电针与干细胞治疗大鼠急性周围神经损伤的磁共振扩散张量成像评估

目的运用磁共振扩散张量成像技术(diffusion tensor imaging,DTI)评估电针与干细胞移植在急性周围神经损伤疾病中的治疗效果。材料与方法将48只造模成功的成年SD大鼠随机平均分为电针组、干细胞组和对照组,每组16只。电针组大鼠接受环跳和足三里的电针治疗。干细胞组大鼠于损伤处神经外膜下微量注射3μL含有约5×105个骨髓间充质干细胞的生理盐水悬浊液。对照组显微注射同体积的生理盐水。使用多参数磁共振成像技术包括DTI和磁共振T2加权脂肪饱和序列(T2-weighted fat saturation,T2WI-FS)、组织学评估、免疫组化分析监测神经结构的变化(包括神经直径、髓鞘厚度及形态改变、轴突连续性的恢复)。运用坐骨神经功能指数(somatic functional index,SFI)和步行轨迹分析方法评估神经的运动功能。采用重复测量单因素方差分析不同实验组间大鼠磁共振横向弛豫时间(T2值)、DTI指标[各向异性分数(fractional anisotropy,FA)和径向扩散率(radial diffusivity,RD)]、SFI值的差异性。运用Bonferroni检验校正不同时间节点下多重检验的阈值结果。结果急性周围神经损伤后第1周,所有组大鼠的FA值显著下降,随后逐渐升高,直至第4周恢复至接近正常水平;而RD值在手术后1周内显著上升,随后逐渐下降,同样于第4周时恢复至接近正常水平。电针组和干细胞组大鼠在术后不同时间点(2~4周)的恢复均优于对照组,且电针组的恢复最为显著(P<0.001)。T2WI-FS显示在术后的1、2、4周,电针组及干细胞组大鼠与对照组大鼠相比在神经水肿消退速度方面具有显著差异(P<0.001);神经直径与T2值在手术后1周内显著升高,此后逐渐下降,在第4周时恢复至接近正常水平;甲苯胺蓝染色与SPRR1A轴突染色均指向电针组的神经纤维连续性恢复最快,其次是干细胞组。结论电针在急性周围神经损伤疾病中的治疗效果可与干细胞移植治疗相当,并在减轻水肿及炎性反应方面极具优势。DTI参数FA和RD值是髓鞘完整性的成像标志物。

促红细胞生成素对大鼠急性脊髓损伤铜死亡及感觉运动功能的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)铜死亡及感觉运动功能的影响。方法将36只212~236 g雄性SD大鼠按照随机数字表法分为Sham组(行椎板切除)、ASCI组(ASCI建模)和EPO组(行ASCI建模后每日腹腔注射EPO 5000 U/kg,7 d),每组12只。术后进行运动及感觉功能(Reuter)评分、BBB评分及脊髓含水率测量,采用等离子质谱仪检测Cu^(2+)含量,蛋白质印迹技术检测铜死亡蛋白铁氧还原蛋白1(FDX1)及二氢硫辛酰转乙酰基酶(DLAT)的表达水平,比较3组大鼠感觉运动功能、脊髓水肿情况等。结果与Sham组比较,ASCI组和EPO组BBB评分减少(P<0.05),Reuter评分、脊髓含水率、Cu^(2+)含量、FDX1及DLAT表达均增多(P<0.05);与ASCI组比较,EPO组大鼠BBB评分增多(P<0.05),Reuter评分、脊髓含水率、Cu^(2+)含量、FDX1及DLAT表达均减少(P<0.05)。结论EPO可抑制ASCI大鼠铜死亡、减轻脊髓水肿,改善其感觉运动功能。

