

目的通过检测miR-34c及其靶基因在大鼠局灶性脑缺血模型中的表达变化,初步探讨miR-34c及其靶基因在大鼠局灶性脑缺血中的作用。方法首先利用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型;然后利用qRT-PCR检测miR-34c在大鼠脑缺血不同时间点的表达变化;利用生物信息学方法预测miR-34c的可能靶基因;再利用RT-PCR和qRT-PCR方法检测靶基因在大鼠脑缺血不同时间点的表达变化。结果成功制备大鼠局灶性脑缺血模型;miR-34c在大鼠脑缺血模型中随着缺血时间的延长其表达呈下降趋势;靶基因Hspa1b、Cacna2d1、Sperping1、Cntn2在大鼠脑缺血模型中随着缺血时间的延长其表达呈明显上升趋势。结论 miR-34c通过靶基因在大鼠局灶性脑缺血损伤过程中起到重要的保护作用。

探讨线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型的影响因素

目的:为了提高线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型成功率,探讨大鼠局灶性脑缺血模型的有效方法及影响因素。方法:为观察高温外环境对造模的影响,将外环境温度控制在(25±1)℃和在夏季未控制外环境温度(30℃以上)分为温度控制组(n=15)和非温度控制组(n=15),其他制作过程一致;为观察栓线从颈总动脉和颈外动脉插入对造模的影响分为颈总动脉插入组(n=15)和颈外动脉插入组(n=15),其他制作过程一致;为观察术中术后2h内老鼠苏醒活跃状态对造模的影响分为麻醉状态组(n=15)和苏醒活跃状态组(n=15),其他制作过程一致。从造模24h后观察Zea-Longa评分在1～3分的大鼠且7d内观察大鼠未死亡视为造模成功。结果:在外环境温度控制在(25±1)℃组与夏季未控制外环境温度(30℃以上)比较,差异无统计学意义(P=0. 107> 0. 05);线栓从颈总动脉插入比从颈外动脉插入存活率高,具有统计学意义(P=0. 025 <0. 05);术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态组死亡率高,与麻醉未清醒状态组比较差异具有统计学意义(P=0. 021 <0. 05)。结论:直接分离出颈总动脉(CCA)并从颈总动脉插入具有易操作、创伤性小、操作时间快、进线栓快、进线栓顺利以及模型稳定等优点,能降低造模的死亡数据;术中术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态会对模型大鼠造成较大的刺激,造成死亡率增加。

丁苯肽联合亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Caspase-3表达的影响研究

目的:研究丁苯酞联合亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Caspase-3表达的影响,并探讨其对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞的保护作用。方法:40只SD大鼠将其随机分为假手术组与缺血再灌注组,应用大脑中动脉内线栓阻断法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,分别用Longa神经功能评分法与免疫组化法评价丁苯酞联合亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经细胞保护作用及脑内Caspase-3表达的影响。结果:与缺血再灌注组相较而言,假手术组大鼠所表现的出的神经功能缺失症状明显要,而Caspase-3表达减少。结论:丁苯酞联合亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注具有重要的保护作用,其中丁苯酞与亚低温均对Caspase-3表达有抑制作用,因此与其作用机制有关。

NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响

目的观察NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响。方法采用大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)造成局部脑缺血模型,观察NBT对脑缺血大鼠行为症状、脑梗死面积、脑组织含水量的影响。结果预先给予NBT0.21g/kg,0.42g/kg7d,可减轻MCAO大鼠行为障碍、减少脑梗死面积、降低脑组织的含水量(P<0.05)。结论NBT对大鼠脑缺血有一定的预防作用。

营养食品对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的：探讨营养食品苦荞豆浆及山楂果肉对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法：将46只Wister大鼠随机分成四组：假手术组，模型对照组，苦荞豆浆营养组、山楂果肉营养组。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型，缺血24小时后观察神经行为反应，测定脑梗死面积，取血测定血清中的超氧化岐化酶（SOD）含量及丙二醛（MDA）含量。结果：大鼠脑缺血神经评分：模型对照组神经评分明显高于假手术组、