建立急性高原低氧肺组织损伤雄性大鼠模型并探讨高原低氧肺组织损伤机制

目的摸索相关参数建立急性高原低氧肺组织损伤雄性大鼠模型并探讨高原低氧肺组织损伤机制。方法1.建立急性高原低氧肺组织损伤雄性大鼠模型的方法:采用随机数字表法将雄性大鼠分为5组,即空白对照组,高原低氧6h组、24h组、48h组、72h组,适应性喂养7 d后进低压氧舱(模拟海拔7000 m),以肺组织纹理模糊、肺泡壁变厚、肺泡间隔增宽判断造模成功。2.探讨高原低氧肺损伤机制的方法:分别比较各组大鼠动脉血血气分析(ABG)结果、肺组织血管紧张素II(Ang II)含量、肺组织内皮素1(ET-1)含量和肺组织血管紧张素转化酶(ACE)m RNA的表达情况及肺组织超微结构,并作相关性分析。结果1.各组雄性大鼠ABG相关指标的变化:与对照组比较,高原低氧6 h、24 h、48 h、72 h组氧分压(PaO_(2))、动脉血氧饱合度(SaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))和酸碱度(p H)值均下降,在一定时间范围内缺氧时间越长下降越明显(P<0.05)。2.各组雄性大鼠肺组织形态学的变化:与对照组比较,光镜下可见高原低氧各组出现不同程度的肺纹理模糊、肺泡壁增厚、肺泡间隔增宽;随着缺氧时间延长,肺组织损伤逐渐加重。3.各组雄性大鼠肺组织AngⅡ、ET-1含量变化:与对照组比较,高原低氧各组大鼠肺组织AngⅡ、ET-1含量明显升高(P<0.01),在一定时间范围内随缺氧时间延长而增加,72 h组达到高峰。4.各组雄性大鼠肺组织ACE m RNA表达比较:与对照组比较,高原低氧各组大鼠肺组织ACE m RNA表达均上调,6h组升高显著,72h组达到峰值(P<0.01)。结论利用低压氧舱模拟海拔7000 m环境,可以有效建立大鼠肺组织损伤模型;高原低氧肺损伤机制可能与ET-1、AngⅡ及ACE m RNA的表达水平上调,肾素-血管紧张素系统(RAS)失衡有关。

甲基莲心碱通过调控NF-κB信号通路减轻脓毒症大鼠急性肺损伤

【目的】探讨甲基莲心碱对脓毒症大鼠急性肺损伤的治疗作用及机制。【方法】采用盲肠结扎穿刺(GLP)法制备脓毒症大鼠模型,造模成功后,将大鼠分为模型组,甲基莲心碱低、高剂量组和甲基莲心碱高剂量+PMA[核转录因子κB(NF-κB)激活剂佛波酯]组,同时设置假手术组,每组15只。术后6 h,给予相应干预,连续2 d。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学改变,并进行损伤病理评分;检测肺组织湿干质量比;血气分析仪检测动脉血氧分压(PaO_(2))和动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)水平;Western Blot法检测肺组织中NF-κB p65、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65(Ser536)、环氧合酶2(COX-2)蛋白表达水平。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠肺组织损伤严重,肺组织损伤病理评分、湿干质量比及PaCO_(2)水平显著升高(P<0.01),PaO_(2)水平显著降低(P<0.01),BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及肺组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65比值、COX-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,甲基莲心碱低、高剂量组大鼠肺组织损伤明显改善,肺组织损伤病理评分、湿干质量比及PaCO_(2)水平显著降低(P<0.05或P<0.01),PaO_(2)水平显著升高(P<0.05或P<0.01),BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及肺组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65比值、COX-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。然而,PMA干预后,甲基莲心碱对脓毒症大鼠肺组织损伤的改善作用被明显逆转(P<0.01)。【结论】甲基莲心碱可改善大鼠脓毒症急性肺损伤及肺功能,其作用可能与抑制NF-κB信号通路激活,进而减少体内炎症因子释放有关。

基于JAK2-STAT3信号通路探讨热毒宁注射液治疗大鼠急性肺损伤的作用机制

目的:探讨热毒宁注射液通过调节JAK2-STAT3信号通路干预急性肺损伤(ALI)大鼠作用机制。方法:30只Wistar大鼠随机分为五组,分别为模型对照组、空白对照组、地塞米松组、热毒宁高剂量组和热毒宁低剂量组。每组大鼠均进行腹腔注射给药,每日1次,连续5 d,末次给药后,采用脂多糖滴注咽后壁气管建立ALI大鼠模型。造模24 h后,比较各组大鼠动脉氧分压,HE染色法观察肺组织的病理学改变,ELISA法检测大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平,Western blot测定各组大鼠肺组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠PaO 2水平明显下降,病理评分升高,PaCO 2、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达升高(均P<0.05)。与模型对照组比较,地塞米松组和热毒宁高剂量组大鼠PaO 2水平升高,病理评分下降,PaCO 2、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:热毒宁注射液对ALI大鼠有保护作用,其机制可能与调节JAK2-STAT3信号通路的活化、降低炎症反应有关。

乳没软膏治疗急性闭合性软组织损伤大鼠的抗炎研究

目的:研究乳没软膏治疗急性闭合性软组织损伤的抗炎镇痛作用。方法:60只斯泼累格·多雷(SD)大鼠(6只备用),分为A组(空白对照组)、B组(模型对照组)、C组(青鹏软膏组)、D组(乳没软膏高剂量组)、E组(乳没软膏中剂量组)、F组(乳没软膏低剂量组);通过建立SD大鼠急性闭合性软组织损伤模型,检测受损组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、前列腺素2(PGE-2)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化;镜下观察受损组织形态学变化及组织中碱性细胞生长因子(bFGF)含量变化。结果:造模药物干预后,造模组大鼠损伤组织TNF-α、IL-1β、PGE-2含量逐渐下降,其中以C组、D组下降最为明显,B组下降最为缓慢;SOD含量以C组、D组的上升趋势最为明显,B组上升最为缓慢。造模后第2天,各组bFGF蛋白平均光密度值总体比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第7天、第14天,各组bFGF蛋白平均光密度值总体比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳没软膏高剂量组与青鹏软膏在抗炎镇痛方面效果相当。

清肺通络方对急性肺损伤后大鼠肺纤维化的影响

目的:探索清肺通络方对内毒素诱导的急性重度肺损伤大鼠早期肺纤维化的抑制作用。方法:大鼠随机分为6组:空白组,模型组,地塞米松组、清肺通络方低、中、高剂量组(10,20,30g·kg^(-1))。苏木素-伊红染色观察肺组织病变,Masson染色分析肺纤维化程度。ELISA实验检测各组大鼠血浆中IL-1β和TNF-α的水平。结果:急性肺损伤大鼠血浆中TNF-α和IL-1β表达水平显示:模型组大鼠IL-1β和TNF-α水平高于空白组(P<0.05),清肺通络方各组(10,20,30g·kg^(-1))大鼠血浆中IL-1β和TNF-α水平均低于模型组(P<0.05),清肺通络方各组(10,20,30g·kg^(-1))大鼠血浆中IL-1β和TNF-α水平均低于地塞米松组(P>0.05),清肺通络方各组(10,20,30g·kg^(-1))之间无显著统计学差异(P>0.05)。苏木素-伊红染色检查显示:地塞米松组和清肺通络方各组肺组织病理损伤程度明显较模型组减轻,肺泡腔及肺泡隔结构尚存,肺泡间隔存在局部变厚,肺泡较少存在融合。Masson染色结果显示:模型组大鼠肺组织中可见大量被染成蓝色的胶原纤维沉积区域,其纤维化程度相较于地塞米松组和清肺通络方各组明显增加,地塞米松组大鼠肺组织仅有少量的区域被染成蓝色,纤维化程度最轻,地塞米松组和清肺通络方各组其纤维化程度与空白组相比无明显差异或差异较小。结论:清肺通络方可降低急性肺损伤后大鼠血浆炎性因子IL-1β和TNF-α水平,抑制急性肺损伤后早期肺纤维化程度。

“足三里”“尺泽”电针预处理对急性肺损伤模型大鼠炎症反应及Nrf-2、HO-1因子表达的影响

目的:观察电针预处理对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症反应及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路的影响,探讨电针预处理在ALI中发挥的效应及可能机制。方法:将18只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、电针预处理+LPS组,每组6只。电针预处理组予以电针预处理,疏密波,频率3 Hz/15 Hz,电流强度1~2 mA,30 min/次,1次/天,连续治疗5天。第5天,对照组麻醉后眼眶取血,再取肺组织;LPS组与电针预处理组尾静脉1/3处注射LPS溶液(注射剂量5 mg/kg,浓度5 mg/mL)6 h后取样。采用苏木素伊红染色法观察肺组织病理变化;光学显微镜观察并进行肺损伤病理评分;酶联免疫分析法检测IL-1β、IL-10水平;荧光定量PCR及Western blot分别检测Nrf-2、HO-1mRNA和蛋白表达情况。结果:与对照组比较,LPS组肺泡壁增厚,肺间质可见大量炎性细胞浸润,肺泡可见红细胞渗出;血清IL-1β水平升高,IL-10水平降低(P<0.01);Nrf-2和HO-1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01);与LPS组相比,电针预处理组肺组织损伤程度明显减轻;IL-1β水平明显降低(P<0.01),IL-10水平升高(P<0.05);Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.01,P<0.05),蛋白表达水平变化趋势与mRNA表达一致。结论:电针预处理对急性肺损伤大鼠炎症反应具有抑制作用,其对肺保护效应可能与促进Nrf2、HO-1分泌,降低肺内促炎因子水平、升高抑炎因子水平有关。

基于HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路研究枇杷叶提取物对急性肺损伤模型大鼠炎症因子的影响

目的 基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路研究枇杷叶提取物对急性肺损伤(ALI)大鼠炎症因子的影响及潜在机制。方法 60只SPF级Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白组(NC组)、模型组(ALI组)、阳性对照组(Dex组)、枇杷叶提取物低剂量组(EJLE-L组)、枇杷叶提取物中剂量组(EJLE-M组)和枇杷叶提取物高剂量组(EJLE-H组),每组10只。ALI组、Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组气管内均滴注2 mg/kg脂多糖建立大鼠ALI模型。建模后,Dex组腹腔注射5 mg/kg地塞米松,EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组分别腹腔注射50、100、150 mg/kg枇杷叶提取物,NC组和ALI组腹腔注射5 mg/kg生理盐水。观察各组大鼠肺组织病理组织学及细胞超微结构变化,比较各组大鼠肺组织湿重/干重值,外周循环、肺组织炎症因子白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB累积光密度值(IOD)及蛋白、mRNA表达量。结果 与ALI组比较,Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组、EJLE-H组肺组织湿重/干重值[(6.12±0.14)、(5.76±0.11)、(5.09±0.12)、(4.67±0.10)比(6.89±0.17),P<0.05],肺组织病理评分[(7.79±0.65)分、(5.45±0.43)分、(3.23±0.29)分、(1.02±0.20)分比(13.23±1.00)分,P<0.05],外周循环炎症因子IL-1β[(102.32±11.23)ng/L、(87.86±9.09)ng/L、(64.54±6.74)ng/L、(43.11±5.63)ng/L比(147.87±15.64)ng/L,P<0.05]、IL-6 [(114.43±15.34)ng/L、(99.07±11.23)ng/L、(78.43±9.02)ng/L、(55.46±6.12)ng/L比(156.65±19.98)ng/L,P<0.05]、TNF-α[(156.64±19.09)ng/L、(107.64±12.32)ng/L、(69.09±9.09)ng/L、(49.98±5.46)ng/L比(201.98±24.43)ng/L,P<0.05]水平,肺组织炎症因子IL-1β[(172.21±17.68)ng/L、(123.32±14.35)ng/L、(95.54±10.76)ng/L、(70.94±8.75)ng/L比(223.42±28.76)ng/L,P<0.05]、IL-6[(154.43±17.65)ng/L、(100.23±11.43)ng/L、(76.42±8.93)ng/L、(66.75±6.55)ng/L比(198.90±22.34)ng/L,P<0.05]、TNF-α[(164.58±18.97)ng/L、(110.23±14.53)ng/L、(90.23±10.98)ng/L、(61.65±6.57)ng/L比(223.42±34.52)ng/L,P<0.05]水平,肺组织HMGB1[IOD值:(232.32±34.42)、(197.87±29.09)、(123.23±15.46)、(69.98±8.98)比(398.89±45.53),蛋白:(2.32±0.29)、(2.00±0.17)、(1.78±0.10)、(1.35±0.20)比(2.76±0.21),mRNA:(2.10±0.17)、(1.85±0.19)、(1.53±0.14)、(1.29±0.20)比(2.90±0.21),P <0.05]、TLR4 [IOD值:(214.34±22.35)、(168.98±18.90)、(100.34±11.23)、(77.85±8.45)比(453.34±52.32),蛋白:(2.54±0.23)、(2.04±0.22)、(1.61±0.18)、(1.46±0.14)比(2.98±0.34),mRNA:(2.03±0.25)、(1.76±0.21)、(1.54±0.14)、(1.25±0.10)比(2.76±0.22),P<0.05]、NF-κB [IOD值:(200.97±28.87)、(159.09±16.57)、(102.32±14.35)、(67.84±7.98)比(323.43±39.98),蛋白:(1.87±0.20)、(1.34±0.19)、(1.00±0.15)、(0.88±0.09)比(2.00±0.16),mRNA:(2.67±0.20)、(2.21±0.19)、(1.97±0.17)、(1.54±0.12)比(3.02±0.22),P<0.05]均明显降低;与Dex组、EJLE-L组、EJLE-M组比较,EJLE-H组上述指标改善更明显(P<0.05)。结论枇杷叶提取物可明显抑制ALI大鼠外周循环及肺部炎症,其可能通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路逆转肺损伤。

大黄素对脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探索大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤的保护作用。方法 新生大鼠腹腔注射LPS制作建立急性肺损伤模型,每天腹腔注射不同剂量大黄素(emodin, EMD),连续治疗7 d,对照组腹腔注射等体积生理盐水。通过HE、Masson染色进行组织病理学检测,免疫组织化学检测肺组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,原位末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡水平,Western Blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase 3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果 脂多糖使大鼠肺损伤评分、肺纤维化程度、α-SMA平均光密度、TUNEL阳性率、Collagen I、Collagen Ⅲ、cleaved Caspase3、IL-1β、TNF-α蛋白表达水平较对照组显著增加,大黄素处理能剂量依赖性抑制脂多糖引起的上述变化。结论 大黄素对LPS诱导的新生大鼠急性肺损伤具有保护作用。

大柴胡汤对CCl_(4)诱导大鼠急性肝损伤炎症反应的调控作用

目的 观察大柴胡汤对急性肝损伤的保护作用。方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常(NOM)组、模型(CCl_4)组、熊去氧胆酸(UDCA)组及大柴胡汤低、中、高剂量(DCH-L、M、H)组,每组6只。采用ELISA检测肝功能指标;全自动生化仪检查各组大鼠血清炎症因子及氧化应激指标;HE、天狼星红染色观察各组大鼠病理变化;实时荧光PCR检测MIP-2、MIP-1β mRNA表达;WB检测大鼠巨噬细胞言行蛋白-2(MIP-2)蛋白表达。结果 与NOM组比较,CCl_(4)组碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、直接胆红素(DBIL)、硫代巴比妥酸(TBA)及总胆红素(T-BIL)水平显著升高(P <0.01),白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平升高(P <0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱氨肽(GSH)水平显著降低,MDA水平显著升高(P <0.01);MIP-2、MIP-1βmRNA水平显著增高(P <0.01),MIP-2蛋白阳性表达显著增强(P <0.01)。HE染色结果肝细胞体积增大,伴有不同程度炎症细胞浸润、坏死,可见气球样变或纤维样变;天狼星红染色结果示肝组织胶原纤维明显增生,胶原染色面积增大。与CCl_(4)组比较,UDCA及DCH-L、M、H组均能逆转这些指标及病理改变,且高剂量组效果更优。结论 大柴胡汤可以改善CCl_(4)大鼠肝功能指标及病理改变,降低炎症因子水平,并抑制MIP-1β、MIP-2趋化因子的表达。其可能的机制为通过抑制炎症反应从而对CCL4大鼠急性肝损伤发挥保护作用。

毛菊苣乙酸乙酯萃取物对大鼠溃疡性结肠炎合并急性肝损伤防治作用研究

目的研究毛菊苣根乙酸乙酯萃取物(CGEA)对大鼠急性肝损伤合并溃疡性结肠炎的保护作用。方法将SD大鼠36只随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、柳氮磺吡啶肠溶片阳性对照组(Sulfasalazine,100 mg·kg^(-1))和CGEA高、低剂量组(150、100 mg·kg^(-1)),每组6只,除正常组外其余各组给予30%TNBS-40%乙醇溶液灌肠(60 mg·kg^(-1)),同时皮下注射含体积分数40%CCl4的橄榄油溶液2 mL·kg^(-1),一周2次,制备急性肝损伤模型合并溃疡性结肠炎模型,造模成功后将CGEA制备成水混悬液,按照CGEA高剂量组(150 mg·kg^(-1)),CGEA低剂量组(100 mg·kg^(-1))连续灌胃大鼠14 d,每日1次。14 d后,处死大鼠并取血清及肝脾组织,计算肝脾指数,检测大鼠血清相关指标;采用HE染色法观察肝、肠组织病理变化。结果与正常组比较,模型组大鼠肝脾指数明显上升(P<0.01);血清中AST、ALT、AKP、γ-GT和MDA水平显著升高(P<0.05或P<0.01),SOD水平显著降低(P<0.05);肝组织遭到破坏,炎性细胞浸润;结肠组织结构杂乱,出现炎症细胞浸润现象。与模型组比较,给药组肝脾指数显著降低(P<0.01);血清中AST、ALT、AKP、γ-GT和MDA指标水平显著降低(P<0.05或P<0.01);给药组肝肠组织破坏程度减轻,炎性细胞浸润减少。结论CGEA可以减轻大鼠溃疡性结肠炎合并急性肝损伤程度,对其起到保护作用。

七氟烷对急性肺损伤大鼠肺功能和NF-κB/NLRP3炎性体通路的影响

目的研究七氟烷对急性肺损伤大鼠肺功能及核因子-κB/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NF-κB/NLRP3)通路的影响。方法将75只大鼠随机分为对照组、模型组及1.5%、2.0%、2.5%七氟烷组,每组15只。除对照组外,其余4组腹腔注射5 mg/kg脂多糖制备急性肺损伤模型,造模后1.5%、2.0%、2.5%七氟烷组分别自由吸入1.5%、2.0%、2.5%七氟烷60 min,对照组和模型组自由呼吸空气。比较5组大鼠一般情况、肺功能状况(气道阻力、动态肺顺应性、用力肺活量)、肺湿/干比值(W/D)、氧合指数[动脉血氧分压(PaO_(2))/吸入氧浓度(FiO_(2))]、肺组织病理变化、肺泡灌洗液中炎性因子水平[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)],采用蛋白免疫印迹法检测并比较5组大鼠肺组织NF-κB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)表达水平。结果脂多糖作用96 h后,对照组、模型组及1.5%、2.0%、2.5%七氟烷组大鼠生存率分别为100%(15/15)、60.00%(9/15)、66.67%(10/15)、80.00%(12/15)、73.33%(11/15),2.0%七氟烷能明显提高大鼠生存率。HE染色显示,模型组肺组织病理改变明显,包括大量炎性细胞浸润、肺泡壁增厚且肺泡血管阻塞等,相较于模型组,1.5%、2.0%、2.5%七氟烷组肺组织病理改变有程度不同的减轻,其中以2.0%七氟烷改善效果最佳。与对照组比较,模型组气道阻力、肺W/D、TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、NLRP3、ASC、caspase-1显著升高(P<0.05),动态肺顺应性、用力肺活量、PaO_(2)/FiO_(2)显著降低(P<0.05);与模型组比较,1.5%、2.0%、2.5%七氟烷组气道阻力、肺W/D、TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、NLRP3、ASC、caspase-1显著降低(P<0.05),动态肺顺应性、用力肺活量、PaO_(2)/FiO_(2)显著升高(P<0.05)。结论七氟烷对急性肺损伤大鼠肺功能具有保护作用,以2.0%七氟烷肺保护效果最佳,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3炎性体通路有关。

红景天的仿生纳米药物对急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的保护作用及作用机制分析

目的:探讨急性胰腺炎大鼠应用红景天的仿生纳米药物治疗对保护胰腺损伤的作用机制。方法:40只大鼠以随机数字表法分为四组,各10只。对照组:正常大鼠,模型组:急性胰腺炎大鼠模型,红景天组:单纯红景天药物治疗;纳米治疗组:红景天的仿生纳米药物治疗,除对照组,其余三组均建立急性胰腺炎大鼠模型。建模用药后12h、24h、48h对各组小鼠转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、转化生长因子β_(1)受体Ⅱ(TβRⅡ)及Smad_(3)mRNA值,对胰腺组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)检测。结果:模型组TGF-β_(1)、TβRⅡ及Smad_(3)mRNA值在建模12h后升高,24h下降,48h再升高;红景天组、纳米治疗组各项指标值低于模型组,且纳米治疗组低于红景天组(P<0.05),红景天组、纳米治疗组血清淀粉酶、ColⅠ低于模型组,纳米治疗组低于红景天组(P<0.05)。结论:红景天的仿生纳米药物在急性胰腺炎大鼠治疗中效果较好,可改善组织损伤情况,促进修复,药物对胰腺组织产生保护机制。

大黄素调节NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路改善急性呼吸衰竭大鼠炎症反应和肺损伤的实验研究

目的 探究大黄素对急性呼吸衰竭大鼠炎症反应、肺损伤的影响以及对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)/CXC趋化因子配体1(CXCL1)信号通路的调控作用。方法 支气管滴入大肠杆菌脂多糖构建急性呼吸衰竭大鼠模型,成功造模70只,随机分成模型组,大黄素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组,大黄素+NLRP3激动剂[40 mg/kg大黄素+10 mg/kg NLRP3激动剂(BMS-986299)]组;每组14只。另取14只健康大鼠以相同方法支气管滴入等量生理盐水设为对照组。各组大鼠以相应方法连续干预7 d(每日1次)。肺功能仪和全自动血气分析仪检测大鼠呼吸频率、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉血氧分压(PaO_(2));酶联免疫吸附法检测肺组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)];苏木素-伊红染色观察肺组织病理学;荧光定量PCR和蛋白印迹法检测肺组织NLRP3、IL-1β、CXCL1信使RNA(mRNA)和蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组肺组织结构被破坏,肺泡壁充血,大量炎性细胞浸润,肺泡水肿,呼吸频率、PaCO_(2)及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 m RNA和蛋白表达显著升高,PaO_(2)显著降低(P <0.05);与模型组比较,大黄素低、中、高剂量组肺组织病变逐渐减轻,肺泡结构逐渐完整,炎性细胞浸润逐渐减少,呼吸频率、PaCO_(2)及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 mRNA和蛋白表达呈剂量依赖性降低,PaO_(2)呈剂量依赖性升高(P <0.05);大黄素高剂量组比较,大黄素高剂量+NLRP3激动剂组肺组织损伤明显加重,炎性细胞浸润增加,呼吸频率、PaCO_(2)及肺组织TNF-α、IL-8、NLRP3、IL-1β、CXCL1 mRNA和蛋白表达显著升高,PaO_(2)显著降低(P <0.05)。结论 大黄素可能通过抑制NLRP3/IL-1β/CXCL1信号通路,改善急性呼吸衰竭大鼠血气指标、炎症反应和肺损伤,发挥对肺的保护作用。

大鼠损伤性周围神经组织cDNA文库的构建

为克隆神经损伤及再生过程中出现的诱向因子和营养因子基因，以ＳＤ大鼠手术损伤的坐骨神经组织为材料，提取ｍＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ，以λｇｔ１１为载体，构建了一个ｃＤＮＡ文库。经测定，该文库的容量大于１．５×１０６，重组百分率为９６．７％，插入片段长度分布在０．５～８＼＾０ｋｂ之间。扩增后的滴度达１．４／１０１２ｐｆｕ／ｍｌ。以该文库ＤＮＡ为模板，运用ＰＣＲ方法扩增出３６０ｂｐ的ＮＧＦ和６１６ｂｐ的ＣＮＴＦ阅读框架片段。以地高辛标记的ＣＮＴＦ探针，从文库中筛选出ＣＮＴＦ克隆。经ＤＮＡ测序证实确为ＮＧＦ和ＣＮＴＦｃＤＮＡ全序列。根据已获得的６５ｋＤ化学诱向因子抗体，应用ＡＢＣ法筛选文库，获得了阳性克隆，其插入片段为１．１ｋｂ左右。经Ｇｅｎｂａｎｋ查询证实为一新序列。该文库的建立为筛选和分离目的基因，从基因水平深入研究神经再生。

基于Nrf2/HO-1/NQO1信号通路探讨雷公藤内酯三醇对急性肝损伤大鼠的保护机制

目的:基于核因子E2相关因子2/血红素氧合酶/醌氧化还原酶1(Nrf2/HO-1/NQO1)信号通路探究雷公藤内酯三醇对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护机制。方法:纳入40只SPF级雄性SD大鼠,适应性饲养7 d,而后随机分为4组(正常组、模型组及低剂量组、高剂量组),每组10只。正常组及模型组每日尾静脉注射等体积无菌0.9%氯化钠溶液,低剂量组、高剂量组分别注射100 mg/kg、200 mg/kg雷公藤内酯三醇,均连续注射7 d,于第7天注射雷公藤内酯三醇(模型组为无菌生理盐水)3 h后,对模型组、低剂量组、高剂量组大鼠腹腔注射1 mL/kg CCl4以进行急性肝损伤模型诱导(正常组腹腔注射等体积的橄榄油溶液)。在注射CCl416 h后取大鼠血液及肝脏标本,采用HE组织化学染色法观察大鼠肝组织切片的病理学改变,并检测4组血清肝功能指标水平及肝组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平及mRNA表达量。结果:肝组织病理检查结果显示,正常组肝组织细胞排列整齐,组织结构及形态正常,细胞界限明显,胞质完整。模型组在注射CCl416 h后,肝组织出现肝细胞边界不清晰、细胞排列紊乱等肝细胞坏死特征,且可见炎症细胞浸润及肝细胞严重水肿呈气泡样变。相比于模型组,低剂量组、高剂量组的肝细胞水肿程度及肝细胞坏死特征较轻,且高剂量组轻于低剂量组。模型组、低剂量组及高剂量组的肝指数大于正常组,血清天冬氨酸转氨酶(AST)、甲氨酸转氨酶(ALT)水平高于正常组(P<0.05);模型组肝指数大于低剂量组及高剂量组,且低剂量组大于高剂量组(P<0.05);模型组AST、ALT水平高于低剂量组及高剂量组,且低剂量组高于高剂量组(P<0.05)。模型组、低剂量组及高剂量组的肝组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平及Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达量高于正常组,且模型组高于低剂量组及高剂量组,低剂量组高于高剂量组(P<0.05)。结论:雷公藤内酯三醇可减轻CCl4诱导的大鼠急性肝损伤,其作用机制可能与其能激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路以抑制肝细胞氧化损伤有关。

实验性汞中毒大鼠周围神经损伤的机制

目的:观察慢性汞中毒大鼠行为学和组织中汞含量变代,探讨慢性汞中毒周围神经的病理损伤及机制。方法:8只雄性WisterKA大鼠,随机分为实验组和对照组两组各4只,对照组正常饲养,实验组采用氯化甲基汞4mg/kg隔日灌胃,制作了大鼠亚急性汞中毒动物模型,观察了坐骨神经,脊神经节和前后神经根的病理改变。结果:对照组各项指标均正常,无行为变化。服药第21天,实验组动物出现神经系统损害症状,表现为步态不稳,体质量由服药前(267.0±6.0)g降至(253.0±4.5)g。苏木精-伊红、Bodian及KB染色均显示坐骨神经纤维弯曲、断裂、呈空胞样改变,并见多个髓磷脂小球。甲苯胺兰染色示神经纤维数量减少,可见多个高电子密度的有髓纤维,髓鞘及轴索破坏。NF-200免疫组化染色显示轴索断裂,成块状深染及空胞化。ED-1染色可见神经组织内有大量的单核吞噬细胞浸润。神经剥离的单个纤维,光镜下可见神经轴索断裂成块状,而髓鞘相对完整。脊髓后根明显变性,前根未见明显的变化。脊神经节内神经纤维呈现明显的变性,但神经节细胞保留完好。结论:亚急性汞中毒最早的病理变化发生在周围神经轴索,表现为原发性轴索变性,可能与汞中毒干预了细胞的代谢有关。

运动训练对周围神经损伤大白鼠神经功能恢复的影响

目的:研究在周围神经损伤的动物模型上,运动训练对神经功能恢复的影响。方法:实验在延边医学院附属医院中心实验室完成。用60只Wistar雄性大白鼠,分离出坐骨神经,在胫神经和腓神经分支前的部位用止血钳压迫制造坐骨神经损伤模型,实验动物分为3组,利用动物用电动跑步机调节运动负荷量进行运动训练,第1实验组(n=20)在15°倾斜度和12m/min的速度下运动,第2实验组(n=20)在30°倾斜度和24m/min的运动速度下运动,另一组(n=20)为对照组。两实验组在神经损伤后第2周开始行25min/d,共3周的运动训练,分别测定倾斜台上维持姿势的最大角度,坐骨神经功能指数(SFI)行动学检查及神经传导速度。结果:在倾斜台上能保持原有姿势的最大角度,两实验组(85.0±1.0)°,(85.1±1.3)°均比对照组(75.8±2.2)°增高(P<0.05),但两实验组之间差异无显著性意义(P>0.05)。第2实验组的SFI值(-14.1±1.3)%比第1实验组的SFI值(-19.1±1.0)%减少(P<0.05)。两实验组的潜伏期(119.6±8.1)%,(118.7±3.6)%均比对照组(167.2±5.8)%缩短(P<0.05),但两组间无差异,损伤后的第4周第2实验组的波幅(50.6±1.9)%比另一实验组(45.7±2.2)%增高(P<0.01)。结论:坐骨神经受损伤大白鼠进行运动训练能促进其运动功能的恢复。在神经再生时期。

鼠神经生长因子针剂与甲钴胺片剂序贯治疗对周围神经损伤慢性期患者神经功能康复的临床研究

目的：研究鼠神经生长因子针剂和甲钴胺片剂序贯治疗对5·12汶川地震后什邡市诊断明确的周围神经损伤慢性期（病程大于9个月）患者神经功能康复的临床疗效。方法：将汶川地震后什邡市诊断明确的周围神经损伤慢性期患者随机分为两组,疗程8周。试验Ⅰ组在1-28 d肌肉注射鼠神经生长因子,随后在29-56 d改为口服甲钴胺。试验Ⅱ组在1-28 d口服甲钴胺片剂,随后在29-56 d改为肌肉注射鼠神经生长因子针剂。分别在治疗前、治疗满28 d和56 d这3个时间节点进行肌电图检查,对两组患者动作电位潜伏期的变化进行比较分析,并观察药物不良反应。结果：试验Ⅰ组与试验Ⅱ组患者的一般人口学资料无显著性差异（P=0.48）。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组在治疗28 d后的神经肌肉动作电位潜伏期分别为（54.3＋1.7）ms和（53.6＋1.9）ms,与治疗前动作电位潜伏期进行纵向比较,两组均未达到统计学意义（P1=0.21和P1=0.17）。然而,两组患者在治疗56 d后的神经肌肉动作电位潜伏期分别为（32.2＋1.8）ms和（31.8＋2.1）ms,与治疗前相比,两组患者的动作电位潜伏期均具有明显的统计学差异（P2=0.014和P2=0.008）。两组患者在治疗过程中均没有发生严重药物不良反应事件。结论：鼠神经生长因子针剂与甲钴胺片剂序贯使用对于治疗慢性期周围神经损伤患者是安全、有效的。